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賽默飛色譜與質(zhì)譜中國 昨天

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秦旭陽、施磊

導(dǎo)讀

8月23日，國家藥典委員會(huì)公布了2020年版《中國藥典》四部通則增修訂內(nèi)容。隨著2020年版《中國藥典》頒布的臨近，飛飛帶您一起來回顧下這些年各國藥典的變化。

美國藥典（USP）

藥物：琥珀酸美托洛爾，常用于治療高血壓、冠心病和心律失常

特點(diǎn)：弱紫外吸收和無紫外吸收雜質(zhì)

檢測方法：將原先推薦的UV檢測器，更改為使用電霧式檢測器CAD進(jìn)行雜質(zhì)含量測定

圖1 美國藥典論壇中針對(duì)琥珀酸美托洛爾的推薦方法（點(diǎn)擊查看大圖）

美國藥典(USP）

藥物：脫氧膽酸的含量和雜質(zhì)檢測。

挑戰(zhàn)：脫氧膽酸“升級(jí)”成藥品后，需要更為嚴(yán)格的檢測手段。

檢測方法：由滴定法更新為CAD檢測方法。

圖2 美國藥典中針對(duì)脫氧膽酸含量測定方法更新為CAD檢測法（點(diǎn)擊查看大圖）

歐洲藥典（EP）和美國藥典（USP）

藥物：釓布醇，顱腦共振成像的造影劑

檢測方法：兩部藥典均發(fā)布了用電霧式檢測器（CAD）測定的方法

圖3 歐洲藥典中針對(duì)釓布醇的檢測方法

（點(diǎn)擊查看大圖）

電霧式檢測器CAD是什么?

為什么美國藥典（USP）和歐洲藥典（EP）先后開始采用CAD作為推薦檢測方法？

圖4 電霧式檢測器 CAD

電霧式檢測器（CAD）屬于新型通用型檢測器，靈敏度高，重現(xiàn)性好。基于霧化檢測器的原理，洗脫液霧化后形成顆粒，經(jīng)過蒸發(fā)管干燥后與帶電氮?dú)馀鲎?，使得分析物顆粒表面帶正電荷，后通過靜電計(jì)測量分析物顆粒表面的電荷量，使得色譜峰面積（分析物顆粒的質(zhì)量）與表面所帶電荷量相關(guān)，終成為確定物質(zhì)濃度的依據(jù)。

圖5 電霧式檢測器CAD的工作原理示意圖（點(diǎn)擊查看大圖）

電霧式檢測器基于*的霧化原理，突破了其他檢測器設(shè)計(jì)上的局限，達(dá)到通用性目的，為難揮發(fā)化合物提供一致響應(yīng)性！同時(shí)，CAD檢測器具有較高的靈敏度和低檢測極限，輕松檢測到納克數(shù)量級(jí)的化合物，并且與液相色譜分離系統(tǒng)聯(lián)用，兼顧重現(xiàn)性與穩(wěn)定性，從而為大部分非揮發(fā)性和半揮發(fā)性有機(jī)物進(jìn)行準(zhǔn)確的定量或半定量分析。

圖6 CAD的定量原理

與傳統(tǒng)檢測器相比，CAD有何過人之處？

CAD

VS

UV

與常見的UV檢測器相比，CAD的響應(yīng)不受化合物紫外吸收基團(tuán)的影響，可以檢測UV無法檢測到的弱紫外吸收化合物，半揮發(fā)和難揮發(fā)的化合物都能在CAD上具有較好的響應(yīng)。

CAD

與蒸發(fā)光散射檢測器相比，CAD具有更高的檢測靈敏度、更好的日內(nèi)和日間重復(fù)性和更寬的線性范圍。而很多蒸發(fā)光散射檢測器無法檢測到的雜質(zhì)，在CAD上具有較好的響應(yīng)。

另一方面，難揮發(fā)性化合物的CAD響應(yīng)與分析物的理化性質(zhì)無關(guān)，在進(jìn)入CAD的流動(dòng)相組成不變的情況下，進(jìn)樣量相同的不同化合物具有相同的CAD響應(yīng)。換言之，CAD可用已知化合物的線性曲線定量未知化合物。此外，CAD做化合物純度分析所得數(shù)據(jù)更接近樣品的真實(shí)組成。

CAD特點(diǎn)

●靈敏度高，如在分析葡萄糖、蔗糖和乳糖時(shí)，能檢測到0.5ng的柱上樣量；

●應(yīng)用廣泛，能分析小分子、大分子化合物，如氨基酸、蛋白、聚合物等；

●更高的響應(yīng)一致性。如對(duì)24種化合物在相同色譜條件下分別直接進(jìn)樣1µg（不接色譜柱），其響應(yīng)的峰面積的RSD值僅為10.7%；

●動(dòng)態(tài)檢測范圍寬，達(dá)3-4個(gè)數(shù)量級(jí)；

●操作簡單，維護(hù)簡便，工作流速0.01-2.00 ml/min，兼容Micro-LC和UHPLC。

2004年10月，電霧式檢測器一經(jīng)推出，就相繼獲得儀器行業(yè)的高榮譽(yù)：2005年PITTCON“撰稿人”銀獎(jiǎng)、及被稱為“發(fā)明領(lǐng)域的諾貝爾獎(jiǎng)”的R&D100 獎(jiǎng)。CAD在藥物、蛋白、磷酯類、類固醇類、低聚糖類、表面活性劑類、碳水化合物、聚合物、對(duì)離子和多肽類的分析等多領(lǐng)域展現(xiàn)出*的優(yōu)勢。每年都會(huì)有大量的藥物分析的檢測方法，選擇或者更改為CAD檢測。

詳述CAD檢測器原理與技術(shù)應(yīng)用的專著《Charged Aerosol Detection for Liquid Chromatography and Related Separation Techniques（用于液相色譜和相關(guān)分離技術(shù)的電霧式檢測器）》也已于近期出版，為使用者提供了全面詳盡的技術(shù)指南。

每年越來越多的CAD檢測方法被美國藥典和歐洲藥典的收錄，反映出各大藥典對(duì)于新新型檢測技術(shù)保持積極的態(tài)度，對(duì)我們國內(nèi)的CAD用戶是一個(gè)極大的鼓舞。我們也希望能與用戶一同攜手，積極響應(yīng)《中國制造2025》的號(hào)召，為撰寫更多CAD相關(guān)方法與中國標(biāo)準(zhǔn)提供藍(lán)本，加速轉(zhuǎn)中國藥典與國標(biāo)數(shù)字化和標(biāo)準(zhǔn)化，早日實(shí)現(xiàn)制造強(qiáng)國的中國夢。

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