詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉移至標本準備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腺病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013564
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準備 1. DNA模板 2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human Calreticulin,CRT ELISA Kit 人鈣網(wǎng)蛋白Multi-class antibodies: 48T
SM-MHC 心肌肌凝蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/PE-Cy7 PE-Cy7標記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
HO-1(Mouse heme oxygenase 1) ELISA Kit 小鼠血紅氧合1
NT5C1A 胞質5'核苷1A抗體 0.2ml
beta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)單克隆抗體 0.1ml
SM-MHC 心肌肌凝蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
MAO(Human monoamine oxidase) ELISA Kit 人單胺氧化Multi-class antibodies: 48T
P95/NBS1 DNA修復蛋白NBS1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-6 白介6抗體 0.1ml
MMP-2/Gelatinase A ELISA Kit 大鼠基質金屬蛋白2/明膠A 96T
PROK1/PRK1/EG-VEGF 腺衍生血管內皮生長因子抗體 0.1ml
CACH2 L型鈣通道蛋白抗體 0.1ml
P95/NBS1 DNA修復蛋白NBS1抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLEPP1 腎小球上皮蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB4 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體 0.2ml
HSP-90 Beta/FITC 熒光標記HSP-90β蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
PKA/FITC 熒光標記蛋白激A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
腺病毒通用染料法熒光定量PCR試劑盒50次Sphingomonasyantingensis種屬: Sphingomonasyantingensis分離基物: 紫色土安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 102生長條件: 30℃
米根霉種屬: RhizopusoryzaeWentetPrinsen-Geerligs安全等級: 1模式菌株: no應用領域: 產(chǎn)乳和糖化培養(yǎng)基: 17,77生長條件: 28-30℃
羅氏耶爾森氏菌種屬: Yersinia│rohdei提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 28℃存儲條件: -80℃冰箱凍結法
北京諾卡氏菌種屬: Nocardia│beijingensis提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0234生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結法;真空冷凍干燥法
E3泛蛋白連接TRIM68(TRIM68)ELISA試劑盒AR,99.5%反,反-2,4-庚二烯 90%加拿大香脂
D-乳脫氫(D-LDH)ELISA試劑盒CP,99.5%三硫酮 ≥99%, FG正己(>98%,BR)
D二聚體(D2D)ELISA試劑盒GR,99.8%4-羥基-3-甲氧基甲 98%己內酰(>98%,BR)
DNA損傷誘導轉錄因子4樣蛋白(DDIT4/RTP801)ELISA試劑盒PT,99.8%六酮 99%羧肽 Y >50 U /mg
DNA甲基轉移3A(DNMT3A)ELISA試劑盒光譜級2-異基-4-甲基噻唑 98%蓖麻油
DNA甲基轉移1(DNMT1)ELISA試劑盒用于和昆蟲培養(yǎng),≥99.5% (T)3-甲基-1-丁硫 97%1,1-環(huán)己基二乙
DnaJ同源亞科B成員1(DNAJB1/DNAJ1/HDJ1/HSPF1)ELISA試劑盒for HPLC, ≥99.5% (AT)甜瓜 80%反式-1,2-環(huán)己二四乙(>98%,BR)
Dickkopf相關蛋白1(DKK1)ELISA試劑盒用于植物培養(yǎng), ≥99.5%2-甲基庚 98%乙纖維
Dickkopf 3(DKK3)ELISA試劑盒USP香草甲酯 99%乙鈰(>99%,BR)
Dickkopf 1(DKK1)ELISA試劑盒≥99.999% (metals basis)4-甲硫基-4-甲基-2-戊酮 99%硫鈰四(>99%,BR)
DAB2互作蛋白(DAB2IP)ELISA試劑盒農(nóng)殘級, ≥99.5%4-甲基-4-巰基-2-戊酮 98%碳銫(>99%,BR)
C型凝集結構域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒用于分子生物學, ≥99.5% (AT)3-甲硫基-1-己 99%滂天藍(~50%,BS)
C型鈉尿肽(CNP)ELISA試劑盒99.99% metals basis3-巰基-1-己 98%銨-T三(>98%,BR)
C肽(C-Peptide)ELISA試劑盒化 GR,99.8%3-甲基-2--1-硫 98%卡拉唑黑E(>70%,BS)
C反應蛋白(CRP)ELISA試劑盒化 AR,99.5%2-甲基-3-呋喃硫 95%金三
C多肽(CP)ELISA試劑盒化 CP,99.5%2-甲基四-3-硫 97%鉑六