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賽默飛 75003489 PCR 8×8 轉(zhuǎn)頭 帶螺旋蓋
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聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA為模板,在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下,將該段DNA擴(kuò)增至足夠數(shù)量,以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析
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聚合酶鏈反應(yīng)(polymerase chain reaction,PCR)是利用一段DNA為模板,在DNA聚合酶核苷酸底物共同參與下,將該段DNA擴(kuò)增至足夠數(shù)量,以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析。PCR檢測(cè)方法在臨床上快速診斷細(xì)菌性傳染病等方面具有極為重要的意義。

PCR原理用于擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA片段,類似于天然DNA的復(fù)制過(guò)程。以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板,以一對(duì)分別與模板5’末端和3’末端互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物,在DNA聚合酶的作用下,按照半保留復(fù)制的機(jī)制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成,重復(fù)這一過(guò)程,即可使目的DNA片段得到擴(kuò)增。

1、PCR是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室常用的技術(shù)手段之一。

2、一般用于病原的檢測(cè),分子機(jī)制中各基因的檢測(cè)以及遺傳相關(guān)的檢測(cè)。

3、感染性疾病PCR在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)中最有價(jià)值的應(yīng)用領(lǐng)域就是對(duì)感染性疾病的診斷。

4、理論上,只要樣本有一個(gè)病原體存在,PCR就可以檢測(cè)到。

5、一般實(shí)驗(yàn)室也能檢出10~100基因拷貝,而目前病原體抗原檢測(cè)方法一般需要105-7個(gè)病原體才可檢測(cè)到。

6、PCR對(duì)病原體的檢測(cè)解決了免疫學(xué)檢測(cè)的“窗口期"問(wèn)題,可判斷疾病是否處于隱性或亞臨床狀態(tài)。

7、定量PCR研究資料已表明,病原體數(shù)量與感染性疾病病情的輕重程度、傳染性及治療效果均有相關(guān)性。

8、許多研究表明,人類免疫缺陷病毒(HIV)感染后,潛伏期長(zhǎng)短和臨床癥狀輕重與血液中的病毒量顯著相關(guān);也有研究表明,HIV病毒載量低于一定值時(shí),沒(méi)有傳染性。

9、在乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒定量研究中發(fā)現(xiàn),病毒的數(shù)量與某些藥物的療效相關(guān)。

10、例如,干擾素治療對(duì)肝炎病毒高拷貝者不敏感,低拷貝者敏感;而有些藥物則具有顯著降低病毒高拷貝的作用。

11、腫瘤癌基因的表達(dá)增加和突變,在許多腫瘤早期和良性的階段就可出現(xiàn)。

12、PCR技術(shù)不但能有效的檢測(cè)基因的突變,而且能準(zhǔn)確檢測(cè)癌基因的表達(dá)量,可據(jù)此進(jìn)行腫瘤早期診斷、分型、分期和預(yù)后判斷。

13、幾乎所有慢性骨髓性白血病患者都可檢測(cè)到原癌基因易位導(dǎo)致的BCR/ABL融合基因形成,定量PCR技術(shù)可通過(guò)檢測(cè)BCR/ABL融合基因的表達(dá)確定微量殘余惡性細(xì)胞存在的數(shù)量,以此作為治療效果和估計(jì)復(fù)發(fā)的危險(xiǎn)性的依據(jù)。

14、一些病毒致癌作用也與病毒載量有關(guān),EB病毒載量的FQ-PCR檢測(cè)結(jié)果已被用于鼻咽癌早期發(fā)現(xiàn)和隨訪。

15、遺傳病PCR技術(shù)首ci臨床應(yīng)用就是從檢測(cè)鐮狀細(xì)胞和β-地中海貧血的基因突變開(kāi)始的。

16、基因的突變和缺失均會(huì)引起各種珠蛋白的表達(dá)不平衡,用FQ-PCR檢測(cè)各種珠蛋白基因表達(dá)差異,是地中海貧血診斷的有效手段。


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