詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:鵝細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號:FS-P013418
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品分類:純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human replication protein A,RPA-70 ELISA Kit 人復(fù)制蛋白AMulti-class antibodies: 48T
SUZ12/CHET9 胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/PE PE標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
GRO Alpha/CXCL1/MGSA(Human growth-regulated oncogene Alpha/melanoma growth stimulating activity) ELISA Kit 人生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑瘤生激因子 96T
ARHGAP17 神經(jīng)細(xì)胞發(fā)育相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 0.2ml
BTD 生物抗體 0.2ml
SUZ12/CHET9 胚胎干細(xì)胞抑制蛋白Suz12抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
ACA-IgM(Human cardiolipin antibody IgM) ELISA Kit 人抗心磷脂抗體IgMMulti-class antibodies: 48T
IQGAP1 支架蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh LIMK1 單絲蛋白激1抗體 0.1ml
HSV II -Ab(Human Herpes simplexvirus II antibody) ELISA Kit 人單純皰疹病毒Ⅱ型抗體 96T
QK1 RNA結(jié)合蛋白QK1抗體 0.1ml
Cytokeratin 10+14+17+19+42 細(xì)胞角蛋白19,17,14,42,10抗體 0.1ml
IQGAP1 支架蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit mouse Kappa light chain/PE-Cy7 PE-Cy7標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GBA β-葡萄糖腦苷脂抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AP2 gamma 轉(zhuǎn)錄因子AP-2γ抗體 0.1ml
IL-18R Beta/IL1R7/CD218b/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞介-18受體β鏈抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/APC APC標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
RASSF1A/FITC 熒光標(biāo)記Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
鵝細(xì)小病毒探針法熒光定量PCR試劑盒O1群霍亂弧菌種屬: Vibrio│cholerae O1提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: O1/eltor 稻葉(Inaba)培養(yǎng)基: CM0116生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
施氏假單胞菌種屬: Pseudomonas│stutzeri提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
巴氏葡萄球菌種屬: Staphylococcuspasteuri安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃
黑曲霉種屬: Aspergillus│niger提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: used for antimicrobial preservative test培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
脫氧尿三(DUTP)ELISA試劑盒1-基硅-1-己炔 98%N,N,N',N'-四甲基-O-(N-琥珀亞基)脲六氟鹽 98% 好替加氟(標(biāo)準(zhǔn)品)
脫氧膠原吡啶交聯(lián)(DPD)ELISA試劑盒三乙基3-甲基-4-膦?;?2-保泰松 80%三(N,N-四亞甲基)酰 98%阿昔莫司,阿西莫司
脫氧核糖核Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA試劑盒四氫對醌 Indicator1-對甲磺?;?3-硝基-1,2,4-三唑 98%阿昔莫司,阿西莫司(標(biāo)準(zhǔn)品)
脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒三(4 -甲氧基- 3 ,5 -二甲基)膦 500mg1-對磺酰咪唑 99%阿達(dá)帕林
脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒2-基硅乙炔基噻吩 97%O-(N-琥珀酰亞基)-N N N'N'-四甲基四氟脲 97%阿達(dá)帕林(標(biāo)準(zhǔn)品)
脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)ELISA試劑盒四基硫氫銨 離子對色譜級,≥99.0% (T)2,4,6-三吡啶基三 99% 阿德福韋
脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA試劑盒(±)-α-煙酚三(2-羧乙基)膦鹽鹽 98%阿德福韋(標(biāo)準(zhǔn)品)
脫氫表雄酮(DHEA)ELISA試劑盒化銩(III) 無 粉末,99.9% metals basis疊氮基基硅 93%呋喃妥因
脫-γ-羧基原(DCP)ELISA試劑盒尿苷-5′-二鈉鹽 98%O-并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲四氟酯 98%阿爾法骨化
褪黑(MT)ELISA試劑盒溴乙烯 1.0 M THF溶液2,4,6-三異基磺酰 97%PS48
突觸泡蛋白抗體(SYP-Ab)ELISA試劑盒乙烯基溴化鎂 1.0M in THFN,N,N′,N′-四甲基甲脒六氟鹽 99%硫鋅
突觸泡蛋白(SYP)ELISA試劑盒維生B6 分析標(biāo)準(zhǔn)品N,N,N',N'-四甲基-O-(3,4-二氫-4-氧代-1,2,3-并三-3-基)脲四硫辛(標(biāo)準(zhǔn)品)
突觸回蛋白2(SYNJ2)ELISA試劑盒纈草烯 98%N,N,N',N'-四甲基甲脒六氟鹽 98%鹽氨溴索
透明質(zhì)(HAase)ELISA試劑盒D-纈氨酰-L-亮氨酰-L-賴氨酰-對- 98%伍德沃德氏試劑K 98%鹽氨溴索(標(biāo)準(zhǔn)品)
透明質(zhì)結(jié)合蛋白2(HABP2)ELISA試劑盒3-環(huán)氧乙基-7-氧雜二環(huán)[4,1,0]庚 96%魏因勒卜鏈接劑 98%氨汀(三)
透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒木糖 分析標(biāo)準(zhǔn)品印刷標(biāo)簽,用于25G(ML)及以下包裝,尺寸: 94mm*28mm桿菌肽