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北京華新康信生物科技有限公司代理cellutron品牌。北京華新康信生物科技有限公司是 cellutron品牌代理商。
ac-7018 cellutron大量現(xiàn)貨,歡迎選購,合作共贏。
產(chǎn)品列表如下:
產(chǎn)品貨號 產(chǎn)品名稱 品牌
ac-7018 Adumyt kit cellutron代理 北京華新康信生物科技有限公司
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Cellutron代理 北京華新康信生物科技有限公司
北京華新康信生物科技有限公司專注于生命科學(xué)領(lǐng)域,由豐富從業(yè)經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)和管理團(tuán)隊(duì)組建而成,主營生物化學(xué)試劑,儀器,實(shí)驗(yàn)耗材等。
1廣泛的產(chǎn)品輻射領(lǐng)域,試劑,耗材,儀器等。
2產(chǎn)品種類齊全,北京華新康信與國外諸多生命科學(xué)領(lǐng)域*合作眾多,代理品牌Glycan Therapeutics,Intact Genomics,Integral Molecular,Medkoo,Niomech,Terragene,Anshlabs wako,EZbioscience,CMCTAG,Anatrance ,F(xiàn)avorage ,Affinity,Advanced biomatrix,bioplastics,天地人和,TRC,凱杰,義翹,sciencell;價(jià)格優(yōu)勢品牌:seracare,Streck,Toxin,Zeptometrix,sigma,F(xiàn)orteBio,CanSyn,polyplus,santa,chormsystems,bethyl ,moltox, permagenlabware ,bioflux,Bio-Rad, coriell, listlabs, ZYMO , ABclonal , EY laboratories ,greatcellsolar , agdia , beckman , Bioxcell,,biomax ,usascientific , TRC ,nist ,americanelements,cayman , Fisher ,thermofisher , nanopore, 日立, 三菱株式會社 ,RD, takara等,緊跟生命科學(xué)的發(fā)展,不斷滿足客戶的需求,為各位的科研之路上添磚加瓦!
3 一手貨源,價(jià)格優(yōu)勢明顯
4信譽(yù)良好,客戶范圍廣,包括清華、北大、交大、復(fù)旦、中山等100多所高校,百泰藥業(yè),康龍化成,藥明康德等企業(yè)。
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Cellutron穩(wěn)定的細(xì)胞系發(fā)展
Cellutron提供定制的高質(zhì)量穩(wěn)定細(xì)胞系服務(wù),以優(yōu)化您感興趣的蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。基因到細(xì)胞服務(wù)包括基因合成,靶向載體的構(gòu)建,細(xì)胞培養(yǎng),轉(zhuǎn)染以及穩(wěn)定細(xì)胞系的藥物選擇和轉(zhuǎn)基因表達(dá)的確認(rèn)。借助的載體技術(shù),Cellutron能夠在多種細(xì)胞類型(包括小鼠和人類干細(xì)胞以及iPS細(xì)胞)中產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系。
穩(wěn)定的細(xì)胞系發(fā)展
Cellutron提供定制的高質(zhì)量穩(wěn)定細(xì)胞系服務(wù),以優(yōu)化您感興趣的蛋白質(zhì)的生產(chǎn)。基因到細(xì)胞服務(wù)包括基因合成,靶向載體的構(gòu)建,細(xì)胞培養(yǎng),轉(zhuǎn)染以及穩(wěn)定細(xì)胞系的藥物選擇和轉(zhuǎn)基因表達(dá)的確認(rèn)。借助的載體技術(shù),Cellutron能夠在多種細(xì)胞類型(包括小鼠和人類干細(xì)胞以及iPS細(xì)胞)中產(chǎn)生穩(wěn)定的細(xì)胞系。
穩(wěn)定細(xì)胞系 穩(wěn)定細(xì)胞系
初轉(zhuǎn)導(dǎo)熒光報(bào)告基因兩個(gè)月后,穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的小鼠胚胎干細(xì)胞表達(dá)GFP或RFP。
親代細(xì)胞系:人和小鼠胚胎干細(xì)胞和iPS,HEK293,CHO,BHK,NS0細(xì)胞,H9C2或您的細(xì)胞系。
穩(wěn)定細(xì)胞系生成的過程和時(shí)間表:
1.哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體的基因合成與構(gòu)建
執(zhí)行優(yōu)化的基因合成并將基因克隆到哺乳動物細(xì)胞表達(dá)載體中(1周)
2.轉(zhuǎn)基因表達(dá)分析
用表達(dá)載體轉(zhuǎn)染親代細(xì)胞系,并通過RT-PCR / Western blot / ELISA評估轉(zhuǎn)基因的表達(dá)(1周)
3.穩(wěn)定轉(zhuǎn)染子的篩選
對頂ji克隆進(jìn)行穩(wěn)定性篩選,并評估10個(gè)傳代的終細(xì)胞系。(約4周)
向客戶交付2瓶頂ji穩(wěn)定克隆
心肌細(xì)胞分離
快速,改進(jìn)的系統(tǒng),產(chǎn)量高
原代細(xì)胞分離系統(tǒng),科學(xué)家*的工具
轉(zhuǎn)基因和miRNA表達(dá)的微圓載體
訂單信息
一般信息
安全有效的載體系統(tǒng)的開發(fā)是在真核細(xì)胞中成功進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟。
小環(huán)載體是新穎的超螺旋小表達(dá)盒,其通過在大腸桿菌中體內(nèi)的位點(diǎn)特異性重組衍生自常規(guī)質(zhì)粒DNA 。小圓載體不攜帶抗生素抗性基因,也不攜帶細(xì)菌復(fù)制起點(diǎn),因此顯著降低了免疫和炎癥反應(yīng),并有效地保護(hù)了轉(zhuǎn)基因表達(dá)不會由于細(xì)菌主鏈序列而被沉默。
在大腸桿菌中,通過定點(diǎn)重組從體內(nèi)的親本質(zhì)粒產(chǎn)生了微環(huán)載體。親本質(zhì)粒攜帶有位于位點(diǎn)特異性Cre重組酶的兩個(gè)突變loxP位點(diǎn)(即,每側(cè)的末端5個(gè)核苷酸的突變)側(cè)翼的真核表達(dá)盒,并在大腸桿菌的控制下轉(zhuǎn)化入表達(dá)Cre重組酶的工程化大腸桿菌菌株。 pBAD / araC啟動子。
L-阿拉伯糖可有效誘導(dǎo)細(xì)菌菌株中Cre重組酶的表達(dá),從而切除中間的DNA序列。兩個(gè)loxP位點(diǎn)之間的重組促進(jìn)了親本質(zhì)粒分裂成兩個(gè)超螺旋DNA:(1)帶有用于轉(zhuǎn)基因和miRNA的真核表達(dá)盒和雙突變loxP位點(diǎn)的微圓載體,以及(2)包含細(xì)菌主鏈序列和野生型loxP位點(diǎn)。雙突變loxP位點(diǎn)的形成損害了Cre重組酶對序列的識別,導(dǎo)致平衡向小圓載體生產(chǎn)的轉(zhuǎn)移。在誘導(dǎo)Cre重組酶之后,從細(xì)菌裂解物中分離出不同形式的超螺旋DNA,并進(jìn)行限制酶消化以線性化親本質(zhì)粒和微質(zhì)粒。隨后,使用氯化銫梯度進(jìn)一步純化微圓載體。
基于miRNA的基因敲低
基于Cellutron miRNA的基因敲除(KD)具有以下優(yōu)點(diǎn):
1.具有高度序列特異性,與靶基因具有100%的同源性
2.比其他基因敲除方法(例如siRNA)更有效
3.允許將兩個(gè)或多個(gè)miRNA結(jié)構(gòu)克隆到同一表達(dá)盒中,以進(jìn)行單個(gè)或多個(gè)靶標(biāo)敲除。
4.具有強(qiáng)大的Pol II啟動子,可在多種細(xì)胞類型中高效表達(dá)miRNA。5
5.產(chǎn)生穩(wěn)定的基因敲除細(xì)胞系
6. GFP或RFP報(bào)告基因的表達(dá),用于監(jiān)測轉(zhuǎn)染效率
7.細(xì)胞毒性很小或沒有
誘導(dǎo)表達(dá)載體系統(tǒng)
Cellutron用Cre-Loxp技術(shù)開發(fā)了一種新型的誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng),并提供了調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)基因表達(dá)的能力。該系統(tǒng)包含兩個(gè)具有強(qiáng)大CAG啟動子的表達(dá)載體,用于高效基因表達(dá)。pEGFP / RFP-miRNA-BL和pEGFP / RFP-T2A-GOI-BL是表達(dá)載體,其EGFP和3X終止序列旁接兩個(gè)loxP位點(diǎn),其后是順順反子序列,用于表達(dá)RFP和miRNA或編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因。另外,在miRNA和編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因的表達(dá)盒的下游克隆了殺稻瘟菌素(BL)表達(dá)盒(用于在哺乳動物細(xì)胞中選擇藥物)。與可誘導(dǎo)表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染需要pCreER-IRES-Puro。
共轉(zhuǎn)染后,系統(tǒng)初僅表達(dá)EGFP,即一種報(bào)告蛋白,可方便地監(jiān)測轉(zhuǎn)染效率??梢栽隗w外和體內(nèi)添加4-OHT,以激活Cre重組酶的條件活性形式,從而導(dǎo)致miRNA或編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因的高水平和調(diào)控表達(dá)。
誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)使您能夠:
1.在分裂和非分裂細(xì)胞(包括成體和胚胎干細(xì)胞以及iPS細(xì)胞)中高效轉(zhuǎn)染。
2.在體內(nèi)和體外條件表達(dá)miRNA或編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因。
3.生成穩(wěn)定的細(xì)胞系,以長期表達(dá)miRNA或編碼蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)基因。
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