化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：非洲豬瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013483
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
RSK3/Ribosomal S6 kinase 3/FITC 熒光標(biāo)記核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
SRG11/Spata17/FITC 熒光標(biāo)記凋亡基因抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh AGPB/Alpha 1 acid glycoprotein 2 α1性糖蛋白2抗體(類粘蛋白2) 0.2ml
Rabbit Guinea pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
glypican 3 磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Goat IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗羊IgG 0.3ml
SRG11/Spata17/FITC 熒光標(biāo)記凋亡基因抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
CTX(Human cytotoxin) ELISA Kit 人細(xì)胞Multi-class antibodies： 48T
Phospho-PLC beta3 (Ser537) 磷化磷酯Cβ3抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HIG1/HIGD1A 缺氧誘導(dǎo)基因1蛋白抗體 0.2ml
AT II R1(Human angiotension II receptor 1 Antibody) ELISA Kit 人血管緊張Ⅱ受體1抗體 96T
PSF2 PSF2蛋白抗體 0.2ml
C7orf65 7號(hào)染色體開放閱讀框65抗體 0.2ml
Phospho-PLC beta3 (Ser537) 磷化磷酯Cβ3抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit MG IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.3ml
GRO gamma/CXCL3 生長調(diào)節(jié)致癌基因gamma(GROγ)抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh APR3/C2orf28 凋亡相關(guān)蛋白3抗體 0.2ml
phospho-IKK gamma (Ser85) /FITC 熒光標(biāo)記磷化核因子κB激gamma抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit MG IgG/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗長爪沙鼠IgG 0.3ml
Phospho-Rb (Ser780)/FITC 熒光標(biāo)記磷化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
非洲豬瘟病毒探針法熒光定量PCR試劑盒50次菲律賓鏈霉菌種屬: StreptomycesfilipinensisAmmannetal.安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株，產(chǎn)菲律賓菌。培養(yǎng)基: 38生長條件: 26℃
東方諾卡氏菌種屬: Nocardia│orientalis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 573生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
嗜松青霉種屬: Penicillium pinophilum提供形式: 凍干粉安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25℃
稻腸桿菌種屬: Enterobacter│Oryzae分離基物: 廣州刺竹根提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0003生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法
軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒鈦鐵試劑 95% >99.0%(GC)鹽決奈達(dá)隆
軍團(tuán)菌抗體IgM(LP Ab-IgM)ELISA試劑盒甲藍(lán)O Biological stain AR決奈達(dá)隆(標(biāo)準(zhǔn)品)
軍團(tuán)菌抗體IgG(LP Ab-IgG)ELISA試劑盒達(dá)旦黃 CP Standard for GC雷諾
軍團(tuán)菌抗體IgA(LP Ab-IgA)ELISA試劑盒百里香酚酞絡(luò)合劑 Indicator,1G/L4-乙酰 98%雷諾(標(biāo)準(zhǔn)品)
卷曲蛋白8(FZD8)ELISA試劑盒維多利亞藍(lán)B Biological stain3-乙?；?98%樂卡地平鹽鹽
聚集蛋白(Agrin)ELISA試劑盒鋅試劑 ≥85%（HPLC）4-乙?；?97%樂卡地平鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
巨噬移動(dòng)因子(MIF)ELISA試劑盒二乙基二硫代氨鋅 98%5-乙?；绶?2- 98%鹽異
巨噬移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒鉑 六合物 AR,Pt ≥37.5%3-甲酰氨 95%阿戈美拉?。↖I型）
巨噬炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒金 48～50% Au basis3-氨基鹽鹽 98%阿戈美拉?。↖型）
巨噬炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒銥 Ir 35% in HCl4-氨酰 98%吡
巨噬炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA試劑盒三化銥 試劑級(jí),Ir>52%2-氨基-5-硝基-6-甲基吡啶 98%雷美替
巨噬炎性蛋白2(MIP-2)ELISA試劑盒化鈀 Pd 59-60%2-氨基-3-硝基-6-甲基吡啶 98%拉科酰
巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒硝鈀(II) 合物 Pd ≥39.0%4-聯(lián) 98%米那普侖鹽鹽
巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA試劑盒鈀粉 99.9% metals basis，粒徑0.5μm正丁基 98%米那普侖鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
巨噬替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒亞鈀 Pd ≥32.6% 2,3-二氟溴 98%丁那
巨噬趨化因子(MCF)ELISA試劑盒硝銠溶液 10 % 溶液2,4-二氟溴 98%丁那(標(biāo)準(zhǔn)品)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
化工儀器網(wǎng)