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詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）
2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液：1×20ml。
4、 檢測稀釋液A：1×10ml。
特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
50次 | FS-P013579 |
使用方法：
一、稀釋PCR陽性對照（以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例） 1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管，分別為7，6，5，4，3，2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。 4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩1分鐘，得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 5. 換槍頭，在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩1分鐘，得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 6. 換槍頭，在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中，充分震蕩1分鐘，得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品，必須設(shè)置N+2個(gè)提取， 多出的一個(gè)是PC（樣品制備陽性對照）， 一個(gè)是NC（樣品制備陰性對照）。 可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號（濃度為1×10E4 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于1萬拷貝）或第5號（濃度為1×10E5 拷貝/μL，10μL相當(dāng)于10萬拷貝）再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣，以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品，則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA，本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)（20 μL體系，在樣品制備室進(jìn)行） 10. 如果只做1次重復(fù)，則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管，其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品，1個(gè)用于PCR陰性對照，6個(gè)用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復(fù)，則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加）
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué)：基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué)：microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué)：2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測：DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測：Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測：HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué)：GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動物模型：原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動物模型構(gòu)建
KLRF1/NKp80/FITC 熒光標(biāo)記細(xì)胞毒性受體NK-p80抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Smad 1/FITC 熒光標(biāo)記Smad 1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALF/GTF2A1LF 通用轉(zhuǎn)錄因子IIA樣因子抗體 0.1ml
Rabbit human IgG/PE PE標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
GRAP 生長因子受體結(jié)合蛋白2相關(guān)接頭蛋白抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 0.1ml
Smad 1/FITC 熒光標(biāo)記Smad 1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
ICE(Human Interleukin 1 Beta converting enzyme) ELISA Kit 人白介1β轉(zhuǎn)換Multi-class antibodies： 48T
NDRG1/Cap43 分化相關(guān)基因NDRG1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-4I1 白細(xì)胞介4誘導(dǎo)蛋白1抗體 0.2ml
MMP-13 ELISA kit 大鼠基質(zhì)金屬蛋白13 96T
PRMT6 組蛋白精甲基轉(zhuǎn)移6抗體 0.1ml
C7ORF61 7號染色體開放閱讀框61抗體 0.2ml
NDRG1/Cap43 分化相關(guān)基因NDRG1抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Donkey Guinea pig IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
Glucose Oxidase 葡萄糖氧化抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASP/AKAP associated Sperm Protein 相關(guān)蛋白AKAP抗體 0.2ml
Phospho-HSL (Ser552)/FITC 熒光標(biāo)記磷化敏感脂肪抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 0.1ml
PI3K/P85 alpha/FITC 熒光標(biāo)記磷脂酰肌醇激抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
乙型腦炎（乙腦）病毒RT-PCR試劑盒50次安卡紅曲種屬: Monascus│anka提供形式: 斜面培養(yǎng)物；凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 腐乳中的色培養(yǎng)基: 13生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
棘橙小單孢菌種屬: Micromonospora│echinoaurantiaca提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 0015生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
鏈球菌種屬: Streptococcus│sp.提供形式: 凍干物安全等級: 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: ,弱毒株 A 專用培養(yǎng)基: CM0109生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
約氏黃桿菌種屬: Flavobacterium│johnsoniae分離基物: 天牛腸道提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料用纖維、植、木聚糖等的篩選培養(yǎng)基: 0002生長條件: 26℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法；礦物油法
噬性趨化因子-2(Eotaxin-2)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨 AR,25%溶液對酚 AR氘代吡啶(10 g )
噬性趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨 AR,25%甲溶液對酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品, ≥99.5% (HPLC)氘代吡啶(25 g )
嗜性粒趨化因子(Eotaxin)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨溶液 10%溶液對酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：甲氘代吡啶(25 g )
嗜粒趨化蛋白Eotaxin 2(Eotaxin 2/CCL24)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨溶液 10%甲溶液對酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00mg/ml，基體：甲氘代吡啶(50 g)
生長因子(GH)ELISA試劑盒四乙基溴化銨 98%對酚標(biāo)準(zhǔn)溶液1009mg/L,溶劑:甲氘代鹽(5g )
生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA試劑盒四乙基溴化銨 for ion pair chromatography對酚 >99.0% (GC)氘代鹽(5g )
神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒四甲基氫氧化銨 五合物 97%黃芪甲苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%氘代鹽(10g)
前動力蛋白1(PROK1/EG-VEGF)ELISA試劑盒四乙基溴化銨 99%高良姜 98%氘代鹽(10g)
凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX-1)ELISA試劑盒四乙基化銨 98%高良姜 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99%氘代鹽(50g)
苗條受體(Leptin receptor)ELISA試劑盒(S)-(-)-1,2,3,4-四氫異喹啉-3-羧 97%京尼平 98%氘代鹽(50g)
苗條(OB)ELISA試劑盒異丁酰乙乙酯 98%京尼平甙 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%氘代甲(5g)
苗條(LEP)ELISA試劑盒對氟甲 98%叔丁基二甲基硅 97%氘代甲(0.50 mL x 10 )
粒趨化蛋白2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒4-氟甲 98%叔丁基二甲基硅溶液 50%甲溶液氘代甲(0.5 mL x 10 )
粒巨噬集落激因子(GMCSF/CSF2)ELISA試劑盒3-氟甲 98%N,O-雙(基硅基)三氟 96%氘代甲(0.6ml x 10)
可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA試劑盒2-氟甲 98%N,O-雙(基硅基)三氟乙酰 for GC, ≥99.0% (GC)氘代甲(0.6ml x 10)
可溶性CD80(sCD80/B7-1)ELISA試劑盒3-氟甲 97%N,O-雙(基硅基)三氟 99% BSTFA + 1% TMCS氘代甲(10g )
PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
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