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詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A：1×10ml。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013370 |
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對(duì)照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對(duì)照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對(duì)照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭，在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭，在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對(duì)照到5號(hào)管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取， 多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽性對(duì)照）， 一個(gè)是NC（樣品制備陰性對(duì)照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對(duì)照的第4號(hào)（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號(hào)（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行） 10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照，6個(gè)用于PCR陽性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對(duì)照，并且陽性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加）
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè)：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè)：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè)：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
LTB4-R2/FITC 熒光標(biāo)記白三烯B4受體2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TANK/FITC 熒光標(biāo)記TANK抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADCY4 腺苷環(huán)化4抗體 0.2ml
Rabbit dog IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
Ghrelin Receptor 腦腸肽受體抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit chicken IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgG 0.1ml
TANK/FITC 熒光標(biāo)記TANK抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
TRAIL-R1(Human tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 1) ELISA Kit 人壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1Multi-class antibodies： 48T
TNFRSF18 糖皮質(zhì)誘導(dǎo)壞死因子受體抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
MLC(Human Myosin light Chain) ELISA Kit 人肌球蛋白輕鏈 96T
RAD50 DNA修復(fù)蛋白R(shí)ad50抗體 0.2ml
phospho-CREB-1(Ser121) 磷化CREB-1抗體 0.1ml
TNFRSF18 糖皮質(zhì)誘導(dǎo)壞死因子受體抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit MK IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗猴IgM 0.1ml
D4 GDI 轉(zhuǎn)移抑制基因GDIA2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKRD13B 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13B抗體 0.2ml
IQGAP1/FITC 熒光標(biāo)記支架蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
SARS putative orflab polyprotein/FITC 熒光標(biāo)記SARS抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
小鼠線粒體DNA通用PCR試劑盒人Smad同源物1 （Smad1/MADH1）elisa檢測(cè)試劑盒
人β葡糖苷（β-Glu）elisa檢測(cè)試劑盒
人Smad同源物7 （Smad7/MADH7）elisa檢測(cè)試劑盒
人α肌動(dòng)蛋白（α Actin）elisa檢測(cè)試劑盒
人β2糖蛋白1抗體IgG（β2-GP1 Ab IgG）elisa檢測(cè)試劑盒
人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4（NRG-4）elisa檢測(cè)試劑盒
人α葡萄糖苷（α-Glu）elisa檢測(cè)試劑盒
人II型前膠原羧基端原肽（PIICP）elisa檢測(cè)試劑盒
人T受體（TCR）elisa檢測(cè)試劑盒
人磷脂酰肌醇特異性磷脂Cγ2（PLCγ2）elisa檢測(cè)試劑盒
人Pdgfa相關(guān)蛋白（PDAP1）elisa檢測(cè)試劑盒
人突觸核蛋白α（SNCα）elisa檢測(cè)試劑盒
人血小板衍生生長(zhǎng)因子受體β（PDGFRβ）elisa檢測(cè)試劑盒
人L選擇（SELL）elisa檢測(cè)試劑盒
人Rap鳥交換因子1（RAPGEF1）elisa檢測(cè)試劑盒
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
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