詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:羊口瘡病毒PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013563
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
Cyt-C(Mouse Cytochrome-C) ELISA Kit 小鼠Multi-class antibodies: 48T
SM-MHC/FITC 熒光標記心肌肌凝蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh DHRS7C 短鏈脫氫/還原家族7C抗體 0.2ml
Mouse IgG/Cy5.5 熒光Cy5.5標記小鼠IgG(細胞流式同型對照) 0.1ml
LCA5L 致盲基因LCA5樣蛋白抗體 0.2ml
金霉檢測試劑盒 97孔/盒 動物組織/產(chǎn)/蜂蜜/奶
SM-MHC/FITC 熒光標記心肌肌凝蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Human C-Peptide ELISA Kit 人C肽Multi-class antibodies: 48T
Phospho-Lyn (Tyr497) 磷化膜相關蛋白酪激Lyn抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIF2B 有絲分裂驅動蛋白樣2B抗體 0.2ml
HBV preS2Ag(Human hepatitis B virus) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒前S2抗原 96T
PROK2 前動力蛋白2抗體 0.2ml
phospho-CDH2 (Tyr820) 磷化N-鈣粘附分子抗體 0.1ml
Phospho-Lyn (Tyr497) 磷化膜相關蛋白酪激Lyn抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey Goat IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLE1 核孔蛋白GLE1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB3 錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體 0.2ml
HSP27/RBITC 紅色熒光羅丹明標記熱休克蛋白-27抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG whole serum 兔抗小鼠IgG抗血清 1ml
Phospho-PKA C (Thr197)/FITC 熒光標記磷化蛋白激C亞性抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
羊口瘡病毒PCR試劑盒50次乳乳球菌乳脂亞種種屬: Lactococcus│lactis subsp. cremoris提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0006生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
黑曲霉種屬: Aspergillus│niger提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 311生長條件: 25-28℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
恥垢分枝桿菌種屬: Mycobacterium│Mycobacterium smegmatis提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應用領域: 研究生長條件: 37存儲條件: 真空冷凍干燥法
米根霉種屬: Rhizopus│oryzae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
Gremlin-1蛋白(GREM1)ELISA試劑盒單組份性樣品溶劑 分≤0.01%二甲基三硫 98%溴酚藍鈉鹽
GDP解離抑制因子2(GdI2)ELISA試劑盒庫侖法無隔膜卡爾費休試劑 用作電解液魚腥草 98%溴酚藍鈉鹽
G1/S特異性周期蛋白E1(CCNE1)ELISA試劑盒庫侖法通用型陽用卡爾費休試劑 用作有隔膜式陽電解液2.5-二羥基-1.4-二噻 97%溴酚紅鈉
F-肌動蛋白(F-actin)ELISA試劑盒庫侖法含吡啶陰用卡爾費休試劑 *按G8 7600-87配制2,3-二乙基-5-甲基吡 98%硬脂丁酯(>98%,BR)
FOS 樣抗原2(FOSL2)ELISA試劑盒庫侖法酮測定陽用卡爾費休試 也可用作無隔膜電解液四氫噻吩-3-酮 98%C10E6,10%溶液
FMS樣酪氨激3配體(Flt-3L)ELISA試劑盒庫侖法安全型陽用卡爾費休試劑 不含甲、四氫噻吩-3-酮 ≥98%, Kosher, FGC12E10,10%溶液
FMS樣酪氨激3(Flt3)ELISA試劑盒庫侖法安全型陰用卡爾費休試劑 不含甲、和四化碳反式-2,4-癸二烯 >90.0%(GC)C12E9, 10%溶液
Fc受體樣蛋白3(FCRL3)ELISA試劑盒庫侖法酮測定陰用卡爾費休試 用作有隔膜陰電解液2,5-二甲基呋喃 99%無化鈣(>96%,Tech Grade)
FAS配體(Fas L)ELISA試劑盒單組份無吡啶卡爾費休滴定劑 5mg/ml,測量較高樣品香草乙酯 97%次亞鈣(>98%,BR)
FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA試劑盒單組份無吡啶卡爾費休滴定劑 2mg/ml,測含量較低樣品4-乙基辛 98%鈣六(>98%,BR)
E選擇(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒異 >99.0%(GC)2-乙基-3,5-二甲基吡 99%草鈣一(>98%,BR)
E選擇(E-Sel)ELISA試劑盒異 >93.0%(GC)糠基硫 98%氧化鈣(>98%,BR)
E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)ELISA試劑盒異 CP,98.0%糠基硫 97%氧化鈣(塊)(>98%,BR)
Ephrin-B2(EFNB2)ELISA試劑盒二異 98%乙糠硫酯 99%過氧化鈣(>75%,BR)
EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)ELISA試劑盒三異 95%3-(2-呋喃基)烯 99%二氫鈣一(85%~95%,BR)
Egl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)ELISA試劑盒(±)-樟腦(合成) 96%甲基糠基二硫 98%焦鈣(>97%,BR)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。