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詳細介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013372
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關參數(shù)應按照本說明書相關要求進行設置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
HDL ISA Kit 大鼠高密度脂蛋白Multi-class antibodies： 48T
Tanis/SELS(Selenoprotein S) 炎癥負調(diào)控因子蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Chicken IgG/HRP 辣根過氧化物標記的羊抗雞IgG 0.1ml
GABA(Mouse Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit 小鼠γ基丁 96T
NIMP NOGO相互作用線粒體蛋白1抗體 0.2ml
BrdU (A7) 溴脫氧尿苷單克隆抗體(增殖標志物) 0.1ml
Tanis/SELS(Selenoprotein S) 炎癥負調(diào)控因子蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
tTG-IgA(Human tissue transglutaminase IgA) ELISA kit 人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺抗體IgAMulti-class antibodies： 48T
IFN-Alpha 2b 干擾α2b抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh MAP3K2/MKK2 原活化蛋白激激2抗體 0.1ml
LDH(Human Lactate Dehydrogenase) ELISA Kit 人乳脫氫 96T
RAD21 核基質(zhì)蛋白21抗體 0.2ml
C6orf50 6號染色體開放閱讀框50抗體 0.2ml
IFN-Alpha 2b 干擾α2b抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit MK IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標記的兔抗猴IgM 0.1ml
GPAM 線粒體甘油3磷?；D(zhuǎn)移抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ANKRD20A1 錨蛋白重復結構域蛋白20A1抗體 0.2ml
Integrin AlphaV Beta5/FITC 熒光標記整合αVβ5抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG F(ab')2/AP 性磷(AP)標記的兔抗人IgG F(ab')2 0.1ml
SAMDC/AMD1/FITC 熒光標記S-腺苷蛋脫羧抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
開心果源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒人GTP活化蛋白（GAP）elisa檢測試劑盒
人STAT蛋白抑制因子3（PIAS3）elisa檢測試劑盒
人心肌鈣黏蛋白（H-Cadherin）elisa檢測試劑盒
人Preptin 蛋白（Preptin）elisa檢測試劑盒
人β淀粉樣前體蛋白（βAPP）elisa檢測試劑盒
人β甘露糖苷（β Manase）elisa檢測試劑盒
人Hedgehog相互作用蛋白（HHIP）elisa檢測試劑盒
人原鈣黏γA2（PCDHγA2）elisa檢測試劑盒
人N端中段骨鈣（N-MID-OT）elisa檢測試劑盒
人ras同源物基因家族成員b（RHOB）elisa檢測試劑盒
人Salusin α蛋白（Salusin α）elisa檢測試劑盒
人蛋白活受體3（PAR3）elisa檢測試劑盒
人IgA Fc片段受體（FcaR）elisa檢測試劑盒
人P糖蛋白/滲透性糖蛋白（P-GP）elisa檢測試劑盒
人SH2攜帶蛋白（SHC/SLP-76）elisa檢測試劑盒
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