轉(zhuǎn)基因品系油菜RT73染料法qPCR試劑盒注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．擴增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系油菜RT73染料法qPCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
服務(wù)流程：
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設(shè)計特異性引物和熒光探針（染料法只需設(shè)計引物）
2、抽提DNA、RNA，并對RNA進行逆轉(zhuǎn)錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結(jié)果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品（引物、RNA和cDNA）
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復，則標記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標準曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復，則標記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
GSK-3ALPHA蛋白表達定量　Cytohesin 1 　100 ul

細胞GSK-3BETA蛋白表達流式細胞儀　DNAJC2/MPP11 　100 ul

載玻片細胞GSK-3BETA蛋白表達熒光顯微鏡　DAPK1 　1 Kit

冰凍切片組織GSK-3BETA蛋白表達熒光顯微鏡　CREST 　1 Kit

石蠟切片組織GSK-3BETA蛋白表達熒光顯微鏡　DCBLD2 　100 ul

載玻片細胞GSK-3BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡　DPPA4 　100 ul

冰凍切片組織GSK-3BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡　Claudin 23 　100 ul

石蠟切片組織GSK-3BETA蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡　Claudin 7 　20 ul

細胞GSK-3BETA蛋白表達比色法定量　Cortactin 　100 ul

細胞GSK-3BETA蛋白表達熒光定量　CKAP4 　100 ul

GSK-3BETA蛋白表達西方雜交分析　CKS2 　100 ul

GSK-3BETA蛋白免疫共沉淀分析　Claudin 23 　100 ul

GSK-3BETA蛋白表達定量　CREB1 　100 ul

細胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達流式細胞儀　CREB3L2 　100 ul

載玻片細胞PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達熒光顯微鏡　CREST 　100 ul

冰凍切片組織PI-3 KINASE P110BETA蛋白表達熒光顯微鏡　CRMP1 　100 ul
轉(zhuǎn)基因品系油菜RT73染料法qPCR試劑盒Pseudomonas│aeruginosa分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)脂肪酶培養(yǎng)基: CM0033生長條件: 26-30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Bacillus│pumilus分離基物: 爛麻絨提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 分類 研究培養(yǎng)基: 0002生長條件: 32℃存儲條件: 真空冷凍干燥法；礦物油法；定期移植法

Escherichia│coli提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 保存Human APOBEC3F（126A mutation）基因的基因工程細菌培養(yǎng)基: CM0033生長條件: 37C存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)

枯草芽孢桿菌種屬: Bacillus│subtilis提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Acidithiobacillus│ferrooxidans分離基物: 礦山酸性中提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 718生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

Streptomyces│virginiae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Rhizopus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Paecilomyce│lilacinus提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 26℃

Chaetomium│globosum分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0014生長條件: 26C存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。