產(chǎn)品名稱:通用基因組DNA 小量提取試劑盒
產(chǎn)品貨號:TD468-50 (50 次反應(yīng))
TD468-200 (200 次反應(yīng))
注意事項(xiàng):
1. 售出后一年內(nèi)產(chǎn)品質(zhì)量可以保證。試劑已經(jīng)過大量的常規(guī)檢測來保證其可操作性。此產(chǎn)品僅供研究并且需要由專業(yè)人員來使用。
2. 試劑盒中的部分試劑是有刺激性的。請帶好手套和防護(hù)眼鏡。
3. 環(huán)境溫度低時基因組樣本消化液或者基因組DNA洗滌液1可能出現(xiàn)析出和沉淀,可以在37℃水浴幾分鐘幫助重新溶解使用。
產(chǎn)品特性:
樣品種類: 全血,有核血,血kuaI黃層,唾液,痰,精子,乳汁等樣品,保存在保護(hù)劑里的樣品等。獲得的基因組 DNA 產(chǎn)量高、純度好, 可以直接用 PCR 等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。不推薦使用此試劑盒提取小 DNA 或者游離 DNA(可使用 TD476 產(chǎn)品) ?
基因組 DNA 大小: 一般可回收到大于 50 kb 的基因組 DNA。如果樣品中存在線粒體DNA,病毒DNA等也會一起提取到。?
DNA 純度: 獲得的基因組 DNA 產(chǎn)量高、純度好, 可以直接用 PCR 等各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)。一般情況 Abs260/280 ≥ 1.8 Abs260/230 ≥ 2.0。?
基因組 DNA 產(chǎn)量: 針對哺乳動物一般 100µl 全血中回收到 3µg 以上的基因組DNA。?
需要的儀器設(shè)備: 水浴鍋或者金屬浴(55℃)。微型離心機(jī),渦旋儀。
溶液制備:
在操作之前,需添加1060µl蛋白酶K保存液到每管蛋白酶K(20mg)中。蛋白酶K溶液的濃度為20mg/ml,混勻后,需要放到-20℃長期保存。
提取步驟:
使用基因組DNA洗脫液或其他等滲溶液(如PBS)來重懸培養(yǎng)的細(xì)胞沉淀。
(≤1x106細(xì)胞使用100μI基因組DNA洗脫液,106-5x106細(xì)胞數(shù)使用200μI基因組DNA洗脫液)
55℃下的蛋白酶K過液消化不會影響DNA的完整性。
4. 將上清轉(zhuǎn)移至 2L 柱中,2L 柱套在一個收集管里,在≥12,000 x g 離心力下離心1 分鐘。丟棄盛有濾出液的收集管。
5. 將 2L 柱套在一個新的收集管里,添加 400μl 的基因組 DNA 洗滌液 1 到 2L 柱中,在≥12,000 x g離心力下離心1分鐘。倒掉收集管中的廢液。
6. 添加 700μl 的基因組 DNA 洗滌液 2 到 2L 柱中,在≥12,000 x g 離心力下離心1 分鐘。倒掉收集管中的廢液。7. 添加 200μl 的基因組 DNA 洗滌液 2 到 2L 柱中,在≥12,000 x g 離心力下離心1 分鐘。丟棄盛有濾出液的收集管。
8. 將 2L 柱移至干凈的 1.5ml 離心管中直接添加≥ 50μl 的基因組 DNA 洗脫液到柱基質(zhì)上(洗脫液事先在65-70℃水浴中預(yù)熱效果更好,如果是 25mg 的組織可以添加 200μl),室溫下放置 2-5 分鐘,全速離心1分鐘來洗脫基因組 DNA。
歡迎訂購:
貨號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
TD468- 50 | 通用基因組DNA 小量提取試劑盒 | 50次 |
TD468- 200 | 200次 |
天津益元利康生物科技有限公司現(xiàn)貨供應(yīng)簡石生物通用基因組DNA 小量提取試劑盒(TD468),歡迎選購!
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