檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被血管生成素樣蛋白4（ANGPTL4）抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的血管生成素樣蛋白4（ANGPTL4）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

人血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)ELISA試劑盒的簡單介紹：

【產(chǎn)品用途】：科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究，不得用于臨床診斷。

【產(chǎn)品應(yīng)用】：被測樣品定量分析。

【樣本類型】：標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標(biāo)本量手機體積=100ul x檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T試劑盒（12孔*8條）可檢測90個樣本；48T試劑盒（12孔*4條）可檢測42個樣本。

【保存條件】：試劑盒保存于2-8℃，有效期為6個月。

人血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)ELISA試劑盒性能：

準(zhǔn)確性：標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值，大于等于0.9900。

靈敏度：zui低檢測濃度小于1.0 mg/L

特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。

重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

洗板方法：手工洗板方法：甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

操作注意事項：

1） 充分混勻?qū)ΡＷC反應(yīng)結(jié)果很重要，在加液后請輕輕晃動整個96板孔，以保證混勻。

2） TMB溶液請勿接觸氧化劑或金屬，否則容易失效。

3） 加樣時請注意每個樣品或標(biāo)準(zhǔn)品必須更換槍頭，一方面避免交叉污染，另一方面也避免吸取體積的誤差。加樣過程中必須避免氣泡的產(chǎn)生。

4） 檢測標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時建議設(shè)置重復(fù)孔，以確保檢測結(jié)果的可信度。

5） 洗滌過程非常重要，洗滌不充分會下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。

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