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北京云肽生物科技有限公司
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當(dāng)前位置:北京云肽生物科技有限公司>>生化試劑>>阿拉丁>> R301899-100ml阿拉丁 RIPA裂解液(強(qiáng))-常備現(xiàn)貨

阿拉丁 RIPA裂解液(強(qiáng))-常備現(xiàn)貨

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)R301899-100ml

品       牌阿拉丁

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地北京市

更新時(shí)間:2024-11-13 14:02:12瀏覽次數(shù):1136次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100ml
貨號(hào) R301899-100ml 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè),制藥
主要用途 主要用于從動(dòng)物組織和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞
產(chǎn)品貨號(hào):R301899-100ml
產(chǎn)品名稱:RIPA裂解液(強(qiáng))
產(chǎn)品規(guī)格:100ml
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
規(guī)格或純度:無(wú)抑制劑
儲(chǔ)存溫度:2-8°C儲(chǔ)存
運(yùn)輸條件:冰袋運(yùn)輸
阿拉丁 RIPA裂解液(強(qiáng))-常備現(xiàn)貨

阿拉丁  R301899-100ml  RIPA裂解液(強(qiáng))

 

阿拉丁  RIPA裂解液(強(qiáng))-常備現(xiàn)貨

產(chǎn)品貨號(hào):R301899-100ml

產(chǎn)品名稱:RIPA裂解液(強(qiáng))

產(chǎn)品規(guī)格:100ml

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

規(guī)格或純度:無(wú)抑制劑

英文名稱:RIPA Lysis Buffered Solution(Strong)

儲(chǔ)存溫度:2-8°C儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件:冰袋運(yùn)輸

RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織以及細(xì)胞快速裂解液,主要用于從動(dòng)物組織和哺乳動(dòng)物細(xì)胞中抽取可溶性蛋白,可用于裂解貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。按照其裂解液的強(qiáng)度可以分為強(qiáng)、中、弱三類,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇相應(yīng)產(chǎn)品。RIPA裂解液(強(qiáng))可以有效提取細(xì)胞核、細(xì)胞膜和胞漿蛋白,提取的蛋白可應(yīng)用于蛋白定量、Western BlotIP等檢測(cè)分析。

 

具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)


阿拉丁  RIPA裂解液(強(qiáng))-常備現(xiàn)貨 

使用方法

 ()貼壁培養(yǎng)細(xì)胞

1.取本品置于室溫溶解混勻,根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求加入酶抑制劑。

2.去除貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)液,用 PBS、NS 或無(wú)血清培養(yǎng)液清洗1次,低速離心,棄上清,留取沉淀。

3.按照 6 孔板每孔加入150250μl 含有酶抑制劑的裂解液的比例,加入本品。移液器輕輕吹打,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。置于冰上或 4℃裂解,通常裂解液作用于細(xì)胞 13s 內(nèi),細(xì)胞就會(huì)被裂解。通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150μl 裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200250μl。

4.1000012000g,4℃離心 510min(如無(wú)低溫離心機(jī),室溫下離心亦可),取上清。

5.后續(xù)的 SDS-PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

()懸浮培養(yǎng)細(xì)胞

1.取本品置室溫溶解混勻后,加入酶抑制劑。

2.低速離心懸浮細(xì)胞,棄上清,收集沉淀。

3.用手指輕彈細(xì)胞,使其松散。按照 6 孔板每孔細(xì)胞加入150250μl含有酶抑制劑的裂解液的比例,加入本品。通常 6 孔板每孔細(xì)胞加入 150μl 裂解液已經(jīng)足夠,但如果細(xì)胞密度非常高可以適當(dāng)加大裂解液的用量到 200250μl。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞,充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)、胞沉淀。

4.1000012000g,4℃離心 510min(如無(wú)低溫離心機(jī),室溫下離心亦可),取上清。

5.進(jìn)行后續(xù)的 SDS-PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

()組織樣本

1.取本品置于室溫溶解混勻后,加入酶抑制劑。

2.把組zhi剪切成細(xì)小的碎片,越小越好。

3.取在液氮或超低溫冰箱中冷凍 30min 以上的組織,迅速用液氮研磨,研磨過(guò)程盡量控制在12min 之內(nèi),以減少蛋白的降解。

4.按照每 20mg 組織加入 150250μl 裂解液的比例,加入含有酶抑制劑的裂解液。冰上或4℃裂解 1530min

5.步驟 3、4 亦可以采用如下過(guò)程:按照每 20mg 組織加入 150250μl 裂解液的比例加入含有酶抑制劑的本品。用玻璃勻漿器或組織研磨器勻漿,直至充分裂解,該過(guò)程盡量控制在 12min 之內(nèi),以減少蛋白的降解。

6.1000012000g,4℃離心 510min(如無(wú)低溫離心機(jī),室溫下離心亦可),取上清。

7.進(jìn)行后續(xù)的 PAGEWestern、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。

注意事項(xiàng)

1.去除貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)液后,如果血清中的蛋白沒(méi)有干擾,可以不用清洗。

2.如果裂解不充分可以適當(dāng)增加裂解液的用量,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量。

3.如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50100 萬(wàn)細(xì)胞/離心管,然后再裂解。大團(tuán)的細(xì)胞較難裂解充分,而少量的細(xì)胞由于裂解液容易和細(xì)胞充分接觸,相對(duì)比較容易裂解充分。

4.如果組織樣品本身非常細(xì)小,可以適當(dāng)剪切后直接加入裂解液裂解,通過(guò)強(qiáng)烈 Vorte× 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。直接裂解的優(yōu)點(diǎn)是比較方便,不必使用勻漿器,缺點(diǎn)是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。

5.在低溫情況下有可能出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象,可 37℃水浴促其溶解,不會(huì)影響使用效果;溶解時(shí)間不易過(guò)長(zhǎng),避免有效成分失效。

6.裂解產(chǎn)物中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)一小團(tuán)透明膠狀物,屬正?,F(xiàn)象。該透明膠狀物為含有基因組 DNA 等的復(fù)合物。在不檢測(cè)和基因組 DNA 結(jié)合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn);如果需要檢測(cè)和基因組結(jié)合特別緊密的蛋白,則可以通過(guò)超聲處理打碎打散該透明膠狀物,隨后離心取上清用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。

7.細(xì)胞裂解的操作步驟,應(yīng)置于冰上或 4℃進(jìn)行。

使用范圍

適用于一般生物學(xué)及醫(yī)學(xué)研究

 

產(chǎn)品訂購(gòu)信息:

R301899-100ml  RIPA裂解液(強(qiáng))  100ml

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