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詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：恙蟲病東方體PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號：FS-P013587
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
KLK9/FITC 熒光標(biāo)記激肽釋放9抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Slug/FITC 熒光標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh ALOX12/12 Lipoxygenase 12脂氧合抗體 0.1ml
Rabbit human IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG 0.1ml
GLYATL2 甘胺-N-?；D(zhuǎn)移樣2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Guinea pig IgM 兔抗豚鼠IgM 1mg
Slug/FITC 熒光標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
NON(Human nonmethylated oligonucleotide0 ELISA Kit 人非甲基化寡核苷Multi-class antibodies： 48T
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009) 磷化血小板源性生長因子受體-B抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Rhesus antibody Rh HLC8/Lung cancer related protein 8 肺癌相關(guān)蛋白8抗體 0.2ml
ANA(Human neutrophil antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細(xì)胞抗體 96T
PRL3 磷酯3蛋白抗體 0.2ml
C1orf125 1號染色體開放閱讀框125抗體 0.2ml
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1009) 磷化血小板源性生長因子受體-B抗體Multi-class antibodies： 0.1ml
Mouse human IgG(3D3)/RBITC 羅丹明標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
Glutamyl Prolyl tRNA synthetase/ProRS 谷酰-脯酰-tRNA合成抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASTN2 星形肌動(dòng)蛋白抗體 0.2ml
H-ras/FITC 熒光標(biāo)記原癌基因H-ras抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc 兔抗小鼠IgG-Fc 1mg
Phospho-c-Kit (Tyr719) /FITC 熒光標(biāo)記磷化原癌基因c-kit抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
恙蟲病東方體PCR試劑盒50次福氏志賀氏菌種屬: Shigella│flexneri提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B 蘇聯(lián)系統(tǒng)新城培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲條件: 真空冷凍干燥法
蠟狀芽孢桿菌種屬: Bacillus│cereus分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
肺炎克雷伯氏菌種屬: Klebsiella│pneumoniae提供形式: 凍干物安全等級: 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 致病菌芯片培養(yǎng)基: 2生長條件: 37℃存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法
玫瑰色鮮艷菌(加詞待譯)種屬: Roseivivax│litoreus分離基物: 樣/海提供形式: 凍干物模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
E-鈣粘附分子(E-Cadherin)ELISA試劑盒對基-β-D-吡喃半乳糖苷 98%二甲基烯1,4-丁二酯, 含100ppm MEHQ 穩(wěn)定劑, 95%乙二甲(色譜級)
CXC趨化因子配體1(CXCL1)ELISA試劑盒4-基-β-D-吡喃葡萄糖苷 98%二烯1,3-丁二酯, 含500 ppm 對二酚（HQ）穩(wěn)定劑, 98%異丁(色譜級)
CX3C趨化因子/fractalkine(FKN/CX3CL1)ELISA試劑盒4-基-2-乙酰氨基-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖苷 98%甲基烯叔丁酯, 包含有200 ppm MEHQ阻聚劑, 99%乙甲酯(色譜級)
CD80分子(CD80/B7-1)ELISA試劑盒4-基-2-乙酰氨基-2-脫氧-α-D-吡喃半乳糖苷 98%甲基烯環(huán)己酯, 包含60 - 100 ppm MEHQ（氫醌單甲）穩(wěn)定劑,乙二甲乙酯(色譜級)
B活化因子(BAFF/CD257/TNFSF13B)ELISA試劑盒鄰基-β-D-吡喃葡萄糖苷 99%二甲基烯二乙二酯 96%異戊(色譜級)
10kDa干擾γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒2-基-β-D-吡喃半乳糖苷 99%，non-animal origin甲基烯二乙基氨基乙酯, 包含100 ppm 吩噻, 99%甲(色譜級)
10kDa干擾γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10)ELISA試劑盒對-α-D-葡萄糖吡喃苷 99%烯乙氧基乙氧基乙酯, >90%(GC),含1000ppmMEHQ穩(wěn)定劑對甲酰(色譜級)
左右決定因子1(LEFTY1)ELISA試劑盒1-O-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷2,3,4,6-四乙鹽 98%二烯二乙二酯 75%硝(色譜級)
組織轉(zhuǎn)谷氨酰(TGM2)ELISA試劑盒三-O-乙?；?D-葡萄烯糖 98%烯二甲基氨基乙酯 99%正辛(色譜級)
組織因子通道抑制因子2(TFPI2)ELISA試劑盒5-硫代-D-葡萄糖 96%烯 N,N-二乙基氨基乙酯 95%2-戊酮(色譜級)
組織型纖溶原激活因子(tPA)ELISA試劑盒2,3,4,6-四-O-芐基-D-吡喃半乳糖 98%甲基烯異辛酯 99%3-戊酮(色譜級)
組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長因子β結(jié)合蛋白2(LTBP2)ELISA試劑盒四乙酰核糖 98%甲基烯甲氧基乙酯 98%,含60-100ppmMEHQ穩(wěn)定劑正(色譜級)
組織金屬蛋白抑制因子4(TIMP4)ELISA試劑盒5-溴-4-3吲哚基β-D 半乳糖 99%烯-2-甲氧乙基酯 98%正戊(色譜級)
組織金屬蛋白抑制因子3(TIMP3)ELISA試劑盒二巰基 97%二烯乙二酯 90%石油(色譜級)
組織金屬蛋白抑制因子2(TIMP2)ELISA試劑盒L-腎上腺 98%（劇品）乙二二甲基烯酯 98%石油(色譜級)
組織金屬蛋白抑制因子1(TIMP1)ELISA試劑盒重去甲腎上腺 ≥98%(HPLC),USP3-乙氧基烯乙酯 98%石油(色譜級)
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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