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EIGHT (8)測(cè)試樣品中的光聚集和 Ristocetin 輔因子測(cè)試

CHRONO-LOG 型號(hào)4904 + 4光學(xué)聚合系統(tǒng)現(xiàn)已推出(4)或(8)通道配置，由一個(gè)或兩個(gè)4通道模塊組成: 型號(hào)4904 +-可單獨(dú)購買，包括測(cè)試通道(1)至(4) ，內(nèi)部 AGGRO/LINK 計(jì)算機(jī)接口與(2)軟件包... AGGRO/LINK Opti8用于執(zhí)行聚合，vW CoFactor Opti8用于執(zhí)行 Ristocetin 輔因子測(cè)試，外加一套試劑和初始用品。型號(hào)490 + 4-擴(kuò)展4通道模塊到(8)通道... 測(cè)試通道(5)通過(8) ... 只需要一個(gè)單一的互連電纜。型號(hào)4904 + 4-一個(gè)完整的8通道系統(tǒng)[2,4通道模塊]

樣品體積-250μL [不需要間隔]或500μL 連續(xù)監(jiān)測(cè)，并發(fā)出警告信息: 溫度、攪拌速度和超量程檢測(cè)，以防止在基線未設(shè)置的情況下操作。帶按鈕設(shè)置的液晶顯示器用新的校準(zhǔn)改進(jìn)光學(xué)電路的校準(zhǔn)用定制/可選的跟蹤顏色

使用新型 CHRONO-LOG 型號(hào)4904 + 48通道光學(xué)聚集系統(tǒng)，在 LTA 血小板聚集試驗(yàn)上花費(fèi)了太多的時(shí)間、樣品和試劑

怎么做到的？減少抽血量... 理想的小樣本，因?yàn)槊看螠y(cè)試只需要250μL 的 PRP，每次測(cè)試使用更少的試劑... 省錢！提高周轉(zhuǎn)時(shí)間... 一(1)運(yùn)行和完成！使用(2)自動(dòng)數(shù)據(jù)處理，(1)膠原蛋白，(1)花生四烯酸，(1)腎上腺素，(2)里斯托西汀和(1)其他試劑進(jìn)行測(cè)試。保持準(zhǔn)確性... 以及你期望的可靠性，通過改進(jìn)光學(xué)電路的自校準(zhǔn) Chrono-log

臨床應(yīng)用: 血管性血友病的診斷研究抗血小板治療的監(jiān)測(cè)效果

研究應(yīng)用: 血小板研究藥物研究用丙酸鈉，洗滌或凝膠過濾血小板檢測(cè)肝素誘導(dǎo)的低血小板計(jì)數(shù)

測(cè)試通道: 4個(gè)通道[一個(gè)模塊]或8個(gè)通道[兩個(gè)，四個(gè)通道模塊]與: 光聚集測(cè)試 PRP，凝膠過濾或洗滌血小板超量程檢測(cè)，以防止操作，如果基線沒有設(shè)定。前面板顯示和控制: 液晶顯示-24個(gè)字符 x 2行液晶顯示，每個(gè)通道顯示一個(gè): 顯示溫度攝氏度，攪拌轉(zhuǎn)速，PPP/參考選擇，校準(zhǔn)模式和警告信息。設(shè)置基線按鈕-將聚合基線設(shè)置為0% 。選擇按鈕-選擇溫度，攪拌速度和 PPP/參考[一個(gè)按鈕選擇(2)通道]。設(shè)置按鈕-調(diào)整溫度，攪拌速度和 PPP/參考[一個(gè)按鈕設(shè)置(2)渠道]。校準(zhǔn)開關(guān). 光學(xué)電路的按鍵激活校準(zhǔn)。加熱器塊-電子控制可設(shè)置在35.0 oC 和39.0 oC 之間的0.1 oC 的步驟。攪拌器-400至1200轉(zhuǎn)每分鐘在100轉(zhuǎn)每分鐘的步驟與“攪拌停止"的立場(chǎng)。

試樣體積: 250uL 或500uL 樣品[微量試驗(yàn)不需要間隔]試管: P/N 312攪拌棒: 可重復(fù)使用的聚四氟乙烯涂層 P/N 313，一次性 P/N 311通用規(guī)格(每個(gè)模塊) : 功率要求-開關(guān)可選115或230伏交流電; 50/60赫茲，最大150瓦特。尺寸-14英寸(35.5厘米)寬，8.5英寸(21.6厘米)高，15英寸(38厘米)深重-19.3磅。(8.75公斤)孵化井-每個(gè)通道2個(gè)井，每個(gè)井@36.5 oC + 1.0 oC，當(dāng)溫度設(shè)定在37 oC 時(shí)輸出: 系列: 內(nèi)部 AGGRO/LINK 接口，用于計(jì)算機(jī)和 AGGRO/LINK 以及 vW CoFactor Opti8軟件。模擬: 后底盤上的連接器，用于與條形圖記錄器的接口。

在1.0 mL 樣品中——通常為450μL 血液，用450μL 生理鹽水加100μL CHRONO-LUME 試劑稀釋，當(dāng)用 Ristocetin 測(cè)試時(shí)，沒有 CHRONO-LUME 的1.0 mL 血液樣品。* * 在用 Ristocetin 測(cè)試時(shí)，在500μL 樣品-通常為450μL 富含血小板的血漿加50μL CHRONO-LUME 試劑或沒有 CHRONO-LUME 的500μL 富含血小板的血漿中。(對(duì)于250μL 微體積的樣品，用 P/N 365橡膠墊片以半衰期法減少體積。)注釋單位，注釋單位，注釋單位，注釋單位，注釋單位。最終指令。每單位測(cè)試容量每個(gè)測(cè)試單位 WB/PRP WB/PRP * PRP * * WB PRP386凝酶1.0 mL 10 Unit/mL 1 Unit 100μL50μL1020385膠原1.0 mL 1mg/mL 2μg/mL 2μL1μL5001000390花生四烯酸0.7 mL 50 mM 0.5 mM 10μL5μL70140396 Ristocetin 0.5 mL 125 mg/mL 1.0 mg/mL/8μL5μL621001.25 mg/mL395 Chrono-lume 4x1.25 mL N/A N/A 100μL50100384ADP5.0 mL 1mM10μL5μL5001000393腎上腺素5.0 mL/50 mL 10mM/1mM50μM/5μM5μL2.5 μL10001000387 ATP 標(biāo)準(zhǔn)5.0 mL 2μmol2nmol 5μL5μL10001000導(dǎo)電測(cè)試注意: 不需要多種庫存溶液。要改變最終濃度，調(diào)整移液管容量。

由于每次測(cè)試只需要微量的試劑，因此必須避免引入過量的試劑。因此，在抽取試劑后擦拭微量移液管端外側(cè)，以除去附著在端外側(cè)的多余試劑。不要將試劑放入試管上方或試管側(cè)面，因?yàn)樵噭?huì)附著在試管側(cè)面，不會(huì)與樣品混合。使用 AGGRO/LINK 與 Windows 兼容軟件和遵循 NCCLS GP2-A3格式的程序可在磁盤上或通過電子郵件獲得: •全血聚集•全血聚集與 ATP 釋放• PRP 光聚集•光聚集與 ATP 釋放控制和患者樣本-收集已知影響血小板和患者樣本的藥物的正?？刂?，將其收集到無菌真空管中，不可濕襯里和1/10體積的3.2% 緩沖檸檬酸鈉。抽取20-30毫升血液進(jìn)行光學(xué) PRP 檢測(cè)，或抽取5-10毫升血液進(jìn)行全血檢測(cè)。

參考文獻(xiàn)(1) Ingerman-Wojenski CM 和 Silver MJ: 一種用全血光度計(jì)快速篩查血小板功能障礙的方法。1984年止帶51-2(154-156)。(2) White M MC，Jennings LK: 血小板方案: 研究和臨床實(shí)驗(yàn)室程序。學(xué)術(shù)出版社，1999年。(3) Podczasy JJ，Lee J，Vucenik I: 全血光聚集的評(píng)價(jià)。克林 · 阿普爾。血栓/止血，3(3) : 190-195,1997。(4) Sweeney JD，Hoernig LA，Michnik A 和 Fitzpatrick JE: 全血聚集測(cè)定法。樣本采集和學(xué)習(xí)成績延遲對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響。Am J ClinPathol 1989; 92:676-679.(5) Feinman RD，Detwiler TC 和 Ingerman-Wojenski C: 作為研究和臨床工具的 Lumi 聚合度計(jì)。生理學(xué)和藥理學(xué)。版權(quán)所有1985年由學(xué)術(shù)出版社公司(6) Sirridge，M: 出血病人的實(shí)驗(yàn)室評(píng)估。臨床檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，第4卷，第2期，1984年6月。(7) Nieuwenhuis HK，Akkerman J-W N 和 Sixma JJ: 出血時(shí)間延長和聚集測(cè)試正常的患者可能存在儲(chǔ)存池缺陷: 對(duì)106名患者的研究。血70-3(620-623)1987。(8) Sweeney JD，Hoernig LA and Fitzpatrick JE: 血管性血友病中的全血聚集。Am J Hematol 32:190-193(1989).(9) UMDNJ，Spec.新不倫瑞克止血實(shí)驗(yàn)室。

(10) Sweeney JD，Hoernig LA，Behrens AN，Novak E，and Swank RT: Von Willebrand’s Variant (type II Buffalo)。美國臨床病理學(xué)雜志，第93卷，第4期，(522-525)1990年。(11) Miller JL: 血小板型血管性血友病。血栓和止血第7卷，第4期，1985年。(12) Taylor ML，Misso NLA，Stewart GA，Thompson PJ: 不同劑量的阿匹林對(duì) PAF，膠原蛋白和花生四烯酸誘導(dǎo)的人血小板活化的影響.Br J Clin Pharm. ，(1992) ，33,25-31。(13)蘭辛英厄姆醫(yī)療中心。(14) Riess H，Braun G，Brehm G 和 Hiller E: 人全血血小板聚集的評(píng)價(jià)。我是 J ClinPathol。第85卷，第1期，(50-56)1986。(15) Gengo FM，Rainka M，Robson M，Gengo MF，Forrest a，Hourihane M 和 Bates v: 接受二級(jí)卒中預(yù)防治療的患者和復(fù)發(fā)性缺血事件患者中血小板對(duì)阿匹林無反應(yīng)的患病率?？肆炙幚韺W(xué)雜志，第48卷，第3期，335-343頁，2008年。(16) Pyle-Eilola，Amy L. ; Carter，Chris M. ; Cucci，Jodi; Chandler，Wayne L: 全血發(fā)光血小板聚集測(cè)定參考區(qū)間的建立。AACC 2017年海報(bào)。

引言 CHRONO-PAR 和 CHRONO-LUME 試劑用于確認(rèn)正常血小板功能和診斷血小板功能障礙。以下 CHRONO-PAR 和 CHRONO-LUME 試劑適用于全血和血小板富血漿: ADP (P/N 384)-在 PRP 中，低濃度(< 1μM) ，形狀變化之后是原發(fā)性聚集和解聚。在較高濃度的1-5μM 時(shí)，通?？梢钥吹诫p相反應(yīng)。第二波聚集需要血栓素 A2的合成，并受環(huán)氧化酶抑制劑如阿匹林的影響。ADP 在全血中的聚集需要更高濃度的 ADP (通常為5-20μM)。

花生四烯酸(P/N 390)-前列腺素合成的直接測(cè)試，因?yàn)榫奂枰ㄟ^環(huán)氧化酶轉(zhuǎn)化為血栓素 a 2，這一過程被阿匹林抑制。從沒有聚集到低于正常范圍的反應(yīng)通常表明藥物攝入在前幾天的某個(gè)時(shí)間。 ATP 標(biāo)準(zhǔn)(P/N 387)-用于定量 ATP 釋放。提供2μmol 凍干的5’三磷酸腺苷。5μL 加入任何大小的測(cè)試樣品提供2nmol 標(biāo)準(zhǔn)。 CHRONO-LUME (P/N 395)-用于定量 ATP 釋放在阿匹林檢測(cè)中的使用和儲(chǔ)存池和分泌障礙的診斷。熒光素-熒光素酶與 ATP 結(jié)合，產(chǎn)生光，這與測(cè)試樣品中血小板釋放的 ATP 量成正比。注意: CHRONO-LUME 反應(yīng)是時(shí)間和溫度依賴性的。在開始測(cè)試之前，確保每個(gè)樣品只有兩分鐘的溫育時(shí)間。膠原蛋白(P/N 385)-測(cè)試樣品加入試劑后出現(xiàn)滯后期，在此期間膠原蛋白聚合成纖維以激活血小板。低濃度的膠原蛋白(1-2μg/mL)被環(huán)氧合酶抑制劑如阿匹林抑制; 正常情況下，較高濃度(5μg/mL)不受影響。腎上腺素(P/N 393)-該激動(dòng)劑未見形狀變化。較高濃度(≥5μM)產(chǎn)生依賴于血栓素 A2合成的第二波聚集的雙相曲線。臨床上不推薦使用腎上腺素作為全血檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)激動(dòng)劑，因?yàn)橹挥胁坏?/span>50% 的激動(dòng)劑對(duì)這種非常弱的激動(dòng)劑有反應(yīng)。腎上腺素全血測(cè)試的推薦抗凝檸檬酸鈉為1.5% ，每毫升檸檬酸鹽含2 U 肝素。

Ristocetin (P/N 396)-用于檢測(cè)血管性血友病(血管性血友病因子的定量或定性缺陷)和巨大血小板綜合征(缺乏血小板膜糖蛋白 GPIb)和具有聚集-解聚模式的格蘭茲曼氏血小板減少癥。Ristocetin 的結(jié)果也可能受到阿匹林的影響。凝酶(P/N 386)-用于1U/mL 時(shí)的最大 ATP 釋放量的定量，不用于聚集。凝酶的分泌與血栓素的合成無關(guān)。凝酶分泌減少可能表明儲(chǔ)存池缺乏或分泌缺陷。注意: CHRONO-PAR 試劑在環(huán)境溫度下運(yùn)輸。到達(dá)后，按照建議存放。

所需但未提供的材料1。聚合度計(jì)2。杯子3。攪拌巴斯4。微量移液管-可調(diào)節(jié)從0.5 μL 到100μL 所需的試劑。5。血液樣本所需的移液管-100μL 至1mL。6。CHRONO-LOG P/N 397生理鹽水或無菌生理鹽水(0.85% 或0.9% w/v)用于 CHRONOPAR 試劑制備和全血標(biāo)本稀釋避免血庫鹽水，因?yàn)樗赡苁遣徽_的摩爾比。細(xì)胞計(jì)數(shù)器稀釋劑不合適，因?yàn)樗鼈兒?/span> EDTA，可以抑制血小板聚集。輸液鹽水是不合適的，因?yàn)樗鼈兒衅S醇或其他抑制血小板功能的防腐劑/添加劑。7。CHRONO-LOG P/N 398純凈水或無菌瓶裝蒸餾水適用于 CHRONO-PAR 試劑的制備。重組試劑應(yīng)無熱原(不含 ATP) ，不含防腐劑，如抑制血小板功能的苯甲醇。不要使用 Millipore 系統(tǒng)中的水。8。用于在適當(dāng)溫度下保持重組工作試劑的冰。9。塑料圓錐管10。KimWipes 11.電極組件[可重復(fù)使用]12。電極組件[一次性]ー參見試劑說明書。

結(jié)果的解釋血液和 PRP 中的聚集和發(fā)光 ATP 分泌曲線可以解釋如下: 通過直接比較一個(gè)正常的無藥物控制，也提供實(shí)時(shí)質(zhì)量控制。與可由任何實(shí)驗(yàn)室核實(shí)和復(fù)制的公布的正常值進(jìn)行比較。膠原蛋白或花生四烯酸釋放的三磷酸腺苷相當(dāng)于或超過凝酶釋放量的50% 。•在對(duì)106名儲(chǔ)存池缺陷(SPD)患者的研究中，23% 對(duì) ADP，腎上腺素和膠原有正常的光學(xué)(PRP)聚集反應(yīng); 44% 有各種聚集異常。作者的結(jié)論是，SPD 是常見的，不均勻的，并不一定與光學(xué)(PRP)聚集異常有關(guān)。7•同時(shí)測(cè)量聚集和 ATP 釋放提供了密集顆粒分泌的明確證據(jù)。5據(jù)報(bào)道，應(yīng)考慮的儲(chǔ)存池缺陷閾值小于0.5 nmoleATP 對(duì)1U 凝酶的反應(yīng)。4局限性•應(yīng)在靜脈穿刺3小時(shí)內(nèi)進(jìn)行測(cè)試。•許多藥物抑制血小板功能。除非檢測(cè)的目的是證明藥物引起的抑制作用，否則患者應(yīng)在檢測(cè)前兩周內(nèi)不服用已知會(huì)影響血小板的藥物。•血小板計(jì)數(shù) < 225,000/μL，運(yùn)行 ADP 測(cè)試 UNDILUTED?？赡苄枰M(jìn)一步的臨床和實(shí)驗(yàn)室評(píng)估來確認(rèn)診斷。質(zhì)量控制良好的實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐是，每當(dāng)試劑組成或解凍時(shí)，運(yùn)行一個(gè)正常的供體，不含已知會(huì)影響血小板的藥物。不能證明在正常對(duì)照中聚集和釋放已知會(huì)影響血小板的藥物的保質(zhì)期之前和按指示儲(chǔ)存和重組的保質(zhì)期試劑，可以免費(fèi)更換。本保修條款僅適用于美國。

 

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