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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：大口黑鱸虹彩病毒（LMBV）PCR檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-02R6477
產(chǎn)品規(guī)格：48T
產(chǎn)品分類：水產(chǎn)養(yǎng)殖病害檢測(cè)系列（恒溫?zé)晒夥ǎ?/span>
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
MLCK/FITC 熒光標(biāo)記肌球蛋白輕鏈激抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TREML1/TLT1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCG4 ABC膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.1ml
Mouse Guinea pig IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GnRHR 促性腺釋放受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RAB4 癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab4A抗體 0.2ml
TREML1/TLT1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠髓系細(xì)胞觸發(fā)受體樣轉(zhuǎn)錄因子1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
PDGFsR- Alpha(Human Platelet-Derived Growth Factor Soluble Receptor Alpha) ELISA kit 人血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體αMulti-class antibodies： 48T
E1 glycoprotein 風(fēng)疹病毒糖蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG ascites 小鼠抗羊IgG腹 1ml
VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit 人血管活性肽抑制劑 96T
RNASE4 血管生成核糖核4抗體(肌性側(cè)索硬化癥蛋白) 0.1ml
CREG2 E1A激活基因刺激蛋白2抗體 0.2ml
E1 glycoprotein 風(fēng)疹病毒糖蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit chicken IgM/AP 性磷(AP)標(biāo)記的兔抗雞IgM 0.1ml
GOLPH2 高爾基體膜蛋白GP73抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS2 整合樣金屬蛋白與2型抗體 0.2ml
MAGE-1/HLA-A1 protein /FITC 熒光標(biāo)記黑瘤抗原-1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Bovine IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗IgM 0.1ml
Tenascin/TN /FITC 熒光標(biāo)記細(xì)胞粘合抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
大口黑鱸虹彩病毒（LMBV）PCR檢測(cè)試劑盒組織副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）pcr試劑盒20次小鼠β內(nèi)啡肽受體elisa檢測(cè)試劑盒
體液副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）pcr試劑盒20次小鼠E選擇elisa檢測(cè)試劑盒
糞便副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）pcr試劑盒20次小鼠P選擇elisa檢測(cè)試劑盒
環(huán)境副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）pcr試劑盒20次大鼠卵泡抑elisa檢測(cè)試劑盒
通用型副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次大鼠糖蛋白130elisa檢測(cè)試劑盒
組織副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次大鼠促腎上腺皮質(zhì)elisa檢測(cè)試劑盒
體液副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1elisa檢測(cè)試劑盒
糞便副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次小鼠γ干擾elisa檢測(cè)試劑盒
環(huán)境傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒20次小鼠氧化低密度脂蛋白elisa檢測(cè)試劑盒
副傷寒沙門氏菌A（Salmonella Paratyphi A）標(biāo)準(zhǔn)曲線定量PCR擴(kuò)增檢測(cè)試劑盒2次大鼠胱天蛋白3elisa檢測(cè)試劑盒
通用型副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次大鼠雙氫睪酮elisa檢測(cè)試劑盒
組織副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次大鼠Eelisa檢測(cè)試劑盒
體液副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次大鼠D2elisa檢測(cè)試劑盒
糞便副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次大鼠抵抗elisa檢測(cè)試劑盒
環(huán)境副傷寒沙門氏菌B（Salmonella Paratyphi B）pcr試劑盒20次小鼠褪黑elisa檢測(cè)試劑盒
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