詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線(xiàn)殺菌裝置。
2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻,并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽(yáng)性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū),并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾,應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管,并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說(shuō)明書(shū)相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置;不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無(wú)害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱(chēng):牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR 試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào):FS-P013589
產(chǎn)品規(guī)格:50次
產(chǎn)品分類(lèi):純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物) 3.10×PCR Buffer 4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶 | 二、操作步驟 1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1(10pM) 2μl 引物2(10PM) 2μl Taq酶(2U/μl) 1μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。 2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。 3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;
3.樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。
4.除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿(mǎn)洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。
6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。
Human adaptor molecule apoptotic peptidase activating factor 1,APAF1 ELISA Kit 人銜接蛋白活化因子1Multi-class antibodies: 48T
SLT/SLT-IIe/O139 豬腫(O139)菌體蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat rabbit IgG/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的羊抗兔IgG 0.1ml
BTA(Human Bladder tumor antigen) ELISA Kit 人膀胱抗原 96T
Nocturnin 分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體 0.2ml
BMX 非受體性蛋白酪激ETK抗體 0.1ml
SLT/SLT-IIe/O139 豬腫(O139)菌體蛋白抗體Multi-class antibodies: 0.2ml
Human Protein C ELISA Kit 人蛋白CMulti-class antibodies: 48T
PSMD9 蛋白調(diào)解因子9Multi-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh HCG alpha(4A8) 人絨毛膜促性腺α 亞基單抗 0.1ml
大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA Kit 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125 96T
PRL 泌乳抗體 0.1ml
phospho-BNIP3 (Ser95) 磷化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體 0.1ml
PSMD9 蛋白調(diào)解因子9Multi-class antibodies: 0.2ml
Mouse human IgG(3D3)/FITC FITC標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體 0.1ml
Glutaredoxin 5 谷氧還蛋白5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh ASZ1 錨定蛋白樣蛋白1抗體 0.2ml
HPV18-E6/E6 protein /FITC 熒光標(biāo)記人類(lèi)狀瘤病毒18抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit mouse IgG-Fc/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml
phospho c-kit/SCFR/CD117(pTyr936)FITC 熒光標(biāo)記抗磷化原癌基因c-kit抗體IgGMulti-class antibodies: 0.2ml
牛呼腸孤病毒染料法熒光定量RT-PCR 試劑盒50次米根霉種屬: RhizopusoryzaeWentetPrinsen-Geerligs安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)乳培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 28-30℃
鏈球菌種屬: Streptococcus│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: B培養(yǎng)基: CM0109生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌種屬: Yersinia│enterocolitica提供形式: 凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 血清學(xué)分群(型) 44 福氏培養(yǎng)基: CM0116生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
土壤桿菌種屬: Agrobacterium│sp.提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 182生長(zhǎng)條件: 32℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
組蛋白脫乙?;?/span>5(HDAC5)ELISA試劑盒二甲酯 99%2-乙酰噻吩 99%四(色譜級(jí))
組蛋白脫乙酰基4(HDAC4)ELISA試劑盒乙酰楊 99%2-溴噻吩 98%三乙(色譜級(jí))
組蛋白脫乙?;?/span>3(HDAC3)ELISA試劑盒乙酰楊 用于植物培養(yǎng), ≥99.0%2,5-二溴噻吩 96%三(TFA)(色譜級(jí))
組蛋白脫乙?;?/span>2(HDAC2)ELISA試劑盒楊甲酯 AR,99%3-甲基噻吩 98%四乙基氫氧化銨(10%的溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]
組蛋白脫乙?;?/span>11(HDAC11)ELISA試劑盒楊甲酯 CP,98%噻吩-2-甲 98%四丁基氫氧化銨(10%的溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]
組蛋白脫乙?;?/span>10(HDAC10)ELISA試劑盒楊甲酯 藥用級(jí),99%噻吩-2-羧 99%四正丁基溴化銨[離子對(duì)色譜級(jí)]
組蛋白脫乙?;?/span>1(HDAC1)ELISA試劑盒楊甲酯 standard for GC, ≥99.5% (GC)2-噻吩乙酰 98%四正丁基化銨[離子對(duì)色譜級(jí)]
組蛋白H4(H4)ELISA試劑盒楊 AR,99.5%2-噻吩乙 98%四丁基氫銨 (0.5mol/L的溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]
組蛋白H3(H3)ELISA試劑盒楊 Ph. Eur., BP, USP, 99.5-100.5%噻吩 Standard for GC,>99.5%四丁基硫氫銨[離子對(duì)色譜級(jí)]
組蛋白H2B(H2B)ELISA試劑盒楊鈉 AR,99.5%噻吩 99%十二基基化[離子對(duì)色譜級(jí)]
組蛋白H2A(H2A)ELISA試劑盒楊鈉 CP,99.5%噻吩-2-乙 98%乙二丁基銨(約0.5mol/L的溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]
組蛋白H1(H1)ELISA試劑盒楊酰 99%3-噻吩甲 98%乙二基銨(約0.5mol/L的溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]
組-N-甲基轉(zhuǎn)移(HNMT)ELISA試劑盒楊酰 USP級(jí)對(duì)氨基乙酮 AR乙二戊基銨(約0.5mol/L溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]
組H4受體(HRH4)ELISA試劑盒楊酰 matrix substance for MALDI-MS三正丁基疊氮化錫 98%乙二己基銨(約0.5mol/L的溶液)[離子對(duì)色譜級(jí)]
組氨脫羧(HDC)ELISA試劑盒甲 重蒸餾, ≥99.5%2,4,6-三氮酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品1-磺鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]
組氨豐富糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒α,α,α-三甲 99%對(duì)乙酰氨基磺酰疊氮 95%1-丁磺鈉[離子對(duì)色譜級(jí)]