小鼠二羥環(huán)氧苯并芘(BPDE)ELISA檢測試劑盒性能：

【實驗方法】：雙抗體一步夾心法

【檢測范圍】：請咨詢我司銷售人員領取新說明書

【靈敏度】：zui低檢測濃度小于10 ng/mL

【特異性】：不與其它可溶性結構類似物交叉反應

【重復性】：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%

洗板方法

1.  手工洗板：甩盡孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。

2.  自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。

檢測原理：試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被二羥環(huán)氧苯并芘(BPDE)抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的二羥環(huán)氧苯并芘(BPDE)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

常見樣本處理及要求：

【血清】：將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

【血漿】：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本，并將標本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

【細胞培養(yǎng)物上清】：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將上清置于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

【樣品保存】：樣品收集后若在1周內(nèi)進行檢測的可保存于4℃，若不能及時檢測，請按一次使用量分裝，凍存于-20℃（1個月內(nèi)檢測），或-80℃（6個月內(nèi)檢測），避免反復凍融，標本溶血會影響最后檢測結果，因此溶血標本不宜進行此項檢測。

小鼠二羥環(huán)氧苯并芘(BPDE)ELISA檢測試劑盒注意事項：

1.  實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。

2.  加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免第①孔與最后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響實驗的準確性以及重復性。

3.  孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。 

4.  反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。

5.  建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。 

6.  建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商聯(lián)系，如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調換，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。

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