詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):桃拉綜合癥病毒染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013416
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類(lèi):純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
Ephrin B (phospho Tyr298) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化Ephrin B抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
SV2A/FITC 熒光標(biāo)記突觸泡蛋白2A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
膜粘連蛋白-2抗體 Annexin II 0.2ml
Mouse human IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml
GALNS 軟骨裂解抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh PRMT5 組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移5抗體 0.2ml
SV2A/FITC 熒光標(biāo)記突觸泡蛋白2A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
CT(Human Chlamydia trachomatis) ELISA Kit 人沙眼衣原體Multi-class antibodies: 48T
Phospho-IRAK1 (Ser376) 磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh LIFR/CD118 白血病抑制因子受體抗體 0.1ml
HIV(Human immunodeficiency virus antibody) ELISA Kit 人抗人類(lèi)缺陷病毒抗體 96T
QRFP 神經(jīng)肽QRFP抗體 0.2ml
C12ORF24 12號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體 0.2ml
Phospho-IRAK1 (Ser376) 磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rabbit mouse Kappa light chain/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GPR115 G蛋白偶聯(lián)受體115抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANTXR2 炭疽受體2抗體 0.2ml
IL-20R Alpha/IL20RA/FITC 熒光標(biāo)記白介20受體α鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
Phospho-RasGRF1 (Ser916)/FITC 熒光標(biāo)記磷化Ras特異性鳥(niǎo)核苷釋放因子1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
桃拉綜合癥病毒染料法熒光定量PCR試劑盒O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae O1提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: O1/eltor 稻葉(Inaba)培養(yǎng)基: CM0116生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
釀膿鏈球菌種屬: Streptococcus│pyogenes分離基物: Scarlet fever提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 221生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
羊布氏菌種屬: Brucella│melitensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 獸用死菌苗,強(qiáng)毒株培養(yǎng)基: CM0112生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
卷枝毛霉lusitanicus變型種屬: Mucor│circinelloides f. lusitanicus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: Type strain of M. jauchae培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
維生K1(VK1)ELISA試劑盒1,2,3- 91%3,5-二叔丁基溴 99%鹽克林霉
維生H(VH)ELISA試劑盒1,2,3- 分析標(biāo)準(zhǔn)品O-[(乙氧基羰基)]-N,N,N',N'-四甲基硫尿四氟鹽 98%鹽克林霉(標(biāo)準(zhǔn)品)
維生E(VE)ELISA試劑盒(+)-δ-酚 90%1-乙基-(3-二甲基氨基基)碳二亞鹽鹽 98.5% 鹽維拉帕米
維生D受體(VD R)ELISA試劑盒(+)-δ-酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品2-乙氧基-1-乙氧碳?;?1,2-二氫喹啉 99%鹽維拉帕米(標(biāo)準(zhǔn)品)
維生D結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒3-巰基-1,2- Matrix for FAB-MS and liquid SIMS, ≥98.5%2-氟-1,3-二甲基化咪唑翁六氟酯 97%霉酚; 麥考酚;MPA
維生D3(VD3)ELISA試劑盒三酯 99%乙甲脒 99%霉酚; 麥考酚(標(biāo)準(zhǔn)品)
維生D2(VD2)ELISA試劑盒甲基托布津 分析標(biāo)準(zhǔn)品四甲基氟代脲六氟酯 98%阿莫西林/羥氨芐青霉
維生D(VD)ELISA試劑盒碲 98%9-芴甲基-N-琥珀酰亞基碳酯 98%阿莫西林(標(biāo)準(zhǔn)品)
維生C(VC)ELISA試劑盒硫代嗎啉 98%芴甲氧羰酰 98%非諾貝特
維生B6(VB6)ELISA試劑盒綠草定 分析標(biāo)準(zhǔn)品芴甲氧羰酰 99%非諾貝特(標(biāo)準(zhǔn)品)
維生B3(VB3)ELISA試劑盒2-乙酰檸檬三乙酯 99%4-(羥基)氧基乙 98%磺舒
維生B2(VB2)ELISA試劑盒三(硅基)硅 90%并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟酯 99%磺舒(標(biāo)準(zhǔn)品)
維生B12(VB12)ELISA試劑盒溴化 99%1-羥基-并-三氮唑(無(wú)) 99%諾氟沙星
維生B1(VB1)ELISA試劑盒 99.99%(劇品)3-羥基-1,2,3-并三-4(3H)-酮 98%諾氟沙星(標(biāo)準(zhǔn)品)
維生A(VA)ELISA試劑盒質(zhì)標(biāo)樣 分析標(biāo)準(zhǔn)品(劇品)2-(7-偶氮并三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟酯 99%諾氟沙星鹽鹽
微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒(+)-γ-維生E 96%1-羥基-7-偶氮并三氮唑 99%諾氟沙星鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。