詳細(xì)介紹
一、人甲狀腺激素受體β(THRb)ELISA試劑盒
1.1 用途
該試劑盒采用“一步"夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織、細(xì)胞或其他相關(guān)生物液體中THRb濃度。
1.2 原理
將目標(biāo)抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或標(biāo)本,其中的目標(biāo)連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的抗體,將未結(jié)合的抗體洗凈后再次*洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(O.D.值),計(jì)算樣品濃度。
二、人甲狀腺激素受體β(THRb)ELISA試劑盒組成
2.1 產(chǎn)品保存
▲未開(kāi)封試劑盒,4℃保存;已開(kāi)封,標(biāo)準(zhǔn)品-20℃保存,酶標(biāo)板加干燥劑后密封-20℃保存,其他4℃保存。
2.2 產(chǎn)品組成表
三、常見(jiàn)問(wèn)題
3.1 影響ELISA試劑盒曲線(xiàn)的因素
標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。我公司技術(shù)人員在處理售后的問(wèn)題中,有不少科研朋友咨詢(xún)曲線(xiàn)的問(wèn)題。
下面小編將影響ELISA試劑盒曲線(xiàn)問(wèn)題的原因做了總結(jié):
一 OD值不正常的可能原因是:
1、試劑盒未回溫,試劑盒回溫到25℃;
2、溫度控制不好,控制正確溫度;
3、孵育時(shí)間不準(zhǔn)確,控制孵育時(shí)間;
4、洗滌時(shí)沖擊力太大、浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、洗滌次數(shù)增 加,洗滌4-5次,每孔250ul,然后拍干;
5、陽(yáng)光直射,對(duì)著風(fēng)直接吹,避風(fēng)避光;
6、酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)錯(cuò)誤,酶標(biāo)儀的波長(zhǎng)450nm;
7、抗體的稀釋錯(cuò)誤,正確的稀釋抗體;
8、水質(zhì)問(wèn)題,用娃哈哈礦泉水代替。
二 白板的可能原因是:
1、洗滌液配制錯(cuò)誤,正確的配制洗滌液;
2、少加液體(錯(cuò)加液體),正確的步驟加液體。
三 無(wú)梯度可能原因是:
1、標(biāo)準(zhǔn)品也污染,換標(biāo)準(zhǔn)品點(diǎn)板;
2、OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次;
3、人為點(diǎn)板,不要點(diǎn)板。
四 線(xiàn)性不好可能原因是:
OD值不正常,控制溫度時(shí)間在做一次。
?四、溫馨提示
試劑盒使用完畢后,請(qǐng)妥善處理相關(guān)耗材,避免環(huán)境污染!