詳細(xì)介紹
組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)謩e配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
50次 | FS-P013499 |
使用方法:
一、稀釋PCR陽(yáng)性對(duì)照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例) 1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽(yáng)性對(duì)照。 2. 標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。 3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。 4. 在7號(hào)管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 5. 換槍頭,在6號(hào)管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 6. 換槍頭,在5號(hào)管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照到5號(hào)管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 7. 重復(fù)上面的操作直到得到6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。 | 二、樣品DNA的制備 8. 如果有N個(gè)樣品,必須設(shè)置N+2個(gè)提取, 多出的一個(gè)是PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照), 一個(gè)是NC(樣品制備陰性對(duì)照)。 可以用10μL上步制備的PCR陽(yáng)性對(duì)照的第4號(hào)(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于1萬(wàn)拷貝)或第5號(hào)(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當(dāng)于10萬(wàn)拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。 9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒。 | 三、設(shè)置qPCR反應(yīng)(20 μL體系,在樣品制備室進(jìn)行) 10. 如果只做1次重復(fù),則標(biāo)記N+9個(gè)PCR管,其中N+2個(gè)用于上步得到的N+2個(gè)樣品,1個(gè)用于PCR陰性對(duì)照,6個(gè)用于PCR陽(yáng)性對(duì)照。如果做2-3次重復(fù),則反應(yīng)設(shè)置數(shù)量相應(yīng)增加2或3倍。 11. 產(chǎn)品僅用于科研在標(biāo)記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后加)
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實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
Human high mobility group protein 17,HMG-17 ELISA Kit 人高速泳動(dòng)蛋白17Multi-class antibodies: 48T
SPY spindly抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
IL-8/CXCL8(Mouse interleukin 8) ELISA Kit 小鼠白介8 96T
NRH2 死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體 0.2ml
BIN2 癌相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml
SPY spindly抗體Multi-class antibodies: 0.1ml
Tyk-2(Human tyrosine kinase2) ELISA Kit 人酪激2Multi-class antibodies: 48T
NEP/MME 金屬肽鏈內(nèi)切抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh IL-4R/CD124 白細(xì)胞介4受體抗體IL-4Rα 0.1ml
LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit 小鼠白血病抑制因子受體 96T
PRSS8 絲蛋白8抗體 0.1ml
Claudin 11 少突膠質(zhì)細(xì)胞跨膜蛋白抗體 0.1ml
NEP/MME 金屬肽鏈內(nèi)切抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rabbit MG IgG/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 0.1ml
GPBP1L1 血管壁相連蛋白樣蛋白1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh AQP9 通道蛋白-9抗體 0.1ml
IL1RAPL1 /FITC 熒光標(biāo)記白介受體相關(guān)蛋白樣1前體蛋白抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
PRL1/PTP4A1/FITC 熒光標(biāo)記肝再生磷酯1抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
人偏肺病毒RT-PCR試劑盒50次溶血隱秘桿菌種屬: Arcanobacterium│haemolyticum分離基物: 呼吸道提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: yes培養(yǎng)基: 860生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
紫黑杜搟氏菌種屬: Duganella│violaceinigra分離基物: 森林土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes應(yīng)用領(lǐng)域: 模式菌株培養(yǎng)基: 904生長(zhǎng)條件: 30℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
大腸埃希氏菌種屬: Escherichia│coli提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
滑假絲酵母種屬: Candida│parapsilosis提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 飼料酵母,產(chǎn)色氨。培養(yǎng)基: CM0077生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
氧化(XOD)ELISA試劑盒化亞銅 CP酮 色譜級(jí),≥99.8%(GC)地達(dá)諾辛;去羥肌苷
環(huán)腺苷(cAMP)ELISA試劑盒化亞銅 CP乙丁酯 for HPLC, ≥99.7% (GC)羊藿次苷I
環(huán)酰(CTX)ELISA試劑盒 >99.5%1,4-二氧六環(huán) HPLC, ≥99.5%寶藿苷II;大花羊藿苷A;意卡瑞苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)
環(huán)腺苷(cAMP)ELISA試劑盒N,N'-羰基二咪唑 ≥97.0% (T) 乙乙酯 for HPLC, 99.9%槐屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
環(huán)鳥(niǎo)苷(cGMP)ELISA試劑盒N,N'-羰基二咪唑 99%正庚 農(nóng)殘級(jí), ≥99%(GC)槐屬苷
環(huán)加氧2(COX-2)ELISA試劑盒N,N'-琥珀酰亞基碳酯 98%正戊 for HPLC, ≥99.0%甲基麥冬二氫高異黃酮A,甲基麥冬黃酮A
環(huán)孢A(CsA)ELISA試劑盒1,2-二甲基咪唑 99%吡啶 for HPLC, ≥99.9%甲基麥冬黃酮B
踝蛋白(talin)ELISA試劑盒4,5-二基咪唑 98%四 for HPLC, ≥99.9%7,2'-二羥基-3′,4′-二甲氧基異黃
花生四烯5脂氧合(ALOX5/LOG5)ELISA試劑盒咪唑 99.5%,用于緩沖溶液甲 for HPLC, 99.9%(劇品)6aR,11aR)3-羥基-9,10-二甲氧基紫檀
花生四烯5脂加氧(ALOX-5)ELISA試劑盒咪唑 99.5%,用于熒光分析L-a-氨基己二 98%千層紙A-7-0-β-D-葡萄糖苷
花生四烯15脂加氧(ALOX15/LOG15)ELISA試劑盒咪唑 99.5%,分子生物學(xué)級(jí)聚乙烯 K-value 72-71 泮托拉唑鈉1.5合物
花生四烯(AA)ELISA試劑盒咪唑 99%聚乙烯 K-value 68-65泮托拉唑鈉1.5合物(標(biāo)準(zhǔn)品)
琥珀酰輔A合成(SCS)ELISA試劑盒1-甲基咪唑 99%聚乙烯 K-value 62-60 (S)-10-羥基喜樹(shù);10-羥基喜樹(shù)
紅原卟啉(EP)ELISA試劑盒1,1-硫代羰基二咪唑 95%聚乙烯 K-value 59-5510-羥基喜樹(shù)(標(biāo)準(zhǔn)品)
紅生成受體(EPOR)ELISA試劑盒1,1-硫代羰基二咪唑 90%乙酰 AR,99%甘草(消旋)
紅生成(EPO)ELISA試劑盒2,6-二硝 98%酰 96%芹糖甘草苷;甘草苷元-7-O-D-芹糖-4’-O-D-葡萄糖苷
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。