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詳細介紹
參數規(guī)格：
產品名稱：溶藻弧菌PCR檢測試劑盒
產品貨號：FS-02R6479
產品規(guī)格：48T
產品分類：水產養(yǎng)殖病害檢測系列（恒溫熒光法）
產品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Phospho-MLK3 (Thr277/Ser281)/FITC 熒光標記磷化絲/蘇蛋白激MLK3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TREM2/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ABCG5 三磷腺苷結合轉運蛋白G超家族成員5抗體 0.2ml
Mouse Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
GRB2 生長因子受體結合蛋白2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh RAB40A RAS癌基因家族蛋白RAB40A抗體 0.2ml
TREM2/FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠髓系細胞觸發(fā)受體2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
25(OH)D3/25 HVD3(Human 25-Dihydroxy vitamin D3)ELISA Kit 人25羥基D3Multi-class antibodies： 48T
MMP-16 基質金屬蛋白-16抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Interferon alpha 6 干擾α6抗體 0.2ml
HAV(Human hepatitis A virus IgG antibody) ELISA Kit 人抗甲型肝炎病毒IgG抗體 96T
RNA polymerase II RNA聚合II抗體 0.2ml
Alx1 軟骨蛋白1抗體 0.1ml
MMP-16 基質金屬蛋白-16抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit chicken IgM/HRP 辣根過氧化物標記的兔抗雞IgM 0.1ml
GCET2 中心B細胞相關蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADAMTS7 整合樣金屬蛋白與1型-7抗體 0.1ml
MAG-a/L-MAG /FITC 熒光標記髓鞘相關糖蛋白-a抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG 兔抗雞IgG 1mg
TEM8/FITC 熒光標記血管內皮標志物8抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
溶藻弧菌PCR檢測試劑盒通用型禽網狀內皮組織增殖病（Reticuloendotheliosis Virus；REV）20次大鼠孕/孕酮elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒大鼠結蛋白elisa檢測試劑盒
通用型禽白血病J亞型（avian leukosis virus subgroup J；ALV-J）20次小鼠白介16elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒小鼠神經營養(yǎng)因子4elisa檢測試劑盒
通用型禽白血病A/B/C亞型（ALV-A/B/C）基因檢測試劑盒20次小鼠基質金屬蛋白1elisa檢測試劑盒
通用型禽病毒性肺炎（Avian Pneumovirus；APV）20次小鼠球蛋白Melisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒小鼠可溶性P選擇elisa檢測試劑盒
通用型禽霍亂（Pasteurella multocida；PM）基因檢測試劑盒20次大鼠血管緊張Ⅰelisa檢測試劑盒
通用型雞傳染性支氣管（Infectious Bronchitis Virus；IBV）20次大鼠糖皮質類固醇受體elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒小鼠乙型肝炎表面抗體elisa檢測試劑盒
通用型雞傳染性法氏囊?。?/span>Infectious Bursal Disease/GumboroDisease；IBD）基因檢測試劑盒20次小鼠趨化因子elisa檢測試劑盒
通用型雞病毒性關節(jié)炎呼腸孤病毒（Reovirus；REO）基因20次小鼠B因子elisa檢測試劑盒
檢測試劑盒小鼠腫瘤壞死因子αelisa檢測試劑盒
通用型雞新城疫（Newcastle Disease Virus；NDV）20次小鼠內皮抑elisa檢測試劑盒
基因檢測試劑盒大鼠胱天蛋白9elisa檢測試劑盒
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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