特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
Human Centromere Protein,CENP-B ELISA Kit 人著絲粒蛋白BMulti-class antibodies: 48T
SP-D 肺表面活性蛋白D抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/Cy5 Cy5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
Cyclin-D2(Mouse Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠細(xì)胞周期D2 96T
NADPH 還原型Ⅱ/磷酰胺腺二核苷抗體 0.1ml
BDNF 腦源神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子抗體 0.1ml
SP-D 肺表面活性蛋白D抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Beta-Nph(Human Beta-naphthol) ELISA Kit 人β萘酚Multi-class antibodies: 48T
PG-C 胃蛋白原C抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Histone H3 (Di Methyl K36) 二甲基化組蛋白H3抗體 0.1ml
LFA-3/CD58 ELISA Kit 大鼠細(xì)胞功能相關(guān)抗原3 96T
PRPS1L1 蛋白體復(fù)合物C5抗體 0.1ml
C7orf69 7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框69抗體 0.2ml
PG-C 胃蛋白原C抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit Mink IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
GAB4 生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)蛋白4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ARHI 抑癌基因ras同源家族1抗體 0.2ml
IGFBP-4/IBP4/FITC 熒光標(biāo)記胰島樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MK IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
PMP-22/FITC 熒光標(biāo)記外周髓鞘蛋白-22IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
曲霉屬通用探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒50次馬紅球菌種屬: Rhodococcus equi提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究;分析檢測(cè)。研究、質(zhì)量控制,《GB 4789.30-2010單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》陰性對(duì)照菌株。培養(yǎng)基: 腦心瓊脂 :心提取物 5.0g,腦提取物 12.5g,月示 胨10.0g,葡萄糖 2.0g,NaCl 5.0g,Na2HPO4 2.5g,瓊脂15.0g,蒸餾1.0L,pH7.4。生長(zhǎng)條件: 37℃,兼性厭氧。生長(zhǎng)特性: G+球菌,接觸陽(yáng)性,尿陽(yáng)性,無(wú)動(dòng)力,生化反應(yīng)不活潑,不發(fā)酵任何糖類和醇類。兼性厭氧。存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;2-8℃,真空冷凍干燥法
丁香直絲鏈霉菌種屬: Streptomyces│lilacinorectus提供形式: 斜面培養(yǎng)物;凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 篩選培養(yǎng)基: 12生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 1b I 4,6...培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
溜曲霉種屬: Aspergillus│tamarii提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0089生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
復(fù)制蛋白A(RPA-70)ELISA試劑盒D-半胱氨鹽鹽一物 98%異佛手柑內(nèi)酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%6-糠基氨基,激動(dòng)
復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA試劑盒DL-半胱氨 97%異古倫賓 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%乙二雙(2-氨基乙基)四乙
附睪蛋白4(HE4)ELISA試劑盒D-谷氨 98%異葒草 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% 無(wú)二氫鈉(分子生物學(xué)級(jí))
輔Q10(CoQ10)ELISA試劑盒L-高精氨鹽鹽 98%異麥角甾苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%月桂?;“扁c(分子生物學(xué)級(jí))
封閉抗體(BA)ELISA試劑盒L-高絲氨 98%異鼠李-3-O-新橙皮糖苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%硫鎳六
封閉蛋白4(CLDN4)ELISA試劑盒D-組氨 99%異飛薊賓 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%乙銨(分子生物學(xué)級(jí))
分泌性白蛋白抑制因子(SLPI)ELISA試劑盒L-高氨 98%棗仁皂苷 A 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%微晶纖維(100 um)
分泌型球蛋白A(SIgA)ELISA試劑盒DL-組氨鹽鹽 BR棗仁皂苷 B 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%乳糖;α-乳糖,一
分泌型脂A2(sPLA2)ELISA試劑盒DL-高氨 98%鹽藥根 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%化鈣二
分泌型卷曲相關(guān)蛋白5(SFRP5)ELISA試劑盒DL-異亮氨 98%醉椒 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99%乙二
分泌型卷曲相關(guān)蛋白4(SFRP4)ELISA試劑盒D-異亮氨 98%石松靈 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%硫鎂七(分子生物學(xué)級(jí))
分泌型卷曲相關(guān)蛋白2(SFRP2)ELISA試劑盒D-別異亮氨 98%蓮心 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%糖化;葡萄糖淀粉
分泌型卷曲相關(guān)蛋白1(SFRP1)ELISA試劑盒DL-亮氨 98%羽扇豆 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%乙酰
分泌粒蛋白1(嗜鉻粒蛋白B)(CHGB/SCG1)ELISA試劑盒L-叔亮氨 99%石蒜裂 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98% 聚乙二4000
分泌成分(SC)ELISA試劑盒DL-賴氨 99%羥基積雪草苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,98%無(wú)氫二
肺炎支原體抗體(MP-Ab)ELISA試劑盒D-亮氨 99%羥基積雪草苷 98%甲酰