特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加) |
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
κOR/FITC 熒光標(biāo)記kappa型受體抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Smad4/FITC 熒光標(biāo)記Smad4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALDH16A1 乙脫氫16家庭A1抗體 0.2ml
Rabbit human IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
GPI 糖磷脂酰肌醇抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Smad4/FITC 熒光標(biāo)記Smad4抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
HAase(Human Hyaluronidase) ELISA Kit 人透明質(zhì)Multi-class antibodies: 48T
NF-M 中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh IL-17RB 白介-17B受體抗體 0.1ml
IL-5 ELISA Kit 大鼠白介5 96T
Profilin 1 前纖維蛋白1抗體 0.1ml
Collagen III Ⅲ型膠原蛋白/膠原蛋白3/3型膠原蛋白抗體 0.1ml
NF-M 中分子量神經(jīng)絲蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Donkey Goat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml
GLT6D1 糖基轉(zhuǎn)移6結(jié)構(gòu)1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASGPR1/ASGR1 唾液糖蛋白受體1抗體 0.1ml
HSP-27/FITC 熒光標(biāo)記HSP-27蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
Pin1/FITC 熒光標(biāo)記肽基脯氨酞順?lè)串悩?gòu)Pinl抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
指環(huán)蟲(chóng)屬通用PCR試劑盒50次粟酒裂殖酵母種屬: Schizosaccharomyces│pombe提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
黑色小單孢菌種屬: Micromonospora│nigra提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
粘液鹽懶惰菌種屬: Salipiger│mucosus提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株,用于分類學(xué)研究。培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 25℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒鈉石灰(帶指示劑) ACS2-甲氧基甲 98%3-吲哚基-beta-D-葡糖苷環(huán)已鹽(>98%(HPLC),BR)
Ⅰ型膠原C端肽(ICTP)ELISA試劑盒鈉石灰 CP2-烯酰氨基-2-甲基-1-磺 98%(>99%,BC)
Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒乙鈉,三 CP,98%肼甲芐酯 98%一化(>98%,BC)
Ⅰ型膠原C 端肽(CTX-Ⅰ)ELISA試劑盒銨 AR,97%5-茚酮 97%乙(>98.5%,BR)
Ⅰ型膠原(ColⅠ)ELISA試劑盒分散黃39 分析標(biāo)準(zhǔn)品4-二甲氨基吡啶 99%代(>98%,醫(yī)藥級(jí))
Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒N,N-二甲基對(duì)二 98%異煙 AR,99%硫化鐵 (II)(>70%,BR)
8異前列腺F2α(8-isoPGF2α)ELISA試劑盒N,N-二甲基對(duì)二 90%異煙 99%四氧化三鐵(>98%,BR)
8異前列腺F2α(8-iso-PGF2a)ELISA試劑盒2-溴乙氫鹽 98%肼甲甲酯 97%氧化鐵(III)(>98%,BC)
8異前列腺(8-iso-PG)ELISA試劑盒2-二乙氨基乙鹽鹽 99%三 AR,99.0%(易制品)正鐵(>98%,BR)
8-異構(gòu)前列腺F2α(8-epi-PGF2α)ELISA試劑盒5-楊 99%二 CP,99.0%還原鐵粉(>98%,BC)
8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)ELISA試劑盒化 AR,98%己二酰 98%1-溴代異戊(>98%,BR)
8-羥基鳥(niǎo)DNA糖苷(OGG1)ELISA試劑盒化 99%4-溴磺酰 98%異佛爾酮(>98%,BR)
6酮前列腺F1a(6-keto-PGF1a)ELISA試劑盒二月桂二丁基錫 95%戊二酰 97%異(>98%,BR)
6酮前列腺(6-K-PG)ELISA試劑盒2-二甲氨基乙鹽鹽 99%正庚 97%異香草(>98%,BR)
6-羥多巴(6-OHDA)ELISA試劑盒二二乙酯 99%10-十一烯 95%異香草(標(biāo)準(zhǔn)品)
60S核糖體蛋白L36a-樣(RPL36AL)ELISA試劑盒二乙氨基乙 99%乙偶姻 97%衣康(>98%,BR)