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人鼻病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 13:16:14瀏覽次數(shù):256

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013516 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
人鼻病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:減蛋綜合征病毒血清樣品液相法去內(nèi)毒素試劑盒
2836-32-0羥基乙酸鈉血清樣品沉淀法去內(nèi)毒素試劑盒
白鮮堿CAS:484-29-7血影細(xì)胞(GHOST)制備試劑盒
加蘭他敏CAS:357-70-0血影細(xì)胞膜熒光染色試劑盒

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

人鼻病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒50次

50次

FS-P013516

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

Human rudimental bovine serum albumin check-up ELISA Kit 人的血清白蛋白殘留檢測Multi-class antibodies: 48T

 SPATA12 特異表達(dá)新基因5抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat  human IgM/Cy7 Cy7標(biāo)記的羊抗人IgM  0.1ml

SOD ELISA Kit 大鼠超氧化物歧化 96T

NHLH1 + NHLH2 螺旋環(huán)螺旋蛋白1+2抗體 0.2ml

B7H4 B7-H4抗體 0.1ml

 SPATA12 特異表達(dá)新基因5抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

i-PTH(Human intact Parathormone) ELISA Kit 人全段甲狀旁腺M(fèi)ulti-class antibodies: 48T

 LRP1/CD91 低密度脂蛋白相關(guān)受體1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh KLF2 肺Kruppel樣因子抗體  0.2ml

INS ELISA Kit 大鼠胰島 96T

prox1 prox-1抗體 0.1ml

c-Myb 轉(zhuǎn)錄激活因子MYB抗體 0.2ml

 LRP1/CD91 低密度脂蛋白相關(guān)受體1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  Mink IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml

GNA11 G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合蛋白α11/Gα 11 抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ARK5 AMPK的相關(guān)蛋白激5抗體  0.2ml

 IGFBP-1/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長因子結(jié)合蛋白-1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  MK IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗猴IgM  0.1ml

 PLGF /FITC 熒光標(biāo)記人胎盤生長因子(抗體)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人鼻病毒通用探針法熒光定量RT-PCR試劑盒黃色考克氏菌種屬: Kocuria│flava分離基物: 新疆空氣中提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 820生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法

耐鹽芽胞桿菌種屬: Bacillus│halodurans提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 0307生長條件: 30℃存儲條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法

騰沖萊西氏菌種屬: Laceyella│tengchongensis分離基物: 土壤樣品提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: CM0455生長條件: 55℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

擬青霉種屬: Paecilomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

二肽基肽Ⅳ(DPPⅣ)ELISA試劑盒鉬銨,四  用于和昆蟲培養(yǎng), 81-83% as MoO3丹參酮I  分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%草酰乙

二氫嘧啶脫氫[NADP+](DPYD)ELISA試劑盒鉬銨 SP他克莫司 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%硫鋅七(AR)

二氫嘧啶樣3(DPYSL3)ELISA試劑盒鉬銨 99.9% metals basis他克莫司 ≥98% (HPLC)鈉四

二氫嘧啶樣2(DPYSL2)ELISA試劑盒鉬銨,四 ACS, 81-83% as MoO33,3’-二沒食子酯茶黃 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥98.0% (HPLC)縮二脲

二羥基賴正己氨(DHLNL)ELISA試劑盒肼 AR,98.0%知母皂苷A-Ⅲ 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97%硫鎂無(分子生物學(xué)級)

二腺苷(ADP)ELISA試劑盒肼 CP,96.0%細(xì)辛 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%石英砂

二尿核苷葡糖基轉(zhuǎn)移2家族肽B4(UGT2B4)ELISA試劑盒鎢鈉 AR,99.5%四氫巴馬汀 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%乙基[3-(二基)基]碳二亞鹽鹽, 縮合劑

二級組織趨化因子(SLC/CCL21)ELISA試劑盒鎢鈉 CP,99.0%香蒲新苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%過硫

二氧化(DAO)ELISA試劑盒鎢鈉 99.995% metals basis延齡草苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%3-氨基-1,2,4-三唑

兒茶酚抑(CAT)ELISA試劑盒鎢鈉 ACS, 99.0-101.0%乙酰蒲公英萜 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥90%鈉十二

兒茶酚(CA)ELISA試劑盒鎢 99%鳶尾黃 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥97% 無氫二鈉(分子生物學(xué)級)

多藥耐藥相關(guān)蛋白(MRP)ELISA試劑盒氧化鉍 AR牡荊-2-O-鼠李糖苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%菲啰,菲洛

多形核白彈性蛋白(PMN Elastase)ELISA試劑盒氧化鉍 SP漢黃芩 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%乙鈉三(分子生物學(xué)級)

多效生長因子(PTN)ELISA試劑盒氧化鉍 99.9%葉黃 分析標(biāo)準(zhǔn)品,90%脫葉靈,噻隆

多萜長二寡糖蛋白環(huán)糊精糖基轉(zhuǎn)移(DDOST/OST-48)ELISA試劑盒氧化鉍 99.99% metals basis育亨賓 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%(AR)

多肽YY(Peptide-YY)ELISA試劑盒氧化鉍 99.999% metals basis4-叔丁基甲 99%乙脫氫


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