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牛呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

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更新時間:2022-04-14 14:23:39瀏覽次數(shù):213

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 50次
貨號 FS-P013588 應用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研    
牛呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒50次正在出售的產(chǎn)品:紅曲紅曲(斜面)氫過氧自由基(hydroperoxyl;HOO)
9001-48-3谷胱甘肽還原酶氮氧基(nitric Oxide;NO-)
膽酸、膽甾烷酸CAS:81-25-4次氯酸(hypochlorous acid;HOCl)
530-59-6芥子酸過氧亞硝基陰離子(peroxynitrite anion;ONOO-)

詳細介紹

特別提示:本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

牛呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒50次

50次

FS-P013588

組成及試劑配制:

1、酶標板:一塊(96孔)

2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

QQ截圖20201022162313.png 

實驗外包:

1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析

2.轉(zhuǎn)錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq

3.蛋白質(zhì)組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM

4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR

5.蛋白質(zhì)檢測:Western blot、Co-ip  EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA

6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細胞分選

7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構(gòu)建

使用方法:

一、稀釋PCR陽性對照(以10E2-10E7拷貝/μL這6個10倍稀釋度為例)

1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的DNA片段作為陽性對照。

2. 標記6個離心管,分別為7,6,5,4,3,2。

3. 用帶芯槍頭分別加入45 μL熒光PCR專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。

4. 在7號管中加入5 μL 1×10E8拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

5. 換槍頭,在6號管中加入5 μL 1×10E7拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得1×10E6拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

6. 換槍頭,在5號管中加入5 μL 1×10E6拷貝/μL的陽性對照到5號管中,充分震蕩1分鐘,得1×10E5拷貝/μL的陽性對照。放冰上待用。

7. 重復上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。

二、樣品DNA的制備

8. 如果有N個樣品,必須設(shè)置N+2個提取,

多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),

一個是NC(樣品制備陰性對照)。

可以用10μL上步制備的PCR陽性對照的第4號(濃度為1×10E4 拷貝/μL,10μL相當于1萬拷貝)或第5號(濃度為1×10E5 拷貝/μL,10μL相當于10萬拷貝)再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。如果每次制備需要200μL樣品,則PC和NC的體積也必須是200μL。

9. 用自選方法純化樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒。

三、設(shè)置qPCR反應(20 μL體系,在樣品制備室進行)

10. 如果只做1次重復,則標記N+9個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照,6個用于PCR陽性對照。如果做2-3次重復,則反應設(shè)置數(shù)量相應增加2或3倍。

11. 產(chǎn)品僅用于科研在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)

 

 

 

 

 

 

 

 

PCR實驗步驟:

①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。

②兩相分離 每1ml的試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。

③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。

④RNA清洗 移去上清液,每1ml試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。

⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。

⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。

Human latent membrane protein-1,LMP-1 ELISA Kit 人潛伏膜蛋白1Multi-class antibodies: 48T

 Slug 鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Goat  rabbit IgG/PE PE標記的羊抗兔IgG  0.1ml

AQP-1(Mouse Aquaporin 1) ELISA Kit 小鼠通道蛋白1 96T

NAT8L N-乙酰轉(zhuǎn)移8樣蛋白抗體 0.2ml

beta Glucan Receptor β葡聚糖受體抗體 0.1ml

 Slug 鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體Multi-class antibodies: 0.2ml

Human Protein Z ELISA Kit 人蛋白ZMulti-class antibodies: 48T

 Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021) 磷化血小板源性生長因子受體-B抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Rhesus antibody Rh HLC3/Kanadaptin 肺癌癌基因蛋白3抗體  0.2ml

ANGA(Human  neutrophil granules antibody) ELISA Kit 人抗中性粒細胞顆粒抗體 96T

PRL1 肝再生磷酯1抗體 0.1ml

C10orf140 10號染色體開放閱讀框140抗體 0.2ml

 Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr1021) 磷化血小板源性生長因子受體-B抗體Multi-class antibodies: 0.1ml

Mouse  human IgG(3D3)/Gold 膠體金標記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.5ml

Glutaredoxin 2 谷氧還蛋白2抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Astrocyte 人星形膠質(zhì)細胞抗體  0.2ml

 HPV16-E7/E7 protein/FITC 熒光標記人類狀瘤病毒16-E7抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit  mouse IgG-Fc fragment whole serum 兔抗小鼠IgG-Fc段抗血清  1ml

 Phospho-c-Kit (Tyr703) /FITC 熒光標記磷化原癌基因c-kit抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
牛呼腸孤病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒50次多量毛霉種屬: Mucor│abundans分離基物: 豬糞提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0091生長條件: 28℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

日本假單胞菌種屬: Pseudomonas japonica分離基物: 污處理廠的活性污泥中提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: yes應用領(lǐng)域: 分類學研究,可降解基酚。培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂;蛋白胨5.0g,牛肉浸取物3.0g,NaCl5.0g,瓊脂15.0g,蒸餾1.0L,pH7.0。[注]培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mgMnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。生長條件: 28℃,好氧,24h。存儲條件: -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

蘇云金芽孢桿菌種屬: Bacillus│thuringiensis分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0002生長條件: 30℃存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

宛氏擬青霉種屬: Paecilomyces variotii Bainier提供形式: 凍干粉安全等級: 1模式菌株: no應用領(lǐng)域: 防霉試驗菌培養(yǎng)基: 綜合PDA:20%馬鈴薯液1.0L,葡萄糖20.0g,二氫鉀3.0g,七硫鎂1.5g,維生B1 8mg,瓊脂20.0g,pH自然。121℃,15min。20%馬鈴薯液配置:取200g去皮馬鈴薯,煮沸30min,過濾取濾液,補足至1.0L。生長條件: 25-28℃,好氧

組織蛋白Z(CTSZ)ELISA試劑盒?;?99%二甲基烯甘油酯 90%三乙(色譜級)

組織蛋白W(CTSW)ELISA試劑盒牛磺 USP級,已通過培養(yǎng)測試甲基烯己酯 98%叔丁(色譜級)

組織蛋白V(CTSV)ELISA試劑盒二乙二  >98%(GC)二甲基烯1,6-己二酯 95%異辛(色譜級)

組織蛋白O(CTSO)ELISA試劑盒乙二 AR,98%二烯1,6-己二酯 90%異辛(色譜級)

組織蛋白L3(CTSL3)ELISA試劑盒對二甲 99%甲基烯羥乙酯 96%異辛(色譜級)

組織蛋白L(CTSL)ELISA試劑盒1,4-丁炔二 CP,97.0%甲基烯異癸酯 98%,含150ppm MEHQ穩(wěn)定劑甲基叔丁基(色譜級)

組織蛋白K(CTSK)ELISA試劑盒1,4-丁炔二  98%甲基烯異酯 85-90%,含150-200 ppm MEHQ穩(wěn)定劑正丁(色譜級)

組織蛋白G(CTSG)ELISA試劑盒1,4-丁炔二  Standard for GC, ≥99.5% (GC)二甲基烯新戊二酯 90%1-丁(色譜級)

組織蛋白F(CTSF)ELISA試劑盒1,4-丁炔二 GR,99% 二烯新戊二酯 89%N,N-二甲酰(色譜級)

組織蛋白D(CTSD)ELISA試劑盒三乙,合 AR,99.5%甲基烯十八基酯 96%1,4-二氧六環(huán)(色譜級)

組織蛋白A(CTSA)ELISA試劑盒三乙,合 CP,99.0%三乙二二甲基烯酯 95%,stabilized with 60-100 ppm MEHQ乙二二甲(色譜級)

組蛋白乙?;D(zhuǎn)移1(HAT1)ELISA試劑盒炔 99%(劇品)二甲基烯四乙二酯 包含~0.006% 對二酚 穩(wěn)定劑, 90%乙乙酯(色譜級)

組蛋白脫乙?;?/span>9(HDAC9)ELISA試劑盒炔 Standard for GC(劇品)烯四酯 98%,含500ppm氫醌單甲MEHQ穩(wěn)定劑甘油(色譜級)

組蛋白脫乙酰基8(HDAC8)ELISA試劑盒3-巰基-1-磺鈉 90%甲基烯四酯 97%N-甲基吡咯酮(NMP)(色譜級)

組蛋白脫乙?;?/span>7(HDAC7)ELISA試劑盒甲酯 AR,99.0%二甲基烯鋅 95%甲基環(huán)己(色譜級)

組蛋白脫乙酰基6(HDAC6)ELISA試劑盒甲酯 CP,98.0%2-萘-1-磺 98%碳烯酯(色譜級)


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