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紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白
英文名稱:Human DiI-Low Density Lipoprotein(Human DiI-LDL)
低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,簡(jiǎn)稱為L(zhǎng)DL)是通過(guò)脂蛋白酯酶的水解作用,脫去低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三脂,釋放游離脂肪酸轉(zhuǎn)化而來(lái)的。因甘油三酯的去除使得膽固醇所占比例提高,增加顆粒本身密度,從而得到LDL。LDL與脊椎細(xì)胞表面的受體特異性結(jié)合,然后通過(guò)受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用將膽固醇運(yùn)輸?shù)饺砀魈幖?xì)胞。因此,LDL可以用來(lái)研究受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用過(guò)程,尤其是在動(dòng)脈粥樣硬化等疾病中,血漿來(lái)源的LDL還可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。
紅色熒光標(biāo)記人源低密度脂蛋白(Human DiI-LDL)是標(biāo)記熒光探針Dil(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的LDL,可以用來(lái)觀察培養(yǎng)細(xì)胞的LDL結(jié)合位點(diǎn),或篩選LDL受體表達(dá)缺陷型細(xì)胞突變株。也可以通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)評(píng)估細(xì)胞受體水平,或檢測(cè)組織內(nèi)的受體水平。 DiI-LDL是研究細(xì)胞內(nèi)吞作用非常好的標(biāo)記物。
制備方法:純化的人健康血漿來(lái)源的LDL直接標(biāo)記上DiI熒光探針,然后通過(guò)超速離心以及透析的方法純化回收標(biāo)記產(chǎn)物,并濾膜過(guò)濾除菌。純化的DiI-LDL溶于含0.02 mM EDTA的PBS,pH 7.4中。
運(yùn)輸與保存方法:冰袋運(yùn)輸;4oC無(wú)菌避光,收到貨后可穩(wěn)定保存6周。
注意事項(xiàng):
1)本品的稀釋工作液不穩(wěn)定,建議即配即用;
2)長(zhǎng)期貯存可能會(huì)有沉淀析出,屬于正?,F(xiàn)象,低速離心2 min去除沉淀即可使用;
3)LDL與LDL受體的結(jié)合需要Ca2+和Mn2+的參與,過(guò)量EDTA的存在會(huì)抑制其結(jié)合;
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以上資料來(lái)自小編MSQ,2023.10.7
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