Fbg人血纖蛋白原ELISA試劑盒公司正在銷售的產(chǎn)品：抗異質(zhì)型核糖核蛋白抗體/抗RA33抗體ELISA試劑盒 anti-hnRNP-ab/anti-RA33-abHuman anti-hnRNP-ab/anti-RA33-ab ELISA Kit抗乙型肝炎病毒核心抗體ELISA試劑盒 HBcAbHuman anti-hepatitis B virus core antibody，HBcAb ELI

服務(wù)：

我們可以根據(jù)您的應(yīng)用需要，比如在檢測范圍、種屬以及靈敏度等方面有特殊要求，而量身定制檢測試劑盒，有效控制檢測試劑成本。公司產(chǎn)品僅用于科研并可提供免費(fèi)代測。

產(chǎn)品名稱：Fbg人血纖蛋白原ELISA試劑盒
英文名稱：Human Fibrinogen,Fbg ELISA Kit
貨號(hào)：A097114
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T。

主要成分：酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等

性狀：盒裝液體

試劑盒保存：2-8℃低溫保存。

標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

標(biāo)本的采集與保存：

1、血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2 小時(shí)或4oC 過夜，然后1000×g 離心20 分鐘，取上清即

可，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2、血漿：用EDTA 或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30 分鐘內(nèi)于2-8oC 1000×g 離心15 分鐘，

取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、組織勻漿：

1） 取適量組織塊，于預(yù)冷PBS（0.01mol/L, pH 7.0-7.2）中清洗去除血液，稱重后備用（組織塊較大需先剪碎后再勻漿）；

2） 可同時(shí)選用多種勻漿方法達(dá)到較好的破碎效果：首先將組織塊移入玻璃勻漿器，加入5-10mL 預(yù)冷PBS 進(jìn)行充分研磨，該過程需在冰上進(jìn)行（有條件實(shí)驗(yàn)室可選用機(jī)器勻漿）；得到的勻漿液可再利用超聲破碎或反復(fù)凍融進(jìn)一步處理（超聲破碎過程中注意冰浴降溫；反復(fù)凍融法可重復(fù)2 次）。

3） 將制備好的勻漿液于5000×g 離心5 分鐘，留取上清即可檢測。

4、其它生物標(biāo)本：請1000×g 離心20 分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20oC 或-80oC 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
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ELISA試劑盒優(yōu)點(diǎn)：

1、抗體----高效、靈敏、特異

2、規(guī)范包被操作----吸附均勻，吸附性好，空白值低，孔底透明度高

3、先進(jìn)的優(yōu)化方案----重復(fù)性高，可靠性強(qiáng)

4、購買本公司的ELISA試劑盒，免費(fèi)代測

5、技術(shù)服務(wù)要求：專業(yè)，規(guī)范，高效

6、適用于體液、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等多種類型的樣本

7、可檢測動(dòng)物類型豐富：人、猴、大鼠、小鼠、豚鼠、黃金地鼠、兔、豬、犬、牛、綿羊、山羊、鵝、雞、蝦、河蟹、鱸魚、斑馬魚等

8、可檢測指標(biāo)齊全：炎癥因子、血管生成素、動(dòng)脈粥樣硬化因子、趨化因子、生長因子基質(zhì)金屬蛋白酶、脂肪因子等等

9、經(jīng)濟(jì)、實(shí)惠、可靠，完善、穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)體系，優(yōu)秀的科研隊(duì)伍，先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備、準(zhǔn)確可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，是您可靠的合作伙伴。

注意事項(xiàng)：

1加樣：

①實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差；

②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；

③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。

2.溫育：

①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件；

②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；

③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)"，因此盡量采用水??；

3.洗板：

①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；

②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；

③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；

4.顯色：

ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。

5.判定：

讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。

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產(chǎn)品屬性：

公司產(chǎn)品僅用于科研組成及試劑配制 :

1. 酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。

3. 樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。

4. 標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。

6. 標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）

8. 底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

ELISA試劑盒的組成:

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ELISA技術(shù)的*性：

（一）靈敏度高

雖然酶活性調(diào)節(jié)ELISA方法的靈敏度目前并不十分理想，但在酶活性放大ELISA中，檢測的靈敏度遠(yuǎn)比RIA高。根據(jù)質(zhì)量作用定律。即免疫反應(yīng)所形成的免疫復(fù)合物量與反應(yīng)物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數(shù)為1。已知1個(gè)摩爾濃度含6.02×1023個(gè)分子，那么理論推測酶活性放大Elisa方法的zui低檢測限可達(dá)1.7×10-24mol/L。雖然在實(shí)際應(yīng)用中由于反應(yīng)條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響，往往達(dá)不到這個(gè)水平（大于104個(gè)分子），但表明Elisa在靈敏度方面的改進(jìn)潛力是很大的。

（二）特異性強(qiáng)

從免疫反應(yīng)的角度來說，Elisa與RIA的特異性應(yīng)該是。但在ELISA方法中，由于作用檢測指示劑的酶與其底物的反應(yīng)有專一性，從而增加了該方法的特異性。

（三）對儀器設(shè)備要求不高，測定成本低

Elisa測定在普通實(shí)驗(yàn)室便可進(jìn)行，常用的儀器設(shè)備包括加樣器、培養(yǎng)箱、酶標(biāo)專用讀數(shù)器等。按現(xiàn)有價(jià)格折算，酶標(biāo)儀的價(jià)格只及液閃儀的1/6至1/4，因此每測定一個(gè)樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法，還可在野外進(jìn)行，操作十分方便。

（四）方法快速、簡便

均質(zhì)酶免疫測定方法操作時(shí)，所有反應(yīng)試劑均在同一體系內(nèi)進(jìn)行，不需任何分離步驟，操作十分簡便、快速，數(shù)分鐘便能得出結(jié)果。某些定性Elisa試劑盒，如國外的某些奶牛發(fā)情鑒定和妊娠診斷Elisa試劑盒，數(shù)分鐘時(shí)間便能完成一次測定。

（五）試劑保存時(shí)間較長

作為檢測指示劑用的酶和酶標(biāo)記物，在低溫或干燥條件下相對穩(wěn)定，可保存半年至數(shù)年之久。

（六）自動(dòng)化程度高

Elisa由于不存在放射性同位素污染，因此，除加待測樣本需要人工操作外，其他各步驟均可用儀器自動(dòng)化完成。在這種自動(dòng)化條件下，平均每人每天可完成2000余個(gè)樣本的檢測工作。

（七）方法種類多

ELISA技術(shù)可以充分利用單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)，并能利用某些非免疫反應(yīng)試劑（如SPA、凝集素等）的作用，發(fā)展成為許多新方法。此外，發(fā)展Elisa技術(shù)還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因?yàn)橛糜贓LISA技術(shù)的酶其種類遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。生物界的酶多種多樣，有希望開發(fā)很多類型的酶用于Elisa，并建立相應(yīng)的ELISA方法。相反，自然界的化學(xué)元素是有限的，放射性同位素的種類更加有限。第二，由于酶的多樣性，酶作用底物也有多種多樣，與此相對應(yīng)的生色源或供氫體的種類也有遠(yuǎn)大的開發(fā)和發(fā)展?jié)摿Α?/span>
操作步驟：

1.編號(hào)：將樣品對應(yīng)微孔按序編號(hào)，每板應(yīng)設(shè)陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）

2.加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液 40μl，然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，

3.溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。

4.配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此 重復(fù) 5 次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑 50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同 3。

8.洗滌：操作同 5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑 A50μl，再加入顯色劑 B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10 分鐘.

10.終止：每孔加終止液 50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11.測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

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