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肺炎克雷伯菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次

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更新時(shí)間:2022-04-14 14:02:46瀏覽次數(shù):226

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號(hào) FS-P013566 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
肺炎克雷伯菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次的銷售產(chǎn)品:三叉奧斯特線蟲(chóng)PCR試劑盒植物細(xì)胞周期S期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒
根霉屬植物細(xì)胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體植物細(xì)胞周期G2期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞;Caki-2植物細(xì)胞周期M期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒

詳細(xì)介紹

參數(shù)規(guī)格:

產(chǎn)品名稱:肺炎克雷伯菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次

產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013566

產(chǎn)品規(guī)格:50次

產(chǎn)品分類:純化試劑盒

產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
9.jpg

 

實(shí)驗(yàn)過(guò)程:

一、試劑準(zhǔn)備

1. DNA模板

2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)

3.10×PCR Buffer

4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM

5.Taq酶

二、操作步驟

1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。

10×PCR buffer             5μl

dNTP mixl                 4μl

引物1(10pM)               2μl

引物2(10PM)              2μl

Taq酶(2U/μl)            1μl

DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl

加ddH2O至               50 μl

視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。

2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。

3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。

4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。

 

注意事項(xiàng)

1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。

3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。

4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。

5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。

6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。

7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。

8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。

9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。

Kv3.3/Kcnc3/FITC 熒光標(biāo)記離子通道蛋白Kv3.3抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 SMC1/FITC 熒光標(biāo)記染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh albumin/AFM 人血清白蛋白抗體  0.2ml

Rabbit  human IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗人IgG 0.5ml

GPR101 G蛋白偶聯(lián)受體101抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  Guinea pig IgG/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG  0.1ml

 SMC1/FITC 熒光標(biāo)記染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

AP13(Human apelin 13) ELISA Kit 人apelin 13Multi-class antibodies: 48T

 P53(wt-p53) 抑制基因抗體(野生型P53)Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh HSP90 α 熱休克蛋白90α抗體  0.2ml

IgA ELISA Kit 大鼠球蛋白A 96T

Proinsulin 胰島原抗體 0.1ml

CNKSR1 Ras激抑制因子連接增強(qiáng)蛋白1抗體 0.2ml

 P53(wt-p53) 抑制基因抗體(野生型P53)Multi-class antibodies: 0.1ml

Donkey  Goat IgG/PE PE標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml

Gliadin 蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh ASB7 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號(hào)抑制物盒蛋白家族7抗體  0.2ml

 HSP-90 Alpha/FITC 熒光標(biāo)記HSP-90α蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  mouse IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗小鼠IgG  0.1ml

 SIAH2/FITC 熒光標(biāo)記泛連接Siah2抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
肺炎克雷伯菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次焦土鏈霉菌種屬: Streptomyces│showdoensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain. Produces actinomycin, macrolide antib培養(yǎng)基: 0038生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

嗜熱一氧化碳鏈霉菌種屬: Streptomyces│thermocarboxydus分離基物: 私用園地土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 分類學(xué)研究、質(zhì)量控制培養(yǎng)基: CM0075生長(zhǎng)條件: 45℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

塔賓曲霉種屬: Aspergillus│tubingensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 以淀粉為原料檸檬。培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

CD5分子樣蛋白(CD5L)ELISA試劑盒4-(Boc-氨基) 97%2-甲基丁硫 95%六硫鈷銨(>98%,BR)

CD5分子(CD5)ELISA試劑盒鈹標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml2-甲基-2-噻唑啉 97%草鈷(>99%,BR)

CD4分子(CD4)ELISA試劑盒2-溴-3-甲基吡啶-5- 95%4-甲基噻唑 99%萘鈷

CD45分子(CD45)ELISA試劑盒2-溴吡啶-5-頻哪酯 98%甲基基二硫 97%刀豆A(> 95%,BR)

CD44分子(CD44)ELISA試劑盒并呋喃-2- 98%烯基二硫 95%溴化亞銅(>98%,BR)

CD44變體6(CD44-v6)ELISA試劑盒2-氟-5-溴吡啶-3- 98% 2-吡基乙硫 98%無(wú)乙銅(>99%,BR)

CD40配體(CD40L)ELISA試劑盒N-Boc-5-溴吲哚-2- 95%3-甲基-2-丁硫 98%溴化銅(>99%,BR)

CD3分子(CD3)ELISA試劑盒5-基-2-氟 97%烯基基三硫 50%檸檬銅(>98.5%,BR)

CD34分子(CD34)ELISA試劑盒4-羧基 97%2-甲基-3-呋喃硫乙酯 80%氫氧化銅(>96.5%,Tech Grade)

CD30分子(CD30)ELISA試劑盒5--2-甲氧基 97%3-甲基-2-環(huán)己 98%草銅(>97%,Tech Grade)

CD22分子(CD22)ELISA試劑盒6-吡啶-3- 97%3-甲基-2-環(huán)戊烯-1-酮 97%無(wú)硫銅(>99%,BR)

CD209分子(CD209)ELISA試劑盒2-吡啶-3- 97%5H-5-甲基-6,7-二氫環(huán)戊基吡 98%肌酐;肌酐

CD19分子(CD19)ELISA試劑盒5--2-氟吡啶 99%反,反-2,4-壬二烯 >85.0%(GC)甲酚紫乙鹽(>70%,BS)

CD15分子(CD15)ELISA試劑盒3-羧基頻哪酯 97%1-辛烯-3- 98%性猩紅7B(>70%,BS)

CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒4-羧基頻哪酯 97%2-戊基呋喃 ≥98%, FG性紅44(BS)

CD147分子(CD147)ELISA試劑盒2-甲氧基-3-吡啶-4- 95% (2-甲基-3-呋喃基)二硫 97%環(huán)胞甙鹽鹽;鹽環(huán)胞苷;安西他濱鹽鹽

操作流程:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

 


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