詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:白斑綜合癥病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013414
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
Ephrin B (phospho Tyr324/329) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化Ephrin B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
sVEGFR2/sFLK-1/FITC 熒光標(biāo)記可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體(人)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
膜粘連蛋白-5抗體 Annexin V 0.1ml
Mouse human IgG/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml
GALM 半乳糖脫氫抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PRMT4 組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移CARM1抗體 0.2ml
sVEGFR2/sFLK-1/FITC 熒光標(biāo)記可溶性血管內(nèi)皮生長因子受體2抗體(人)IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
TGF- Beta1(Human Transforming Growth factor Beta1) ELISA kit 人轉(zhuǎn)化生長因子β1Multi-class antibodies: 48T
GLP-1/KG-31 GLP-1單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Goat IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 0.1ml
HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit 人熱休克蛋白27 96T
RAB10 G蛋白結(jié)合蛋白R(shí)AB10抗體 0.2ml
Cyclin E2 周期E2抗體 0.2ml
GLP-1/KG-31 GLP-1單克隆抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit mouse Kappa light chain/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GCDFP15 特異性囊腫病液體蛋白15 0.2ml
Rhesus antibody Rh Anthrax 抗體(采用活疫苗制備) 0.2ml
IL-20/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞介-20抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
RCC1/FITC 熒光標(biāo)記染色體濃縮調(diào)控蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
白斑綜合癥病毒染料法熒光定量PCR試劑盒釀酒酵母種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 經(jīng)CICC 1303高溫選育而來,釀造酒精。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
諾卡氏菌種屬: Nocardia│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0038生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
唐菖蒲伯克霍爾德氏菌種屬: Burkholderia│gladioli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蔬菜芽孢桿菌種屬: Bacillus│oleronius提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
烯化(NSE)ELISA試劑盒特布他林半硫鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品(3H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶-3-氧基)三-1-吡咯基六氟鹽 潑尼松(標(biāo)準(zhǔn)品)
硒結(jié)合蛋白1(SELENBP1)ELISA試劑盒氧化鈦(IV) 99%,325 目,粉末N-(4-氨丁基)-N-乙基異魯米諾 97%強(qiáng)力霉/強(qiáng)力霉一合物
硒蛋白S(SELS)ELISA試劑盒氧化鈦(IV),銳鈦礦 99.9% metals basis,粉末7-氮雜并三唑-1-基氧基三(二基)膦六氟鹽 98%唑來
硒蛋白P(SEPP1)ELISA試劑盒2,3,4,6-四酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-(7-氮雜并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲四氟鹽 98%唑來(標(biāo)準(zhǔn)品)
硒蛋白1(SEP1)ELISA試劑盒叔丁基亞磺酰 97%1-Boc-哌 98%帕米二鈉
戊糖(Pentosidine)ELISA試劑盒二甲基烯四乙二酯 包含~0.006% 對(duì)二酚 穩(wěn)定劑, 90%叔丁基二甲基硅溶液 50%甲溶液帕米二鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
舞蹈病蛋白相互作用蛋白1(HIP1)ELISA試劑盒硫鏈絲菌肽 90%卡特縮合劑 98% 硫慶大霉
五聚3(PTX3)ELISA試劑盒三基硅乙炔 98%2-溴-1-乙基吡啶四氟鹽 98%硫慶大霉(標(biāo)準(zhǔn)品)
無花果2(FCN2)ELISA試劑盒四(THF) 無級(jí),≥99.9%, 無穩(wěn)定劑雙(2-氧代-3-惡唑基)酰 97%頭孢呋辛鈉
烏頭2(ACO-2)ELISA試劑盒三乙烯四 Standard for GC(并三唑-1-基)-N,N,N',N'-二吡咯基脲六氟酯 98%頭孢呋辛鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
蝸牛同源物2(SNAI2)ELISA試劑盒原甲酯 99.8%,無級(jí)三吡咯基溴化鏻六氟鹽 98%頭孢曲松鈉
蝸牛同源物1(果蠅)樣1蛋白(SNAIL1)ELISA試劑盒鹽硫 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-溴-1,3,5-三異基 96.0 %頭孢曲松鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
胃粘液(GM)ELISA試劑盒2,3,5-三酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品6-并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六氟酯 98% 頭孢他啶(含碳鈉)
胃粘膜相關(guān)樣組織瘤抗體(MALT Lymphoma Ab)ELISA試劑盒1,1,1-三(羥甲基)乙 97%2--1,3-二甲基咪唑鎓四氟鹽 98%頭孢唑啉鈉
胃抑(GIP)ELISA試劑盒三氟磺酰 99%6--1-羥基并三氮唑 98%頭孢唑啉鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)
胃內(nèi)因子(GIF)ELISA試劑盒十三 97%1-(-1-吡咯基亞甲基)吡咯六氟鹽 98%氟替卡松
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。