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詳細介紹
注意事項
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器、耗材應獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實驗應該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻，并應瞬時離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。
6.為防止熒光干擾，應避免裸手直接接觸PCR反應管，并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
7.儀器擴增相關(guān)參數(shù)應按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：豬源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品貨號：FS-P013367
產(chǎn)品規(guī)格： 50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運輸：低溫運輸
實驗過程：
一、試劑準備 1. DNA模板 2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此，擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
ACE I ELISA Kit 大鼠血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化Multi-class antibodies： 48T
Tat 細胞酪轉(zhuǎn)氨抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Chicken IgG/Cy7 Cy7標記的羊抗雞IgG 0.1ml
ACA-IgA ELISA Kit 大鼠抗心磷脂抗體IgA 96T
NXPH2 神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白2抗體 0.2ml
CD238 凱爾血型糖蛋白CD238抗體 0.2ml
Tat 細胞酪轉(zhuǎn)氨抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
IL-18(Human Interleukin 18) ELISA KIT 人白介18Multi-class antibodies： 48T
GFAP 膠質(zhì)纖維性蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Mouse Guinea pig IgG/Bio 生物標記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml
MYS(Human Myosin) ELISA Kit 人肌球蛋白 96T
RAD51C 癌和卵巢癌易感基因RAD51C抗體 0.2ml
Phospho-cdc25A (Ser293) 磷化細胞分裂周期蛋白25抗體 0.1ml
GFAP 膠質(zhì)纖維性蛋白抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rabbit MK IgM/Cy7 Cy7標記的兔抗猴IgM 0.1ml
GLO1 乙二1抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh ANKRD11 錨蛋白重復結(jié)構(gòu)域蛋白11抗體 0.2ml
Phospho-IRAK1 (Thr387) /FITC 熒光標記磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit human IgG F(ab')2 whole serum 兔抗人IgG F(ab')2抗血清 1ml
SCF/FITC 熒光標記干細胞生長因子抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
豬源性成分染料法熒光定量PCR試劑盒人質(zhì)膜膜泡關(guān)聯(lián)蛋白 （PLVAP）elisa檢測試劑盒
人叉頭框蛋白O4（FOXO4）elisa檢測試劑盒
人成骨生長肽/成骨多肽（OGP）elisa檢測試劑盒
人成纖維生長因子23（FGF23）elisa檢測試劑盒
人角質(zhì)轉(zhuǎn)谷氨酰（TGM1）elisa檢測試劑盒
人信號7A（SEMA7A）elisa檢測試劑盒
人叉頭框蛋白C1（FOXC1）elisa檢測試劑盒
人促甲狀腺釋放（TRH）elisa檢測試劑盒
人半乳凝集8（GAL8）elisa檢測試劑盒
人肝配蛋白A3 （EFNA3）elisa檢測試劑盒
人丙酮脫氫α（PDHα）elisa檢測試劑盒
人成纖維生長因子結(jié)合蛋白1（FGFBP1）elisa檢測試劑盒
人促睡眠肽α（δSIP-α）elisa檢測試劑盒
人表面膜球蛋白D（mIgD）elisa檢測試劑盒
人雌受體α（ERα）elisa檢測試劑盒
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