詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產品名稱:鼠疫耶爾森氏菌染料法PCR試劑盒50次
產品貨號:FS-P013518
產品規(guī)格:50次
產品分類:純化試劑盒
產品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
LAP18/stathmin/FITC 熒光標記白血病相關蛋白18/癌蛋白18抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SPARC/FITC 熒光標記富含半胱的性分泌蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh AIMP3/p18 抑癌蛋白AIMP3抗體 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
GATA6 GATA結合蛋白6抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgM/Cy5 Cy5標記的兔抗羊IgM 0.1ml
SPARC/FITC 熒光標記富含半胱的性分泌蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
EPO(Human Erythropoietin) ELISA Kit 人紅細胞生成Multi-class antibodies: 48T
Integrin Alpha X/CD11c 整合αX抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh KIAA1576/VAT1L 囊泡胺轉運蛋白1家族蛋白抗體 0.2ml
Cox V-IgG(Human Coxsackie virus IgG) ELISA Kit 人柯薩奇病毒IgG 96T
Protor-1 癌抑制基因Protor1抗體 0.1ml
Phospho-CDK9 (Thr29) 磷化周期依賴性激9抗體 0.1ml
Integrin Alpha X/CD11c 整合αX抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit Mink IgG/AP 性磷(AP)標記的兔抗貂IgG 0.1ml
G3BP2 G3BP2蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARL11 ADP核糖基化因子樣11抗體 0.2ml
phospho-IGF1 Receptor (Tyr1161) /FITC 熒光標記磷化胰島樣生長因子1受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MK IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗猴IgM 0.1ml
PLGF/FITC 熒光標記胎盤生長因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鼠疫耶爾森氏菌染料法PCR試劑盒50次側耳種屬: Pleurotus│lampas提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;礦物油法;定期移植法
淺紫鏈霉菌種屬: Streptomyces│violascens分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
玫瑰新鞘氨醇菌種屬: Novosphingobium│rosa提供形式: 凍干物模式菌株: yes應用領域: 模式菌株,用于分類學研究。培養(yǎng)基: 468生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法
芽孢桿菌種屬: Bacillus atrophaeus提供形式: 凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 指示菌。培養(yǎng)基: 蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產生芽孢。傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。
②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件: 30℃,好氧存儲條件: 2-8℃冷藏,凍干管10年以上,斜面1-3個月。
多球蛋白受體(poly-IgR)ELISA試劑盒硒粉 99.9% metals basis,200目對叔丁 95%吐溫80(化學純)
多聚血清蛋白(PHSA)ELISA試劑盒二氧化硒 AR,99%乙酰 98%吐溫80(藥用級)
多聚腺苷二核糖聚合(PARP)ELISA試劑盒碲 99.99% metals basis乙酰 CP,97%吐溫80(培養(yǎng)級)
多聚ADP核糖聚合(PARP)ELISA試劑盒4-二甲氨基吡啶 99%乙基乙二酰酯 98%亞鐵(AR)
多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試劑盒N-羥基鄰二甲酰亞 98%草酰 98%葡萄糖(AR)
多功能蛋白聚糖(versican)ELISA試劑盒2-巰基-5-甲基-1,3,4-噻二唑 99%氧化 AR,99.0% (劇品)PF-562271
多巴色異構(DT)ELISA試劑盒2-巰基并咪唑 98%氧化 電子級(劇品)海藻鈉
多巴脫羧(DDC)ELISA試劑盒鄰二甲酰亞 99%度米芬 97%鈉
多巴-β羥化(DBH)ELISA試劑盒異硫酯 98%環(huán)胞霉A 98%膠原I型(sigma)
多巴D2受體(D2R)ELISA試劑盒異硫酯 99%, 蛋白測序級2,3-二甲氧基甲 99%膠原II型(sigma)
多巴D1受體(D1R)ELISA試劑盒異硫酯 99%,用于HPLC標記3,4-二甲氧基甲 99%膠原IV型(sigma)
多巴(DA)ELISA試劑盒疊氮鈉 AR,99%(劇品)2,4-二羥基甲 98%鉬鈉二(AR)
對氧-3(PON3)ELISA試劑盒2,3,5-三酚 98%3,4-二羥基甲 98%對氨基甲(AR)
對氧(PON)ELISA試劑盒三乙二乙 85%3,4-二羥基甲 分析標準品,≥99%對氨基甲(標準品)
對稱二甲基精氨(SMDA)ELISA試劑盒內消旋-2,3-二巰基丁二 98%異香蘭 97%硅鎂(高純)
對氨基甲(PABA)ELISA試劑盒0.983-甲氧基甲 CP,98.0% L-抗壞血鈉
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。