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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱(chēng)：鸚鵡熱衣原體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013421
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類(lèi)：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無(wú)到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè)；樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
LILRB3/CD85a/PirB/FITC 熒光標(biāo)記白細(xì)胞球蛋白樣受體-B抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Survivin/FITC 綠色熒光標(biāo)記Survivin蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ADRA2 ADRA2腎上腺能受體2抗體 0.1ml
Rabbit Goat IgM/FITC FITC標(biāo)記的兔抗羊IgM 0.3ml
GRASP 一般受體磷肌醇相關(guān)支架蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit dog IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗狗IgG 0.1ml
Survivin/FITC 綠色熒光標(biāo)記Survivin蛋白抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
GPI(Human glycophosphatidylinositol) ELISA Kit 人糖磷脂酰肌醇Multi-class antibodies： 48T
Matriptase 蛋白裂解(一種新的癌基因)抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh katanin p80 劍蛋白p80抗體 0.2ml
ADP ELISA Kit 大鼠脂聯(lián) 96T
PYGL 肝糖原磷化抗體 0.2ml
CYP2C9 細(xì)胞色P450 2C9抗體 0.1ml
Matriptase 蛋白裂解(一種新的癌基因)抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit mouse Kappa light chain/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
GABA Transporter 3 γ基丁運(yùn)載蛋白3抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh APAF1(NT) 凋亡蛋白活性因子-1抗體(N端) 0.1ml
IL-17E/IL-25/FITC 熒光標(biāo)記白介-17E抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgM/Cy5 Cy5標(biāo)記的兔抗人IgM 0.1ml
RAR- Alpha /FITC 熒光標(biāo)記維甲受體-α 抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
鸚鵡熱衣原體探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒黃直絲鏈霉菌種屬: Streptomyces│flavorectus提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株。對(duì)產(chǎn)朊圓酵母和稻瘟菌菌絲有溶菌作用。培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長(zhǎng)條件: 28-32℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
奇異變形桿菌種屬: Proteus│mirabilis提供形式: 其他安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
鏈霉菌種屬: Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
糖類(lèi)抗原72-4(CA72-4)ELISA試劑盒山梨 99.8%聚乙烯(PS) 通用型I，一般射出成型用桿菌肽鋅
糖類(lèi)抗原50(CA50)ELISA試劑盒L-氨甲酯鹽鹽 98%聚乙烯(PS) 通用型II,高強(qiáng)度鹽貝那普利/那普利
糖類(lèi)抗原19-9(CA19-9)ELISA試劑盒L-精氨乙酯 98%聚乙烯(PS) 通用型III,高強(qiáng)度、押出用、食品用鹽貝那普利/那普利(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖類(lèi)抗原199(CA199)ELISA試劑盒L-氨芐酯對(duì)甲磺鹽 98%聚乙烯(PS) 耐沖擊型扎貝特
糖類(lèi)抗原125(CA125)ELISA試劑盒L-天冬氨-β-芐酯 98%聚乙烯(PS) 高光澤度級(jí)扎貝特（標(biāo)準(zhǔn)品）
糖基化依賴(lài)的黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒Boc-L-谷氨酰 98%聚乙烯(PS) 擠出級(jí)布南色林
糖化血紅蛋白A1c(A1c)ELISA試劑盒BOC-L-絲氨 97%聚乙烯(PS) 食品級(jí)溴夫定
糖化血紅蛋白(HbA1C)ELISA試劑盒S-芐基-L-半胱氨 98%2,5-二基噁唑 99%, 閃爍級(jí)溴夫定(標(biāo)準(zhǔn)品)
糖化低密度脂蛋白(Gly-LDL)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-天冬氨 99%異磺酰酯 98%卡巴他賽
糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-纈氨 99%3,4-二甲氧基甲 98%米托蒽醌
糖化白蛋白(GA)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-亮氨 96%3,4-二甲氧基甲 ≥98%, FG拉莫三
糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-氨 98%愈創(chuàng)木酚 CP,98.0%拉莫三 （標(biāo)準(zhǔn)品）
糖蛋白130(gp130)ELISA試劑盒N-芐氧羰基-L-谷氨 98%球型四氧化三鐵磁粉 100-300nmD-半乳糖
糖聚糖(GAG)ELISA試劑盒Fmoc-L-亮氨 98%鄰二甲 ≥99%D-半乳糖(標(biāo)準(zhǔn)品)
羰基化蛋白(PC)ELISA試劑盒Fmoc-L-異亮氨 99%乙酰 AR,98.5%骨化三
羰基還原[NADPH] 1(CBR1/CBR/CRN)ELISA試劑盒Fmoc-L-精氨 98%乙酰 CP,98.0%坎地沙坦酯
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿(mǎn)洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
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