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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：羊源性成分PCR檢測試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-02R6379
產(chǎn)品規(guī)格：48T
產(chǎn)品分類：恒溫?zé)晒夥?/span>
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
MMP-8/FITC 熒光標(biāo)記基質(zhì)金屬蛋白-8抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TRP2/FITC 熒光標(biāo)記酪相關(guān)蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AATK AATK細(xì)胞凋亡關(guān)聯(lián)酪激抗體 0.2ml
Mouse Bov IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的小鼠抗IgG 0.1ml
Glycine Receptor alpha 3 甘受體α3/GlyR α3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PYGM 肌肉糖原磷化抗體 0.2ml
TRP2/FITC 熒光標(biāo)記酪相關(guān)蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SCL70/topo I (Human scl70 antibody) ELISA Kit 人抗硬皮病抗體70Multi-class antibodies： 48T
Integrin beta 5 整合β5抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh LIPK 脂肪家庭成員K抗體 0.2ml
fPSA(Human Free Prostate Specific Antigen) ELISA Kit 人游離前列腺特異性抗原 96T
RNF146 環(huán)指蛋白146抗體 0.2ml
CWF19L1 CWF19L1蛋白抗體 0.2ml
Integrin beta 5 整合β5抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit Bovine IgM/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗IgM 2ml
G 延伸因子G2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ACVRL1/ALK1 激活受體樣激1抗體 0.2ml
MBP/FITC 熒光標(biāo)記髓鞘性蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bov IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗IgG 0.1ml
Phospho-Tie2 (Ser1119) /FITC 熒光標(biāo)記磷化血管生成受體2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
羊源性成分PCR檢測試劑盒麥芽糖待測樣品處理試劑盒20次犬組elisa檢測試劑盒
口香糖甘露醇含量比色法檢測試劑盒20次α1微球蛋白elisa檢測試劑盒
食品添加劑甘露醇含量比色法檢測試劑盒20次鮭魚補(bǔ)體蛋白4elisa檢測試劑盒
血液甘露醇含量比色法檢測試劑盒20次鴨白介1elisa檢測試劑盒
酒類甘露糖比色法檢測試劑盒20次猴白介6elisa檢測試劑盒
糖類甘露糖比色法檢測試劑盒20次猴載脂蛋白B100elisa檢測試劑盒
面食甘露糖比色法檢測試劑盒20次兔子Ⅲ型前膠原肽elisa檢測試劑盒
植物甘露糖比色法檢測試劑盒20次兔子S100蛋白elisa檢測試劑盒
甘露糖待測樣品處理試劑盒20次犬轉(zhuǎn)移生長因子β1elisa檢測試劑盒
通用型果糖比色法檢測試劑盒20次白介8elisa檢測試劑盒
酒類果糖比色法檢測試劑盒20次猴α干擾elisa檢測試劑盒
糖類果糖比色法檢測試劑盒20次鴨γ干擾elisa檢測試劑盒
面食果糖比色法檢測試劑盒20次犬球蛋白Eelisa檢測試劑盒
植物果糖比色法檢測試劑盒20次兔子Ⅲ型膠原elisa檢測試劑盒
果糖待測樣品處理試劑盒20次兔子Ⅰ型膠原elisa檢測試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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