浙江福立分析儀器有限公司
超實(shí)用干貨（一) | 如何選擇合適的C18色譜柱？
檢測(cè)樣品：肉蓯蓉
檢測(cè)項(xiàng)目：含量測(cè)定
方案概述：十八烷基硅烷（常被稱為ODS或C18）是最早的鍵合固定相之一，C18是具有烷基鏈的硅烷化劑與硅膠表面的硅醇基反應(yīng)制得的鍵合相。因?yàn)槭褂昧斯矁r(jià)鍵和的方式將烷基鏈緊緊固定在硅膠表面，所以烷基鏈不會(huì)被流動(dòng)相沖洗掉，作為色譜固定相穩(wěn)定發(fā)揮作用。
《中國(guó)藥典》中涉及使用液相色譜法進(jìn)行檢測(cè)的品種，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑的色譜柱應(yīng)用最為廣泛。
十八烷基硅烷（常被稱為ODS 或C18）是最早的鍵合固定相之一，C18是具有烷基鏈的硅烷化劑與硅膠表面的硅醇基反應(yīng)制得的鍵合相。因?yàn)槭褂昧斯矁r(jià)鍵和的方式將烷基鏈緊緊固定在硅膠表面，所以烷基鏈不會(huì)被流動(dòng)相沖洗掉，作為色譜固定相穩(wěn)定發(fā)揮作用。
然而多數(shù)情況《中國(guó)藥典》僅指明色譜柱的填料為十八烷基硅烷鍵合硅膠，卻沒(méi)有明確的規(guī)格信息。C18色譜柱因鍵合方式、粒徑、長(zhǎng)度、內(nèi)徑等諸多因素呈現(xiàn)出不同選擇性。目前市場(chǎng)上的C18色譜柱種類(lèi)眾多，而《中國(guó)藥典》又缺少選柱詳細(xì)指導(dǎo)，使得色譜分析工作者執(zhí)行藥典推薦方法選擇合適色譜柱的時(shí)候，會(huì)感到非常困惑。
本文將以2020版《中國(guó)藥典》中肉蓯蓉的含量測(cè)定為例，從色譜柱的碳載量、柱長(zhǎng)和填料基質(zhì)三個(gè)維度闡述如何選擇一支合適的液相色譜柱。
如圖所示，2020版《中國(guó)藥典》中肉蓯蓉的含量測(cè)定中，色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)，僅有色譜柱填料類(lèi)型，無(wú)具體規(guī)格。我們選擇了4種C18色譜柱（見(jiàn)表）對(duì)肉蓯蓉的對(duì)照品分別進(jìn)行了分析測(cè)試。
①藥典里注明“以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑”且沒(méi)有特別指明規(guī)格明細(xì)的情況下，色譜柱的規(guī)格我們一般就選HPLC上常用的規(guī)格：柱長(zhǎng)250 mm，內(nèi)徑4.6 mm，粒徑5 μm。流動(dòng)相pH在色譜柱pH使用范圍內(nèi)的前提下，選在中藥飲片分析中通用性強(qiáng)的全多孔型色譜柱1，碳載量為15%。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在藥典的流動(dòng)相梯度下，肉蓯蓉的對(duì)照品溶液中毛蕊花糖苷未被洗脫下來(lái)，需要延長(zhǎng)流動(dòng)相的梯度毛蕊花糖苷才能出峰。雖然松果菊苷的塔板數(shù)達(dá)到了藥典的要求，但分析效率偏低。
②優(yōu)化柱長(zhǎng)。一般來(lái)說(shuō)柱越短，分離所需時(shí)間越短。選用全多孔型色譜柱2，碳載量為15%，柱長(zhǎng)150 mm，內(nèi)徑4.6 mm，粒徑5 μm。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在藥典的流動(dòng)相梯度下，肉蓯蓉的對(duì)照品溶液中中毛蕊花糖苷未被洗脫下來(lái)，需要延長(zhǎng)流動(dòng)相的梯度毛蕊花糖苷才能出峰。并且松果菊苷的塔板數(shù)也只是勉強(qiáng)滿足藥典的要求。這就意味著色譜柱的壽命也不會(huì)很長(zhǎng)。對(duì)于分析工作者來(lái)說(shuō)，這不是一個(gè)高性價(jià)比的選擇。
③優(yōu)化碳載量。一般來(lái)說(shuō)，碳載量越小，色譜柱的疏水作用能力越弱，對(duì)物質(zhì)的保留越弱。選用全多孔型色譜柱3，碳載量為15%，柱長(zhǎng)250 mm，內(nèi)徑4.6 mm，粒徑5 μm。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：和色譜柱1同樣的色譜條件下，雖然保留時(shí)間均有所提前，松果菊苷的塔板數(shù)也達(dá)到了藥典的要求，但總分析時(shí)間也已經(jīng)接近60分鐘了，分析效率仍然較低。
④優(yōu)化硅膠顆粒類(lèi)型，選用核殼型填料色譜柱4。
全多孔型填料色譜柱更為常見(jiàn)，鍵合相種類(lèi)更多；
核殼型填料色譜柱相對(duì)于全多孔型色譜柱而言，具有高柱效、快速分析的優(yōu)勢(shì)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果：肉蓯蓉中的松果菊苷和毛蕊花糖苷的檢測(cè)，整體分析時(shí)間在40分鐘以內(nèi)，優(yōu)化了分析效率，同時(shí)理論塔板數(shù)也滿足藥典要求。
不同C18色譜柱之間的保留行為差別很大，選擇合適的C18色譜柱是藥物分析工作的重點(diǎn)。目前使用《中國(guó)藥典》未能對(duì)各品種項(xiàng)下的C18色譜柱進(jìn)行品牌和規(guī)格方面的規(guī)定。所以在藥物分析工作中，要注意到C18色譜柱之間的差異，并挑選合適的C18色譜柱來(lái)開(kāi)展實(shí)驗(yàn)分析。
相關(guān)產(chǎn)品信息：
相關(guān)產(chǎn)品清單
溫馨提示：
1.本網(wǎng)展示的解決方案僅供學(xué)習(xí)、研究之用，版權(quán)歸屬此方案的提供者，未經(jīng)授權(quán)，不得轉(zhuǎn)載、發(fā)行、匯編或網(wǎng)絡(luò)傳播等。
2.如您有上述相關(guān)需求，請(qǐng)務(wù)必先獲得方案提供者的授權(quán)。
3.此解決方案為企業(yè)發(fā)布，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由上傳企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
最新解決方案
- 前瞻2025版中國(guó)藥典 | 譜育科技中藥元素形態(tài)和價(jià)態(tài)分析解決方案
- 上新！IPHASE原代肝細(xì)胞分離試劑盒，助您分出“心目中的它”！
- 【HANSON】阿昔洛韋霜5%（Zovirax, US）的體外滲透研究（IVPT）
- Xtimate C18測(cè)定鹽酸氨溴索注射液有關(guān)物質(zhì)
- Ultimate HILIC Amide 測(cè)定抗壞血酸鈉含量
- Ultimate Alk C18 分離USP頭孢吡肟雜質(zhì)E和D
- 【新品】色譜柱界的曙光！簡(jiǎn)單實(shí)驗(yàn)條件，輕松實(shí)現(xiàn)對(duì)抗生素的分離
- Ultimate PFP分離嗎伐考昔及其雜質(zhì)MVC30
- 標(biāo)準(zhǔn)中“川木通（小木通）配方顆粒的檢測(cè)”，使用迪馬色譜柱
- 熒光分光光度法在黃曲素含量測(cè)定上的應(yīng)用
該企業(yè)的其他方案
- 石油化工 | 福立液相色譜高效測(cè)定中間餾分芳烴含量
- 農(nóng)殘無(wú)處藏身：福立液相測(cè)定瓜果蔬菜中8種氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留
- 新國(guó)標(biāo)落地實(shí)施 | 福立液相精準(zhǔn)檢測(cè)食品添加劑——喹啉黃色素
- 食品安全新規(guī)定 | 明年起，多食品禁用脫氫乙酸及其鈉鹽，福立多方法快速檢測(cè)
- 守護(hù)電網(wǎng)安全：福立液相檢測(cè)變壓器油中糠醛的含量
- 新國(guó)標(biāo)下的食品監(jiān)管——嗎啉脂肪酸鹽果蠟檢測(cè)
- 【繁星伴月 闔家同?！扛Ａx器為中秋佳節(jié)送祝福守安全！
- 福立液相新品LC5190重點(diǎn)行業(yè)應(yīng)用來(lái)襲！
- 告別低效，福立液相雙波長(zhǎng)功能同時(shí)測(cè)定6種維生素B！
- 福立液相與PolyPak Ca糖醇專(zhuān)用色譜柱完美結(jié)合,實(shí)現(xiàn)甘露醇高效分離分析
業(yè)界頭條
- 5家增收不增利！面對(duì)經(jīng)營(yíng)壓力，多上市藥店表示將調(diào)整拓展策略
-
根據(jù)三季報(bào)顯示，六家上市連鎖藥店今年前三季度歸母凈利潤(rùn)“五盈一虧”，漱玉平民則出現(xiàn)虧損，大參林、老百...
- 我國(guó)血制品市場(chǎng)空間有望提升至780億元，頭部藥企并購(gòu)動(dòng)作頻繁
- BTK抑制劑市場(chǎng)規(guī)模有望超260億美元，成為國(guó)內(nèi)外藥企重點(diǎn)研發(fā)賽道
- 近期國(guó)內(nèi)新藥積極進(jìn)展消息不斷：上市、獲批臨床、擬納入突破性治療品種等
- 藥機(jī)展CIPM盛幕將啟 艾伊科技攜創(chuàng)新產(chǎn)品蓄勢(shì)待發(fā)
- 這些2024年業(yè)績(jī)確定性強(qiáng)及資金充足的醫(yī)藥個(gè)股被看好，包括康方生物、信達(dá)生物等
- 超150億吸入制劑市場(chǎng)，吸引藥企加碼布局
- 491家藥企披露三季報(bào)，業(yè)績(jī)分化明顯！中藥等領(lǐng)域馬太效應(yīng)凸顯
