細(xì)胞平板克隆形成實(shí)驗(yàn)步驟

1、細(xì)胞懸液制備:取對(duì)數(shù)生*的單層培養(yǎng)細(xì)胞，用0. 25%蛋白酶消化并吹打成單個(gè)細(xì)胞，離后用*培養(yǎng)基重懸,制成細(xì)胞懸液。

2、細(xì)胞種板:將細(xì)胞懸液作梯度倍數(shù)稀釋，以每皿50、100、 200、 500、1000、 2000個(gè)細(xì)胞的梯度密度分別接種含1 ml 37 C預(yù)熱培養(yǎng)液的皿中，并輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)，使細(xì)胞分散均勻。置37 C 5% Co2的環(huán)境下，靜置培養(yǎng)。

3、細(xì)胞觀察:顯微鏡下觀察到單個(gè)細(xì)胞長(zhǎng)到20個(gè)以上細(xì)胞克隆，培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見的克隆時(shí)，終止培養(yǎng)。棄去.上清液，用PBS小心浸洗2次。加純甲醇1ml,固定15分鐘。然后去固定液,加適量Giemsa應(yīng)用染色液染10分鐘，然后用流水緩慢洗去染色液，空氣干燥，手記拍照采集圖像。

4、克隆計(jì)數(shù):用肉眼直接計(jì)數(shù)克隆數(shù)，后計(jì)算克隆形成率。

細(xì)胞平板克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析

伊萊博生物科技（上海）有限公司，公司總部位于上海長(zhǎng)江軟件園。2022年1月與上海交通大學(xué)藥學(xué)院成立聯(lián)合研究中心，主要以生命科學(xué)研究為基礎(chǔ)，專注于研究成果轉(zhuǎn)化及技術(shù)服務(wù)創(chuàng)新，建立了包含腫瘤生物學(xué)、病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)以及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等學(xué)科的研究服務(wù)體系，為醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展做出了重要貢獻(xiàn)。

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