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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬生殖與呼吸綜合癥病毒通用RT-PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013515
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
Human dynamin 2,DNM2 ELISA Kit 人發(fā)動(dòng)蛋白2Multi-class antibodies： 48T
SP-B 肺表面活性蛋白B抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
Cyt-C ELISA Kit 大鼠 96T
NIT2 NIT2蛋白抗體 0.2ml
BACE2 β淀粉樣前體蛋白裂解2抗體 0.2ml
SP-B 肺表面活性蛋白B抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
OPG(Human Osteoprotegerin) ELISA KIT 人骨保護(hù)Multi-class antibodies： 48T
Mre11/HNGS1 DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Integrin Alpha V 整合αV抗體 0.2ml
HBcAb-IgM(Human hepatitis B virus core IgM) ELISA Kit 人抗乙型肝炎病毒核心IgM抗體 96T
PRPF4 PRPF4蛋白抗體 0.2ml
CEA 癌胚抗原抗體 0.1ml
Mre11/HNGS1 DNA損傷關(guān)鍵蛋白Mre11抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Mink IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
phospho-GABBR2 (Ser884) 磷化G基丁B型受體2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ARIP2B 激活受體2B抗體 0.2ml
IGFBP-2/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MK IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
PLGF/FITC 熒光標(biāo)記小鼠胎盤(pán)生長(zhǎng)因子抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
豬生殖與呼吸綜合癥病毒通用RT-PCR試劑盒外來(lái)毛霉種屬: Mucor│adventitius分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 192生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
淺灰鏈霉菌種屬: Streptomyces│griseolus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
蠟狀芽孢桿菌種屬: BacilluscereusFranklandandFrankland安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長(zhǎng)條件: 30℃
陰溝腸桿菌種屬: Enterobacter│cloacae分離基物: 野生稻莖提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法
非小肺癌相關(guān)抗原211(CA211)ELISA試劑盒D-別蘇氨 99%迷迭香 97%醋鋰，二(AR)
非小肺癌抗原(LTA)ELISA試劑盒D-酪氨 98%雷帕霉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%聚蔗糖400
非神經(jīng)元性烯化(NNE)ELISA試劑盒DL-色氨 99%雷帕霉 98%二硝基楊
非甲基化寡核苷(NON)ELISA試劑盒D-色氨 98%酯蟾配基 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%二鈉
芳香烴受體(AhR)ELISA試劑盒DL-酪氨 98%紅景天苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97.5%(HPLC)二氫鈉二
泛連接(E3/UBPL)ELISA試劑盒D-纈氨 98%柴胡皂苷A 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%二(AR)
泛結(jié)合(E2/UBCE)ELISA試劑盒D-纈氨乙酯鹽鹽 98%柴胡皂苷D 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%化錳四
泛激活(E1/UBAE)ELISA試劑盒DL-纈氨 98%菝葜皂苷元 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%烯葡聚糖凝膠S-100 HR
泛分解(DUB)ELISA試劑盒L-纈氨甲酯鹽鹽 99%斯皮諾 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥97%烯葡聚糖凝膠S-200 HR
泛蛋白D(UBD)ELISA試劑盒環(huán)羧 98%飛薊寧 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98% 烯葡聚糖凝膠S-300 HR
泛蛋白(Ub)ELISA試劑盒吡咯 99%飛薊亭 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98% 烯葡聚糖凝膠S-400 HR
反狀腺原氨(rT3)ELISA試劑盒1-四氫萘酮 97%西羅莫司 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%烯葡聚糖凝膠S-500 HR
法尼基二法尼基轉(zhuǎn)移1(FDFT1)ELISA試劑盒鎢銨 99.99% (metals basis)茵芋苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%干酪
法尼X受體(FXR)ELISA試劑盒鎢銨 AR,99%知母皂苷元 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98% 化鋅
發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)ELISA試劑盒仲鎢銨 99.95 %千金藤啶 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%醫(yī)用凡士林
二?；视?/span>(DAG/DG)ELISA試劑盒鉬銨，四 AR五味子 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%原釩鈉
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