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北京伯樂Bio-Radpcr儀售后維修400客戶報修;*.
Bio-Rad伯樂PCR儀檢出率低或無
1)PCR循環(huán)次數(shù)不足:將Bio-Rad伯樂PCR儀循環(huán)次數(shù)增加5個。
2)Bio-Rad伯樂PCR儀模板已降級:使用電泳檢查DNA質(zhì)量。
3)模板被PC抑制劑污染:1.檢查260和280nm處的DNA吸光度比。純DNA的260/280比例應(yīng)為≥1.8。2.在反應(yīng)中使用較少體積的模板。3.使用DNA純化試劑盒或乙醇沉淀去除 污染物。
4)熱循環(huán)儀程序退火和延伸溫度不是的:1.遵循PCR設(shè)計的一般規(guī)則:退火溫度=引物Tm – 5°C,延伸溫度=72°C。2.逐步將退火溫度降低6至10°C 。
5)反應(yīng)缺少Taq聚合酶或其他反應(yīng)組分:確保將每種組分添加到PCR反應(yīng)中。
6)Bio-Rad伯樂PCR儀引物濃度過低:檢查引物濃度;如有必要,增加注意力。
7)靶標序列不在DNA模板中:1.從源頭重新提取脫氫酶。2.測試模板的另一個區(qū)域。
8)Bio-Rad伯樂PCR儀模板不足:增加DNA模板的濃度。
9)Bio-Rad伯樂PCR儀反應(yīng)組分濃度不理想:檢查推薦的引物濃度(通常從 0.05-1毫摩爾)和毫克++濃度(通常為0.2-1毫摩爾)。
10)反應(yīng)混合物組分受損:1.檢查組件的到期日期。2.等分試反應(yīng)混合物的生物成分,避免多次凍融循環(huán)。
11)引物設(shè)計不理想(導致非特異性退火或引物二聚體形成):1.遵循底漆設(shè)計的一般規(guī)則:長度為18-30 核苷酸,GC含量在40-60%之間,引物Tm在5°C以內(nèi)彼此。2.避免拉伸4個或更多相同的核苷酸或 二核苷酸重復。3.避免引物中的自互補序列。
來自Bio-Rad伯樂PCR儀反應(yīng)的多種/非特異性產(chǎn)物
1)引物設(shè)計不理想(導致非特異性退火或引物二聚體形成):1.遵循底漆設(shè)計的一般規(guī)則:長度為18-30 核苷酸,GC含量在40-60%之間,引物Tm在5°C以內(nèi)彼此。2.避免拉伸 4 個或更多相同的核苷酸或 二核苷酸重復。3.避免引物中的自互補序列。
2)Bio-Rad伯樂PCR儀模板或反應(yīng)混合物組分被污染:1.重新提取模板。2.嘗試新的反應(yīng)混合物。3.在反應(yīng)設(shè)置期間使用過濾器移液器吸頭并戴上手套。
3)Bio-Rad伯樂PCR儀退火溫度過低:逐步提高退火溫度。
4)Bio-Rad伯樂PCR儀引物濃度過高:少用底漆。
5)模板濃度不理想:1.對于質(zhì)粒,使用1 pg-10 ng的DNA / 50μl反應(yīng)。2.對于基因組DNA,使用1納克-1微克的DNA/ 50微升反應(yīng)。
Bio-Rad北京售后,伯樂pcr儀售后維修。
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