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非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-14 10:47:18瀏覽次數(shù):227

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013420 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒正在出售的產(chǎn)品:153277-35-1蒽醌-2-磺酸鈉青鏈霉素混合液
66-84-2標(biāo)準(zhǔn)品精制胎牛血清
480-39-7標(biāo)準(zhǔn)品新生牛血清
南極棲海面菌無激素胎牛血清(活性碳/葡聚糖處理)

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)外包:

1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析

2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選

7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR

8.細(xì)胞及動物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

50次

FS-P013420

 

QQ截圖20201022162313.png 

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取,

多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽性對照),

一個(gè)是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行)

10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對照,6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實(shí)驗(yàn)步驟:

①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

LIR-8/CD85c/LILRB5/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞球蛋白樣受體8抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

 Survivin/PE 熒光PE標(biāo)記細(xì)胞凋亡抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh ADRA1/ADRA1B/alpha 1 Adrenergic Receptor alpha 1腎上腺能受體抗體  0.1ml

Rabbit  Goat IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.3ml

GRIK1 谷受體紅藻離子1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  dog IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗狗IgG  0.1ml

 Survivin/PE 熒光PE標(biāo)記細(xì)胞凋亡抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Apo-H(Human Apolipoprotein H) ELISA Kit 人載脂蛋白HMulti-class antibodies: 48T

 MASP2 甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh KATNA1/Katanin p60 A1 劍蛋白p60亞基A1抗體  0.2ml

Brucella Ab IgG(Human Brucella Antibody IgG) ELISA Kit 人布魯氏菌抗體IgG 96T

PYGM 肌肉糖原磷化抗體 0.2ml

CYP2D6 細(xì)胞色P450 2D6抗體 0.1ml

 MASP2 甘露聚糖結(jié)合凝集絲肽2抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rabbit  mouse Kappa light chain/APC APC標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml

Galectin 12 半乳糖凝集12抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh APAF1(CT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(C端)  0.1ml

 IL-17F/IL-24/FITC 熒光標(biāo)記白介-17F抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  human IgM/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗人IgM  0.1ml

 RAR- Beta /FITC 熒光標(biāo)記維甲受體-β抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
非洲馬瘟病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒創(chuàng)傷弧菌種屬: Vibrio│vulnificus分離基物: 生物樣/人體血液提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 1、模式菌株 2、用于食品等方面的微生物檢測,作為對照菌株。培養(yǎng)基: 471生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

球形賴氨芽孢桿菌種屬: Lysinibacillus│sphaericus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

煙曲霉種屬: Aspergillus fumigatus Fresenius提供形式: 凍干管,斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: Czapek's 瓊脂:蔗糖 30.0 g,NaNO3 3.0 g,MgSO4·7H2O 0.5 g,KCl 0.5 g,FeSO4·4H2O 0.01 g,K2HPO4 1.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾 1.0 L,pH 6.0-6.5,121℃,15min。121℃,15min。傳代方法: ①凍干管:75%酒精擦拭管壁,后用砂輪在凍干管壁劃兩圈,掰斷,用200μL無菌或培養(yǎng)基充分溶解,平板涂布,活化培養(yǎng)。

②斜面:試管口用75%酒精擦拭后,火焰灼燒,后用無菌接種鏟切塊,挑取接入平板或斜面,培養(yǎng)。生長條件: 25-28℃,好氧存儲條件: 2-8℃冷藏

腸侵襲性大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli EIEC分離基物: 腹瀉病例糞便標(biāo)本提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0002生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

天門冬氨轉(zhuǎn)氨/谷草轉(zhuǎn)氨(GOT/GPT)ELISA試劑盒乙酐 GR(易制品)(-)-乳乙酯 光致抗蝕劑級,99%氫檳榔(進(jìn)口)

天門冬氨氨基轉(zhuǎn)移(AST)ELISA試劑盒反式 CP,97.00%L-乳 85-90%氫檳榔;(進(jìn)口)

特異性巨噬武裝因子(SMAF)ELISA試劑盒脫氫乙鈉 99%DL-乳 ACS, ≥85%哌唑

套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒脫氫乙 98%L-乳鈉  AR,60%溶液唑(標(biāo)準(zhǔn)品)

糖脂抗體(glycolipid)ELISA試劑盒乙酰乙乙酯  >99.0%(GC)L-乳鈉 98%子囊霉

糖原化同工MM(GP-MM)ELISA試劑盒乙酰乙甲酯  99%6-氨基吲唑 98%子囊霉(標(biāo)準(zhǔn)品)

糖原化同工II(GP-II)ELISA試劑盒3-基吡啶 99%間羥基甲 98%阿扎那韋

糖原化同工BB(GP-BB)ELISA試劑盒鄰二甲 98%5-硝基吲唑 98%阿扎那韋(標(biāo)準(zhǔn)品)

糖原化(GP)ELISA試劑盒山梨 >99.0%(T)6-硝基吲唑 98%鹽托莫西汀

糖原合成激3(GSK-3)ELISA試劑盒2-基吡啶 98%硅鋁 AR,2000目鹽托莫西汀(標(biāo)準(zhǔn)品)

糖原合成激(GSK)ELISA試劑盒3-甲基吡啶 99%上門維修費(fèi)用阿托伐醌,阿托喹酮

糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)ELISA試劑盒4-基吡啶 98%2,2-偶氮二異丁 99%阿托伐醌,阿托喹酮(標(biāo)準(zhǔn)品)

糖皮質(zhì)受體β(GR-β)ELISA試劑盒山梨 AR,99%氨基胍碳?xì)潲} 98.5%阿西替尼

糖皮質(zhì)受體α(GR-α)ELISA試劑盒山梨 CP,99%氨基胍碳?xì)潲} 分析標(biāo)準(zhǔn)品阿扎哌隆

糖脂酰肌(GPI)ELISA試劑盒山梨 分析標(biāo)準(zhǔn)品3-巰基-1,2,4-三唑 97%鹽阿扎司瓊

糖鏈抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒山梨標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.00mg/mL,基體:純聚乙烯,1000 分析標(biāo)準(zhǔn)品氮卓斯汀


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