詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號:FS-P013565
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作,各區(qū)實驗服、儀器、耗材應(yīng)獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標(biāo)記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human omentin ELISA Kit 人網(wǎng)膜Multi-class antibodies: 48T
SMHC/Myosin 平滑肌肌球蛋白重鏈抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgM/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgM 0.1ml
Methylase ELISA Kit 大鼠甲基化 96T
NME6 P53誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制蛋白α抗體 0.2ml
beta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)抗體 0.1ml
SMHC/Myosin 平滑肌肌球蛋白重鏈抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
HBsAg(Human hepatitis B virus surface antigen) ELISA Kit 人乙型肝炎表面抗原Multi-class antibodies: 48T
IL-1RA 白介-1受體拮抗劑抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LHR/CGR 促黃體生成受體抗體 0.1ml
HGH(Human growth hormone) ELISA KIT 人生長 96T
Proinsulin 胰島原抗體 0.1ml
C11orf53 11號染色體開放閱讀框53抗體 0.2ml
IL-1RA 白介-1受體拮抗劑抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Donkey Goat IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLI4 轉(zhuǎn)錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASB5 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族5抗體 0.2ml
HSP-90 Alpha/FITC 熒光標(biāo)記熱休克蛋白90α抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
PIWIL1/FITC 熒光標(biāo)記piwi樣1蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
腺病毒B型探針法熒光定量PCR試劑盒50次O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae O1提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: O1/eltor 小川(Ogawa)培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
斯氏分枝桿菌種屬: Mycobacterium│szulgai提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 國際標(biāo)準(zhǔn)菌種,供菌型檢定用培養(yǎng)基: CM0125生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
橢圓釀酒酵母種屬: SaccharomycescervisiaeHansenvar.ellipsoideus(Hansen)Dekker安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 葡萄酒用菌培養(yǎng)基: 13生長條件: 25-28℃
萊氏曼氏乳桿菌種屬: Lactobacillus leichmannii提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于維生B12鈷胺,鈷胺測定法,食品檢測,制藥和個人護理培養(yǎng)基: MRS培養(yǎng)基:酪胨 10.0g,牛肉粉 8.0g,酵母粉 4.0 g,葡萄糖 20.0 g,硫鎂 0.2 g,乙鈉 5.0 g,檸檬三銨 2.0 g,氫二鉀 2.0 g,硫錳 0.05 g,吐溫80 1.0 g,蒸餾 1000mL。pH6.2±0.2。121℃,15min。生長條件: 37℃,微好氧或厭氧
CXC趨化因子受體7(CXCR7)ELISA試劑盒化 PT3-甲硫基丁 96%乙膽固酯(>96%,BR)
CXC趨化因子受體4(CXCR4)ELISA試劑盒化 SP2-甲基-3-甲硫基呋喃 98%硬脂膽固酯(>98%,BR)
CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒化 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.98%2-甲基四-3-酮 98%重(>98%,BR)
CXC趨化因子受體1(CXCR1)ELISA試劑盒化 分析標(biāo)準(zhǔn)品,K(99.97%)/Cl(100.00%)5-甲基糠 98%鉻粒(>99%,BR)
CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒化 ≥99.99% metals basis3-巰基-2-丁酮 98%鉻粉(>99%,BR)
CX3C趨化因子受體1(CX3CR1)ELISA試劑盒化 分子生物學(xué), ≥99.5%2-巰基-3-丁,異構(gòu)體混合物 ≥97%, FG化鉻六(>98%,BR)
COP9結(jié)構(gòu)光形態(tài)發(fā)生同源物亞基2(擬南芥)(COPS2)ELISA試劑盒化 培養(yǎng), ≥99.5%3-甲硫基 99%硫鉻十二
c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA試劑盒化 ≥99.995% metals basis3-巰基-2-戊酮 95%硫鉻(>98%,BR)
c-Jun氨基末端激/應(yīng)急激活的蛋白(JNK/SAPK)ELISA試劑盒化溶液 3.3mol/L(3.3N)甲基(2-甲基-3-呋喃基)二硫 ≥98%, FG三氧化鉻(>99%,BR)
CDCP1(CDCP1)ELISA試劑盒化溶液 3mol/L(3N)2-甲基四氫噻吩-3-酮 97%性紅B
CD8分子(CD8)ELISA試劑盒5-乙?;绶?2- 98%3-甲硫基己乙酯 97%直接黃12
CD82分子(CD82)ELISA試劑盒4-氨基鹽鹽 97%丁甲硫酯 98%肉桂酰(>98%,BR)
CD73分子(CD73)ELISA試劑盒鄰氨基鹽鹽 95% 麥芽酚脂 98%
CD6分子(CD6)ELISA試劑盒4-氨基頻哪酯 98%2-甲基-4-基-1,3-氧硫雜環(huán)己 98%檸檬(>95%,Pract Grade)
CD68分子(CD68)ELISA試劑盒2-氨基頻哪酯,97%4-甲基辛 98%檸(>98%,BR)
CD63分子(CD63)ELISA試劑盒6-溴吡啶-3- 97%糠甲酯 99%2--4--a-L-巖糖苷(>98%,BR)