快速熒光PCR是目前特異性和靈敏度較高的檢測(cè)技術(shù)。PCR技術(shù)實(shí)際上是一種分子生物學(xué)技術(shù),通過(guò)放大特定的DNA或RNA(也可看作體外的特殊DNA復(fù)制),能快速得到患者體內(nèi)病毒或細(xì)菌的含量,為疾病的診斷和治療及療效動(dòng)態(tài)評(píng)估提供了有力的參考依據(jù)。它是通過(guò)熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性的探針,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤,實(shí)時(shí)在線監(jiān)控反應(yīng)過(guò)程,結(jié)合相應(yīng)的軟件可以對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析,計(jì)算待測(cè)樣品模板的初始濃度。
原理:
PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針,該探針為一寡核苷酸,兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;剛開(kāi)始時(shí),探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5'端-3'端外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成*同步?;蛘呤褂脽晒馊玖稀?梢越Y(jié)合到雙鏈DNA上面,當(dāng)體系中的模板被擴(kuò)增時(shí),可以有效結(jié)合到新合成的雙鏈上面,隨著PCR的進(jìn)行,結(jié)合的染料越來(lái)越多,被儀器檢測(cè)到的熒光信號(hào)越來(lái)越強(qiáng),從而達(dá)到定量的目的。
快速熒光PCR優(yōu)勢(shì):
快速精準(zhǔn)的溫控系統(tǒng):升降溫速率、溫度準(zhǔn)確性等性能全面提升,升降溫速率達(dá)≥8.0℃/s,降溫速率≥6.2℃/s,溫度準(zhǔn)確性≤0.1℃,并可實(shí)現(xiàn)12路溫度梯度,可顯著縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
高效的熒光掃描:采用高亮LED免維護(hù)光源,完成48孔4色或2色熒光掃描僅需2秒,對(duì)于需要使用高分辨熔解曲線功能的用戶(hù),可顯著降低全程實(shí)驗(yàn)時(shí)間,大大提高工作效率。
特色斷電保護(hù):實(shí)驗(yàn)運(yùn)行時(shí)瞬間斷電,來(lái)電后無(wú)需點(diǎn)擊任何按鈕,即可繼續(xù)運(yùn)行未完成實(shí)驗(yàn)。
出色的環(huán)境適應(yīng)能力:體積小,重量輕,方便搬運(yùn),移動(dòng)前后無(wú)需拆卸運(yùn)輸鎖,并且不需要相應(yīng)熒光校準(zhǔn)即可直接使用。
單機(jī)運(yùn)行,操作便捷:擁有7英寸全彩觸摸屏,單機(jī)運(yùn)行至少可存儲(chǔ)1000次實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),連接熱敏打印機(jī)后可直接打印實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
軟件功能多樣:快速熒光PCR支持定量、相對(duì)定量、等溫?cái)U(kuò)增、熔解曲線、基因分型、終點(diǎn)熒光分析等功能,可滿(mǎn)足絕大多數(shù)用戶(hù)的實(shí)驗(yàn)需求。