轉(zhuǎn)基因品系油菜46A16探針法qPCR試劑盒注意事項：1．基礎(chǔ)程序；2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；3．反應(yīng)時間；4．循環(huán)次數(shù)；5．PCR 反應(yīng)液的配制；6．PCR技術(shù)的基本原理；7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；8．PCR擴增產(chǎn)物；9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因品系油菜46A16探針法qPCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
產(chǎn)品特點：
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
?
服務(wù)流程：
1、根據(jù)客戶提供的基因序列設(shè)計特異性引物和熒光探針（染料法只需設(shè)計引物）
2、抽提DNA、RNA，并對RNA進行逆轉(zhuǎn)錄
3、實時熒光定量PCR
4、提供完整的實驗結(jié)果報告(檢測數(shù)據(jù)、溶解曲線、擴增曲線)
5、返還樣品（引物、RNA和cDNA）
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液，*用帶芯槍頭，下同）。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照（濃度為 1×10E8 拷貝/μL，試劑盒提供)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA，本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個樣品，則需要進行 N+2 個樣品提取，多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進行）
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個 PCR 管，其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品，1 個用于 PCR 陰性對照（用水做模板），1 個用于PCR 陽性對照。
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
NHS-biotin;生物素琥珀酰亞酯 Cadherin-6 (D3T3I) Rabbit mAb2,二酚

消旋腎上腺素；DL-腎上腺素AMPKα (D5A2) Rabbit mAb (Biotinylad)BOC-D-絲氨酸甲酯

雷貝拉唑鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Claudin-2 (E1H9O) Rabbit mAb2,5-二羥

雷貝拉唑鈉IκBα (44D4) Rabbit mAb3,二甲

頭孢克肟USP18 (D4E7) Rabbit mAb2,5-二

頭孢克肟(標(biāo)準(zhǔn)品)USP18 (D4E7) Rabbit mAb紅色KB/5--2-

咪草煙IκBα (L35A5) Mouse mAb (Amino-rminal Antigen)2--5-

O-去甲文拉法辛(R型)IκBα (L35A5) Mouse mAb (Amino-rminal Antigen)2,5-二

O-去甲文拉法辛(S型)RANK Ligand (L300) Antibody間二酚

奧美沙坦SP Antibody交酯

1,二氨基胍鹽酸鹽 GSK-3α (D80D1) XP® Rabbit mAb美羅培南側(cè)鏈

3,5-二-L-甲狀腺素,3,5-二甲腺原氨酸GABA(B)R2 (C44A4) Rabbit mAb(4R,5S,6S)-[[(3S,5S)-5-[(二甲基氨基)甲酰基-1-[[(硝基芐基)氧]羰基]-吡咯烷基]硫]-6-[(1R)-1-羥基]-甲基-7-氧代-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚-2--2-羧酸 硝基芐基酯

短葉松素(標(biāo)準(zhǔn)品)CREB (D76D11) Rabbit mAb美羅培南

環(huán)孢素D Akt (pan) (40D4) Mouse mAb (Biotinylad)甲基酸酯

帕比司他CDC20 Antibody2-氨基-1-丁

HDAC靶點抑制劑Cardiogenesis Marker Antibody Sampler Kit戊酮

鹽酸洛美利PAK2 (3B5) Mouse mAb酸甲酯

酯蟾毒配基；蟾力蘇(標(biāo)準(zhǔn)品)MacroH2A1.2 Antibody吡咯烷酮
轉(zhuǎn)基因品系油菜46A16探針法qPCR試劑盒冰凍切片細(xì)胞有絲分裂熒光顯微鏡　KPNA5 　100 ul

石蠟切片細(xì)胞細(xì)胞有絲分裂熒光顯微鏡　KPNA4(Karyopherin subunit alpha-4) 　20 ml

載玻片細(xì)胞有絲分裂NBT顯色　KPNA6(Karyopherin subunit alpha-6) 　100 ml

冰凍切片細(xì)胞有絲分裂NBT顯色　KPTN 　100 ul

石蠟切片細(xì)胞有絲分裂NBT顯色　KRAP/SSFA2 　100 ul

HOECHST33342簡易細(xì)胞核形態(tài)染色　KRAS(GTPase KRas) 　500 ul

HOECHST33342/PI簡易細(xì)胞核形態(tài)染色　KLHDC5 　100 ul

吖啶橙簡易細(xì)胞核形態(tài)染色　KRR1 　100 ul

PROPIDIUM IODIDE簡易細(xì)胞核形態(tài)染色　KRI1 　100 ul

DAPI簡易細(xì)胞核形態(tài)染色　KLHDC4 　100 ul

ETHIDIME BROMIDE簡易細(xì)胞核形態(tài)染色　KLHL32 　100 ul

羅丹明123簡易細(xì)胞核外形態(tài)染色　KLHL35 　100 ul

HOECHST33258簡易細(xì)胞核形態(tài)染色　KLHL34 　1 Kit

同位素標(biāo)記法細(xì)胞端粒酶活性TRAP電泳分析　KRT12 　100 ul

同位素標(biāo)記法組織端粒酶活性TRAP電泳分析　KLHL10 　20 ul

熒光標(biāo)記法細(xì)胞端粒酶活性TRAP電泳分析　KRT33B 　100 ul