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北京創(chuàng)世云博科技發(fā)展有限公司
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Biorad售后服務(wù) 北京 伯樂(lè)酶標(biāo)儀維修

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品       牌Bio-Rad/伯樂(lè)

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所  在  地北京市

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波長(zhǎng)范圍 詳見(jiàn)說(shuō)明nm 波長(zhǎng)檢測(cè)速度 詳見(jiàn)說(shuō)明秒
產(chǎn)地類(lèi)別 進(jìn)口 價(jià)格區(qū)間 3萬(wàn)-5萬(wàn)
檢測(cè)器 詳見(jiàn)說(shuō)明 精確度值 詳見(jiàn)說(shuō)明
實(shí)驗(yàn)方法 詳見(jiàn)說(shuō)明 吸光度線性 詳見(jiàn)說(shuō)明Abs
吸光值范圍 詳見(jiàn)說(shuō)明Abs 儀器功能 多功能
儀器種類(lèi) 單通道酶標(biāo)儀 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),石油
制作曲線類(lèi)型 詳見(jiàn)說(shuō)明 自動(dòng)程度 全自動(dòng)酶標(biāo)儀
Biorad售后服務(wù) 北京 伯樂(lè)酶標(biāo)儀維修。伯樂(lè)biorad酶標(biāo)儀相關(guān)知識(shí)介紹,產(chǎn)品概述等。

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BioRad酶標(biāo)儀熒光分析技術(shù)是一種強(qiáng)大的分析手段,廣泛地應(yīng)用在臨床檢驗(yàn)、生物學(xué)研究、農(nóng)業(yè)科學(xué)、食品和環(huán)境科學(xué)中,是多功能酶標(biāo)儀的重要應(yīng)用,如TECAN(M1000、M200等),Thmeral(Varioskan Flash),Bio-tek(Synergy 4等),MD(M2、M5)都可以應(yīng)用于熒光檢測(cè)。

BioRad酶標(biāo)儀概述;
室溫下,大多數(shù)分子處于基態(tài)的低振動(dòng)能級(jí),處于基態(tài)的分子吸收能量(光能、化學(xué)能、電能或熱能)后躍遷至激發(fā)態(tài),激發(fā)態(tài)不穩(wěn)定,將很快衰變到基態(tài),以光的形式放出能量,這種現(xiàn)象稱(chēng)為“發(fā)光現(xiàn)象”。分子發(fā)光包括熒光,磷光,化學(xué)發(fā)光,生物發(fā)光等。受到光照時(shí)發(fā)光,光照切斷時(shí)發(fā)光立即消失的叫熒光,光照切斷時(shí),發(fā)光逐漸變?nèi)跻灾孪У慕辛坠?,吸收化學(xué)反應(yīng)的化學(xué)能量而發(fā)光叫化學(xué)發(fā)光,由生物能轉(zhuǎn)變?yōu)楣廨椛涞姆Q(chēng)作生物發(fā)光。
由于發(fā)光物質(zhì)不同熒光有分子熒光和原子熒光之分,分子熒光為帶光譜,原子熒光為線光譜,通常所說(shuō)的熒光為分子熒光。通過(guò)測(cè)定所發(fā)射熒光的特性和強(qiáng)度,可以對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性、定量分析。

BioRad酶標(biāo)儀熒光檢測(cè)技術(shù);
1熒光強(qiáng)度
熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)的濃度成正比,這是熒光分析法是量分析的依據(jù)。在生物學(xué)上的應(yīng)用非常廣泛,可以進(jìn)行生物大分子定量,酶活性分析,熒光免疫分析,細(xì)胞學(xué)分析(細(xì)胞增殖,細(xì)胞毒理,細(xì)胞吸附等)和分子間相互作用。

1.1細(xì)胞凋亡檢測(cè)
Caspase家族在介導(dǎo)細(xì)胞凋亡的過(guò)程中起著非常重要的作用,其中Caspase-3為關(guān)鍵的執(zhí)行分子,它在凋亡信號(hào)傳導(dǎo)的許多途徑中發(fā)揮功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞漿中,在凋亡的早期階段,它被激活,活化的Caspase-3由兩個(gè)大亞基(17KD)和兩個(gè)小 亞基(12KD)組成,裂解相應(yīng)的胞漿胞核底物,終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡。但在細(xì)胞凋亡的晚期和死亡細(xì)胞,caspase-3的活性明顯下降。
設(shè)計(jì)出熒光物質(zhì)偶聯(lián)的短肽Z-DEVD-AMC。在共價(jià)偶聯(lián)時(shí),AMC不能被激發(fā)熒光,短肽被水解后釋放出AMC,自由的AMC才能被激發(fā)發(fā)射熒光。根據(jù)釋放的AMC熒光強(qiáng)度的大小,可以測(cè)定 caspase-3的活性,從而反映Caspase-3被活化的程度。

1.2細(xì)胞毒性的檢測(cè)
體外細(xì)胞毒性研究對(duì)于檢測(cè)新的生物來(lái)源或人工合成的細(xì)胞毒素以及例行的臨床相關(guān)的檢測(cè)都有著重要的意義。細(xì)胞膜非滲透性的核染料 Propidium iodide能穿透損傷的細(xì)胞膜,熒光密度越高反映出其受損細(xì)胞越多。

1.3鈣流檢測(cè)
Fura-2、indo-1、Quin-2是Ca2+熒光指示劑,可以靈敏地反映細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的變化,當(dāng)結(jié)合鈣離子時(shí),激發(fā)波長(zhǎng)會(huì)發(fā)生改變,發(fā)射熒光的強(qiáng)度和結(jié)合的Ca2+濃度有著定量的關(guān)系。

2.熒光偏振(FP)
1926年P(guān)errin首先描述了熒光偏振理論,溶液中的熒光分子在受到偏振光照射時(shí),可吸收并釋放出相應(yīng)的偏振熒光,如果在激發(fā)時(shí)熒光物質(zhì)處于靜止?fàn)顟B(tài),發(fā)射光將保持原有激發(fā)光的偏振性,如果其處于運(yùn)動(dòng)狀態(tài),發(fā)射光電偏振偏振平面將不同于原有激發(fā)光的偏振特性,這就是熒光偏振現(xiàn)象,熒光分子與其它因子的相互作用,例如相互結(jié)合或排斥;其所處環(huán)境的性質(zhì),例如溶液的粘度、溫度等,這些因素都有可能對(duì)這個(gè)熒光因子受激發(fā)后發(fā)出的發(fā)射光的發(fā)射平面產(chǎn)生影響。因此以熒光偏振為基礎(chǔ)發(fā)展的技術(shù)可用來(lái)研究生命科學(xué)中分子之間的相互作用,如受體配體結(jié)合分析,DNA-蛋白質(zhì)結(jié)合分析,SNP分析,酶活性分析。

熒光偏振分析所需的樣品量少,靈敏度高,可達(dá)亞納摩爾級(jí)范圍,重復(fù)性好,操作簡(jiǎn)便,也更為安全可靠,不會(huì)在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中生成有害的放射性**,此外熒光偏振是真正均相的,允許實(shí)時(shí)檢測(cè)(動(dòng)力學(xué)檢測(cè)),對(duì)于濃度變化不敏感,是均相檢測(cè)形式(中間不含洗滌步驟)的解決方案。

 

酶標(biāo)儀實(shí)際上就是一臺(tái)變相光電比色計(jì)或分光光度計(jì),其基本工作原理與主要結(jié)構(gòu)和光電比色計(jì)基本相同. 圖示是一種單通道自動(dòng)進(jìn)樣的酶標(biāo)儀工作原理圖.光源燈發(fā)出的光波經(jīng)過(guò)濾光片或單色器變成一束單色光,進(jìn)入塑料微孔極中的待測(cè)標(biāo)本.該單色光一部分被標(biāo)本吸收,另一部分則透過(guò)標(biāo)本照射到光電檢測(cè)器上,光電檢測(cè)器將這一待測(cè)標(biāo)本不同而強(qiáng)弱不同的光信號(hào)轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電信號(hào).電信號(hào)經(jīng)前置放大,對(duì)數(shù)放大,模數(shù)轉(zhuǎn)換等信號(hào)處理后送入微處理器進(jìn)行數(shù)據(jù)處理和計(jì)算,后由顯示器和打印機(jī)顯示結(jié)果. 微處理機(jī)還通過(guò)控制電路控制機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)X方向和Y方向的運(yùn)動(dòng)來(lái)移動(dòng)微孔板,從而實(shí)現(xiàn)自動(dòng)進(jìn)樣檢測(cè)過(guò)程.而另一些酶標(biāo)儀則是采用手工移動(dòng)微孔板進(jìn)行檢測(cè),因此省去了X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu)和控制電路,從而使儀器更小巧,結(jié)構(gòu)也更簡(jiǎn)單.

Bio-Rad酶標(biāo)儀:即酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀(ELISA Reader)是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的儀器??珊?jiǎn)單地分為半自動(dòng)和全自動(dòng)2大類(lèi),但其工作原理基本上都是一致的,其核心都是一個(gè)比色計(jì),即用比色法來(lái)分析抗原或抗體的含量。ELISA測(cè)定一般要求測(cè)試液的終體積在250ul以下,用一般光電比色計(jì)無(wú)法完成測(cè)試,因此對(duì)酶標(biāo)儀中的光電比色計(jì)有特殊要求。

Bio-Rad酶標(biāo)法的基本原理是將抗原或抗體與酶用膠聯(lián)劑結(jié)合為酶標(biāo)抗原或抗體,此酶標(biāo)抗原或抗體可與固相載體上或組織內(nèi)相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生特異反應(yīng),并牢固地結(jié)合形成仍保持活性的免疫復(fù)合物。當(dāng)加入相應(yīng)底物時(shí),底物被酶催化而呈現(xiàn)出相應(yīng)反應(yīng)顏色。顏色深淺與相應(yīng)抗原或抗體含量成正比。由于此技術(shù)是建立在抗原-抗體反應(yīng)和酶的高效催化作用的基礎(chǔ)上,因此,具有高度的靈敏性和特異性,是一種極富生命力的免疫學(xué)試驗(yàn)技術(shù)。

Bio-Rad酶標(biāo)儀所用的單色光既可通過(guò)相干濾光片來(lái)獲得,也可用分光光度計(jì)相同的單色器來(lái)得到。在使用濾光片作濾波裝置時(shí)與普通比色計(jì)一樣,濾光片即可放在微孔板的前面,也可放在微孔板的后面,其效果是相同的。光源燈發(fā)出的光經(jīng)聚光鏡,光欄后到達(dá)反射鏡,經(jīng)反射鏡作90o反射后垂直通過(guò)比色溶液,然后再經(jīng)濾光片送到光電管。

Bio-Rad酶標(biāo)儀和普通的光電比色計(jì)有以下幾點(diǎn)差異:
(l)盛裝待測(cè)比色液的容器不再使用比色皿,而是使用塑料微孔板。微孔板常用透明的聚乙烯材料制成,對(duì)抗原抗體有較強(qiáng)的吸附作用,故用它作為固相載體。
(2)由于盛樣本的塑料微孔板是多排多孔的,光線只能垂直穿過(guò),因此酶標(biāo)儀的光來(lái)都是垂直通過(guò)待測(cè)溶液和微孔板的,光束既可是從上到下,也可以是從下到上穿過(guò)比色液。
(3)酶標(biāo)儀通常不僅用A,有時(shí)也使用光密度OD來(lái)表示吸光度。

Bio-Rad酶標(biāo)儀可分為單通道和多通道2種類(lèi)型,單通道又有自動(dòng)和手動(dòng)2種之分。自動(dòng)型的儀器有X,Y方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)機(jī)構(gòu),可將微孔板L的小孔一個(gè)個(gè)依次送入光束下面測(cè)試,手動(dòng)型則靠手工移動(dòng)微孔板來(lái)進(jìn)行測(cè)量。在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上又發(fā)展了多通道酶標(biāo)僅,此類(lèi)酶標(biāo)僅一般都是自動(dòng)化型的。它設(shè)有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測(cè)器,如12個(gè)通道的儀器設(shè)有12條光束或12個(gè)光,12個(gè)檢測(cè)器和12個(gè)放大器,在X方向的機(jī)械驅(qū)動(dòng)裝置的作用下,樣品12個(gè)為一排被檢測(cè)。多通道酶標(biāo)儀的檢測(cè)速度快,但其結(jié)構(gòu)較復(fù)雜價(jià)格也較高。

 

Biorad售后服務(wù) 北京 伯樂(lè)酶標(biāo)儀維修。
 

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