詳細(xì)介紹
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ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn):
1、*抗體----高效、靈敏、特異
2、規(guī)范包被操作----吸附均勻,吸附性好,空白值低,孔底透明度高
3、良好的優(yōu)化方案----重復(fù)性高,可靠性強(qiáng)
4、購買本公司的ELISA試劑盒,免費(fèi)代測
5、技術(shù)服務(wù)要求:專業(yè),規(guī)范,高效
6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本
7、可檢測動物類型豐富:人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等
8、可檢測指標(biāo)齊全:炎癥因子、血管生成素、動脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等
9、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠,完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系,科研隊(duì)伍,良好的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,是您可靠的合作伙伴。
檢測原理:
產(chǎn)品僅用于科研試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Human sialic acid (SA) ELISA Kit | FS-H4421 |
ELISA試驗(yàn)時,注意事項(xiàng)如下:
1. 正式試驗(yàn)時,應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 產(chǎn)品僅用于科研在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:
(1) 固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18~24小時。蛋白質(zhì)包被適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它試驗(yàn)條件相同時,觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1~10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇:首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇:對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng),而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體,如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后,應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,尤其是H2O2在臨用前加入 。
操作要點(diǎn):
1)標(biāo)本的采取和保存:可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本;
2)試劑的準(zhǔn)備:所需試劑、蒸餾水、去離子水、自配的緩沖液;
3)加樣:一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。
4)保溫:ELISA中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育。
5)洗滌:洗滌的方式除某些ELISA儀器配有特殊的自動洗滌儀外,手工操作有浸泡式和流水沖洗式兩種。
6)顯色和比色:顯色是ELISA中的最后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。儀器準(zhǔn)備為酶標(biāo)儀。
7)結(jié)果判斷:分定性判定和定量判定。
膽汁液態(tài)培養(yǎng)基供應(yīng)英文:Bile broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于糞鏈球菌的膽汁耐受試驗(yàn)。
M-腸道菌瓊脂說明書英文:M-Enterococcus Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于水中或其它物質(zhì)中腸球菌分離培養(yǎng)和計(jì)數(shù)(濾膜法或劃線法)
糞腸球菌瓊脂說明書英文:Enterococcus faecalis Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于糞腸球菌的選擇性分離
THB培養(yǎng)基供應(yīng)英文:THB Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于鏈球菌增菌培養(yǎng)
PS瓊脂說明書英文:PS Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于消化球菌的培養(yǎng)
腸球菌肉湯供應(yīng)英文:Enterococcus Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于腸球菌增菌培養(yǎng)
腦心浸液肉湯說明書英文:Brain Heart Infusion Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250 產(chǎn)品用途:營養(yǎng)豐富,用于培養(yǎng)各種細(xì)菌
多粘菌素B供應(yīng)英文:產(chǎn)品規(guī)格:1.5mg/支*5 產(chǎn)品用途:每支添加于100mlHB8297-1中,用于豬鏈球菌的增菌培養(yǎng)
腦-心浸萃液態(tài)培養(yǎng)基供應(yīng)英文:Brain Heart Infusion Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于營養(yǎng)苛求細(xì)菌的增菌培養(yǎng)
腦心浸液瓊脂(BHIA)說明書英文:Brain Heart infusion Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于營養(yǎng)苛求細(xì)菌的增菌培養(yǎng)
Pfizer腸球菌選擇性瓊脂(PSE瓊脂)說明書英文:Pfizer Enterococcus Selective Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 產(chǎn)品用途:用于糞鏈球菌的選擇性分離(SN標(biāo)準(zhǔn))
菌株類型:E.coli
培養(yǎng)基:LB培養(yǎng)基
生長條件:37 ℃, 有氧
基因型:C41(DE3)感受態(tài)細(xì)胞基因型
抗性:無抗
質(zhì)粒轉(zhuǎn)化條件:42 ℃熱激
應(yīng)用:蛋白表達(dá)
誘導(dǎo)方法:IPTG
菌株特點(diǎn):
過表達(dá)C41(DE3), C41(DE3) pLysS, C43(DE3), and C43(DE3) pLysS感受態(tài)細(xì)胞宿主菌能夠有效表達(dá)來源于各個物種包括細(xì)菌,酵母,植物,病和動物等多個物種的有蛋白。
該系列宿主菌基因中含有突變,可以包容有蛋白的表達(dá)。C41(DE3)來源于BL21(DE3)。該宿主菌含有一個基因突變,能夠降低T7 RNAP的酶活力,所以能夠阻止過表達(dá)重組表達(dá)有蛋白的細(xì)胞死亡。
正如標(biāo)準(zhǔn)的BL21(DE3)菌株,過表達(dá)菌株C41(DE3), C41(DE3)pLysS, C43(DE3), 和C43(DE3)pLysS是λDE3的溶源性菌株。這些菌株在lacUV5啟動子的下游含有一個T7 RNA聚合酶基因。這些宿主菌適合于表達(dá)克隆于T7啟動子表達(dá)載體上的基因。過表達(dá)菌株C41(DE3), C41(DE3)pLysS, C43(DE3), 和C43(DE3)pLysS在lon和ompT蛋白酶的缺陷上是不同的。
人唾液酸ELISA檢測試劑盒Lactobacillus│sakei subsp. sakei 中文名稱:清酒乳桿菌Lactobacillus│sakei subsp. sakei提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:6生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:99%
Leuconostoc│pseudomesenroides 中文名稱:假腸膜明串珠菌Leuconostoc│pseudomesenroides提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:33生長條件:26℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:95%
Snotrophomonas nitritireducens 中文名稱:還原亞硝酸鹽寡養(yǎng)單胞菌Snotrophomonas nitritireducens分離基物:laboratory scale biofilr提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Denitrification, N2O production培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:NB生長條件:30℃,好氧24-48h,鏡檢為陰性桿菌,純存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:95%
Cupriavidus│basilensis 中文名稱:貪銅菌Cupriavidus│basilensis分離基物:laboratory fixed-bed reactor提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:Utilizes benzene, chlorobenzene, 2,4-dichlorophenol, 2,6-dichlorophenol, phenol, toluene培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法 純度:96%
Paracoccus│pantotrophus 中文名稱:全食副球菌Paracoccus│pantotrophus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:Produces ribulose-1,5-bisphospha carboxylase (1755). Chemolithotrophic growth with hydrogen (160). Preservation (3363, 4265). Utilizes thiosulfa (1623). Removal of nitra (4345).培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:98%
Lysobacr enzymogenes subsp. enzymogenes 中文名稱:產(chǎn)酶溶桿菌產(chǎn)酶亞種Lysobacr enzymogenes subsp. enzymogenes分離基物:土壤提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:營養(yǎng)肉汁瓊脂: 3.0g,蛋白胨 10.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃,15min。生長條件:30℃,好氧存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;定期移植法 純度:95%
Azospirillum│lipoferum 中文名稱:生脂固氮螺菌Azospirillum│lipoferum提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:448生長條件:30℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:95%
Lactobacillus│bulgaricus 中文名稱:保加利亞乳桿菌Lactobacillus│bulgaricus提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:制作酸奶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:6生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法 純度:95%