mPTP實(shí)驗(yàn)服務(wù)
mPTP:是線粒體內(nèi)外膜之間的一-組蛋白復(fù)合體,是由外膜的電壓依賴的陰離子通道(VDAC) .內(nèi)膜的腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)位蛋白(ANT) 以及親環(huán)素D等組成。線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔(mPTP) 在細(xì)胞的生存、凋亡中扮演著重要角色,它涉及缺血再灌
注、腫瘤、衰老.神經(jīng)變性等多個(gè)領(lǐng)域。
檢測(cè)手段:
線粒體膜通道孔(MPTP) 熒光檢測(cè)
實(shí)驗(yàn)步驟:
純化線粒體樣品,樣本的一-系列處理:
選擇下列方式之-進(jìn)行操作:
1.使用(共聚焦)熒光顯微鏡觀察(定性檢測(cè)) :
①移取10微升.上述懸液到載波片上,蓋上蓋玻片
②激發(fā)波長(zhǎng)488nm,散發(fā)波長(zhǎng)505nm--
綠色熒光減弱,表明膜通道孔活性(MPTP) 增強(qiáng)
2.或使用熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀檢測(cè)(定量檢測(cè)) :
①移取100微升上述懸液到100微升比色杯或黑色96孔板
②即刻放進(jìn)熒光分光光度儀或熒光酶標(biāo)儀:激發(fā)波長(zhǎng)488nm.散發(fā)波長(zhǎng)505nm--
RFU降低,表明膜通道孔活性(MPTP) 增強(qiáng)
實(shí)驗(yàn)周期及交付標(biāo)準(zhǔn)
1.實(shí)驗(yàn)周期: 2-3周
2.交付標(biāo)準(zhǔn):熒光圖片、比值、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器)
需確認(rèn)的信息
1.樣本種屬及類型(組織還是細(xì)胞)
2.樣本數(shù)量
3.是否提供探針
RNA反義純化(RAP) 實(shí)驗(yàn)服務(wù)