產(chǎn)品簡(jiǎn)介：軒澤康豬附紅細(xì)胞體病ELISA試劑盒 定性檢測(cè)

【產(chǎn)品規(guī)格】：96T/盒：zui多可檢測(cè)90個(gè)樣本；48T/盒：zui多可檢測(cè)42個(gè)樣本

【保存條件】：2-8℃，避光防潮儲(chǔ)存

【檢測(cè)目的】：定性檢測(cè)

【實(shí)驗(yàn)儀器】：酶標(biāo)儀

【檢測(cè)方法】：雙抗一步夾心法

【待檢樣本】：組織勻漿、細(xì)胞上清液、血清、血漿等

【特色服務(wù)】：免費(fèi)代測(cè)ELISA實(shí)驗(yàn)、支持定制

檢測(cè)原理：試劑盒采用雙抗一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被豬附紅細(xì)胞體病IgG抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體，經(jīng)過(guò)溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD 值），與CUT OFF值相比較，從而判定標(biāo)本中豬附紅細(xì)胞體?。‥perythrozoonosis）的存在與否。

樣品收集、處理及保存方法：

1.  血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2.  血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清。

3.  細(xì)胞上清液：3000轉(zhuǎn)離心10分鐘去除顆粒和聚合物。

4.  組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉(zhuǎn)離心10分鐘取上清。

5.  保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

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軒澤康豬附紅細(xì)胞體病ELISA試劑盒 定性檢測(cè)結(jié)果判斷：

 1.  試驗(yàn)有效性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00；

                陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15。

2.  臨界值（Cut off）計(jì)算：臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15

3.  陰性判斷：樣品OD值＜臨界值（Cut off），樣品為陰性

4.  陽(yáng)性判斷：樣品OD值＞臨界值（Cut off），樣品為陽(yáng)性

試劑盒性能：

1.  準(zhǔn)確性：陽(yáng)性對(duì)照孔OD值平均值≥1.00；陰性對(duì)照孔OD值平均值≤0.15，說(shuō)明試驗(yàn)結(jié)果有效。

2.  特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類(lèi)似物交叉反應(yīng)。

3.  重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。

常見(jiàn)問(wèn)題解答：

1.     【高背景或陰性對(duì)照值偏高】

可能的原因：陰性對(duì)照孔被陽(yáng)性對(duì)照或樣品污染；抗體非特異性結(jié)合；酶結(jié)合物過(guò)濃；孵育溫度過(guò)高；底物在使用前曝光；讀板前停留時(shí)間過(guò)長(zhǎng)

上海軒澤康生物為您提供解決方案：洗滌時(shí)勿將洗液溢出孔外；建議更換封閉液；檢查酶結(jié)合物是否按照說(shuō)明書(shū)規(guī)定稀釋?zhuān)粰z查孵育箱的溫度是否正確、穩(wěn)定；應(yīng)保存在暗處、避光；加終止液后3分鐘內(nèi)讀數(shù)。

2.     【陽(yáng)性對(duì)照值偏低或低吸光度】

可能的原因: 試劑未平衡至室溫;檢測(cè)體積偏小;孵育時(shí)間過(guò)短;底物受污染;樣本中有抑制劑。

上海軒澤康生物為您提供解決方案：實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前，將試劑盒從冰箱內(nèi)取出平衡至室溫（20-25℃）；檢查移液器吸液通道是否堵塞；使用計(jì)時(shí)器，準(zhǔn)確孵育時(shí)間；使用新配置的試劑，重新實(shí)驗(yàn)；疊氮鈉會(huì)抑制HRP酶的活性。

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