詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:幽門螺旋桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013520
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human immunosuppressive acidic protein,IAP ELISA Kit 人抑制性蛋白Multi-class antibodies: 48T
SPAG5/map126/Astrin 相關(guān)抗原5抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.3ml
E(Mouse estrogen) ELISA Kit 小鼠雌 96T
NFAT2 活化T細(xì)胞核因子1蛋白抗體 0.1ml
BPNT1 二磷3核苷抗體 0.2ml
SPAG5/map126/Astrin 相關(guān)抗原5抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
TXB2(Human Thromboxane B2) ELISA Kit 人血栓B2Multi-class antibodies: 48T
lamin C 核纖層蛋白C抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh KLHL14 Kelch樣蛋白14抗體 0.2ml
Inhbb(Human inhibin beta-B) ELISA Kit 人抑制β-B 96T
Protein S 蛋白S抗體 0.2ml
CDCA7L 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白JPO2抗體 0.2ml
lamin C 核纖層蛋白C抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Mink IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
GCNT3 β1-6 N-乙?;咸烟寝D(zhuǎn)移3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARL8B ADP核糖基化樣因子8B抗體 0.2ml
IGF-1 R/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長因子-I受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MK IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
PLASTIN3/T Plastin/FITC 熒光標(biāo)記絲束蛋白T Plastin抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
幽門螺旋桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次鮮綠青霉種屬: Penicillium│viridicatum分離基物: 試驗(yàn)雙望棱鏡提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0089生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
帶小棒鏈霉菌種屬: Streptomycesclavuligerus分離基物: 土壤安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株;基因組序列號:ABJH00000000,CM000913,CM001015;細(xì)胞提取物能夠通過環(huán)化作用將乙酰-L-半胱氨酰-D-纈氨轉(zhuǎn)變?yōu)槠S青霉培養(yǎng)基: 158生長條件: 28℃
釀酒酵母種屬: SaccharomycescerevisiaeHansen安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 啤酒酵母培養(yǎng)基: 13生長條件: 25-28℃
膠凍樣芽胞桿菌種屬: Bacillus│mucilaginosus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0067生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
凋亡相關(guān)半胱氨肽4(Casp4)ELISA試劑盒高純氧化鈮 光玻級99.99%聚乙烯亞 M.W. 600, 99%司班80;司盤80
凋亡蛋白激活因子1(Apaf-1)ELISA試劑盒氧化鈮 AR,99.9%聚乙烯亞 M.W. 1800, 99% 聚乙二1000
凋亡蛋白激活因子1(APAF1)ELISA試劑盒氧化鈮 99.95%,冶金級聚乙烯亞 M.W. 10,000, 99%胰蛋白胨(BD)
凋亡蛋白活化因子1(APAF-1)ELISA試劑盒氧化鈮 SP聚乙烯亞 M.W. 70,000, 50%溶液丹磺酰
淀粉狀蛋白β(A4)前體蛋白結(jié)合家族B成員1(FE65)ELISA試劑盒氧化鉭 SP無哌 99%N-乙基順二酰亞
淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒氧化鉭(V) 99.99% metals basis,用于光學(xué)玻璃或單晶三乙烯二 98%碳?xì)?AR)
電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃蛋白-泛醌氧化還原/電子轉(zhuǎn)運(yùn)黃蛋白脫氫(ETFDH)ELISA試劑盒氧化鉭(V) 99.5%2-氨基-4-甲 98%十二基磺鈉(BR)
電子轉(zhuǎn)移黃蛋白β肽(ETFB)ELISA試劑盒氧化鉭(V) 99.99% metals basis,<2 μm,用于鍍膜3,5-二(三氟甲基) 98%茶
電壓門控通道抗體(VGKC-ab)ELISA試劑盒鉭桿 diam. 3 mm, ≥99.95% metals basis2--6-氟甲 98%纖維
電壓門控通道(VGKC)ELISA試劑盒鉭 99.95%,Φ0.5mm電容器用2--6-氟甲 95%硫軟骨
第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA試劑盒高比容鉭粉 30K4--2-甲 98%異煙
第10號染色體缺失并與張力蛋白同源的(PTEN/MMAC1)ELISA試劑盒高比容鉭粉 23K三聚氟 98%L-蘋果
抵抗樣分子β(RELM-β)ELISA試劑盒高比容鉭粉 50K2,4-二 98%蛋白K溶液(20 mg/ml)
抵抗(RETN)ELISA試劑盒2,6-二 96%2,3-二 94%多聚賴氨0.1%溶液
抵抗(Resistin)ELISA試劑盒4,4'-二羥基二砜 99%2,6-二氟甲 98%鹽四環(huán)溶液,50 mg/ml
低氧誘導(dǎo)因子3α(HIF-3α)ELISA試劑盒2,6-二硝基 98%2,6-二氟 97%8-羥基喹啉硫鹽(植物培養(yǎng)級)