詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:水牛源性成分核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管
產(chǎn)品貨號:FS-02R6420
產(chǎn)品規(guī)格:48T 0.2PCR管
產(chǎn)品分類:PCR-熒光探針法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
6-keto-PGF1a ELISA Kit 大鼠6酮前列腺F1aMulti-class antibodies: 48T
TNFAIP3 壞死因子α誘導蛋白3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh GLT8D1 糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體 0.2ml
F IX (Mouse Fcoagulation factor IX ) ELISA Kit 小鼠因子Ⅸ 96T
NR0B1 腎上腺發(fā)育不全相關(guān)蛋白抗體 0.2ml
APE1 多功能DNA修復抗體 0.1ml
TNFAIP3 壞死因子α誘導蛋白3抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
VCAM-1/CD106(Human Vascuolar cell adhesion molecule 1) ELISA kit 人血管內(nèi)皮細胞粘附分子1Multi-class antibodies: 48T
GHRF/GHRH 生長釋放抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
SAA(Human Serum amyloid A) ELISA Kit 人血清淀粉樣蛋白A 96T
Retinal S antigen 視網(wǎng)膜S抗原抗體 0.2ml
CTNNBIP1 β鏈接相互作用蛋白1抗體 0.1ml
GHRF/GHRH 生長釋放抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit Guinea pig IgG/Cy3 Cy3標記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Gibberellins 赤霉抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh AFP 甲胎蛋白抗體 0.1ml
LFABP/FABP-1 /FITC 熒光標記肝臟型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG 兔抗羊IgG 1mg
phospho-STAT1 (Ser727) /FITC 熒光標記磷化信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
水牛源性成分核酸檢測試劑盒48T0.2PCR管猴組織蛋白D(CTSD)elisa檢測試劑盒
猴組織因子(TF)elisa檢測試劑盒
猴G蛋白β1(GNβ1)elisa檢測試劑盒
豬乳脫氫B(LDHB)elisa檢測試劑盒
豬過氧化還原5(PRDX5)elisa檢測試劑盒
豬丙酮M2型同工(PKM2)elisa檢測試劑盒
猴GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)elisa檢測試劑盒
猴尿相關(guān)蛋白C(UreC)elisa檢測試劑盒
猴胸腺基質(zhì)生成(TSLP)elisa檢測試劑盒
猴抗白蛋白抗體(AAA)elisa檢測試劑盒
豬血小板親和蛋白2(PKP2)elisa檢測試劑盒
豬白介16(IL-16)elisa檢測試劑盒
猴血管緊張II受體2(ANGⅡR2)elisa檢測試劑盒
豬GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)elisa檢測試劑盒
豬肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)elisa檢測試劑盒