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詳細(xì)介紹
注意事項(xiàng)
1.公司產(chǎn)品僅用于科研整個(gè)檢測過程應(yīng)嚴(yán)格按照本說明書要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用，不能混用；實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作；三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。
2.為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。
3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對(duì)照。
4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時(shí)離心。
5.試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對(duì)照在第一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)本準(zhǔn)備區(qū)，并單獨(dú)存放。
6.為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進(jìn)行任何標(biāo)記。
7.儀器擴(kuò)增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進(jìn)行設(shè)置；不同批號(hào)試劑不能混用。
8.ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。
9.實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進(jìn)行無害化處理后方可丟棄。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：枯草芽孢桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次
產(chǎn)品貨號(hào)：FS-P013504
產(chǎn)品規(guī)格：50次
產(chǎn)品分類：純化試劑盒
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
實(shí)驗(yàn)過程：
一、試劑準(zhǔn)備 1. DNA模板 2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物） 3．10×PCR Buffer 4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5．Taq酶 | 二、操作步驟 1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5μl dNTP mixl 4μl 引物1（10pM） 2μl 引物2（10PM） 2μl Taq酶（2U/μl） 1μl DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。 2．調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。 3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。 4．PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。 |
操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。
4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。
6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
Human cartilage oligomeric protein,COMP ELISA Kit 人軟骨寡聚蛋白Multi-class antibodies： 48T
SPHK2 鞘氨醇激2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Mouse IgG/AP 性磷(AP)標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 0.1ml
Amylin ELISA Kit 大鼠胰淀 96T
phospho-NFKB p65(Ser536) 磷化細(xì)胞核因子抗體 0.1ml
BFSP2 晶狀體蛋白2抗體 0.2ml
SPHK2 鞘氨醇激2抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
UP(Human Proteinuria) ELISA Kit 人尿蛋白Multi-class antibodies： 48T
P2Y4R/P2Ry4 P2Y4受體抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh human serum 人血清抗體 0.2ml
PGE2 ELISA Kit 大鼠前列腺E2 96T
PRRSV 豬藍(lán)耳病病毒抗體 1ml
CCDC42 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體 0.2ml
P2Y4R/P2Ry4 P2Y4受體抗體Multi-class antibodies： 0.2ml
Rabbit Mink IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
GFPT2 D-果糖6磷轉(zhuǎn)移2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh Arfaptin 2 ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白2抗體 0.2ml
IL-1 Beta/FITC 熒光標(biāo)記白介1β抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Rabbit Mink IgG/PE-Cy3 PE-Cy3標(biāo)記的兔抗貂IgG 0.1ml
Polycystin 2/FITC 熒光標(biāo)記多囊腎蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies： 0.2ml
枯草芽孢桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒50次里氏木霉種屬: Trichoderma reesei提供形式: 凍干粉安全等級(jí): 1模式菌株: 未知培養(yǎng)基: 綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，二氫鉀 3g，硫鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。馬鈴薯煮液：200g馬鈴薯，去皮，切塊，放入蒸餾中煮沸30min，取濾液定容至1000mL,備用。121℃，15min。生長條件: 25-28℃，好氧
德氏乳桿菌乳亞種種屬: Lactobacillus│delbrueckii subsp. delbrueckii提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 檢測VB12。培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
異常漢遜酵母種屬: Hansenula│anomala提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 產(chǎn)酯酵母。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法
黑曲霉種屬: AspergillusnigervanTieghem安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 來自先靈藥業(yè)（廣州）有限公司培養(yǎng)基: 15生長條件: 25-28℃
骨形成蛋白7(BMP7)ELISA試劑盒喜樹 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%亞鉑 AR利奧西呱，BAY 63-2521
骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒喜樹 97%醋鈀 AR，Pd 46.0 - 48.0 %馬來非尼拉敏
骨形成蛋白4(BMP4)ELISA試劑盒二乙酯 98%氧化鈀 Pd ≥85% DANSYL-GCVLS
骨形成蛋白15(BMP15)ELISA試劑盒多烯紫杉 98%無氧化鉑 鉑含量≥85.4% 利那洛肽
骨形成蛋白(BMPs)ELISA試劑盒7-乙基-10-羥基喜樹 98%硝鉑溶液 Pt, 15%甲酰芍藥苷(標(biāo)準(zhǔn)品)
骨涎蛋白(BSP)ELISA試劑盒10-羥基喜樹 分析標(biāo)準(zhǔn)品，98%化鈀 Pd 59-60%3,4,5-三咖啡?？鼘?標(biāo)準(zhǔn)品)
骨退化特異標(biāo)志物(CTX-2)ELISA試劑盒紫杉 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98% 硝鈀(II) 合物 Pd ≥39.0%澤瀉A醋酯
骨特異性性B(ALP-B)ELISA試劑盒紫杉 98%鈀粉 99.9% metals basis，粒徑0.5μm澤瀉C-23-醋酯;澤瀉C單乙酯
骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒4-基 98%硫鈀 Pd 51.2%-53.9%香紫蘇內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)
骨橋(OPN)ELISA試劑盒3-奎寧環(huán)酮鹽鹽 99%硫鈀，二 Pd ≥44% 香紫蘇內(nèi)酯
骨膜蛋白/成骨特異性因子2(POSTN)ELISA試劑盒六代鉑鈉六合物 Pt 34.0%亞鈀 Pd ≥32.6% 桃葉珊瑚苷
骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒2'-氨基乙酮 97%氧化鉑化物 AR,99.95% 甲硝唑
骨性(BALP)ELISA試劑盒2-乙酮 95%鈀碳鈣 鈀含量, 5.0%甲硝唑(標(biāo)準(zhǔn)品)
骨鈣/骨谷氨蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒溴乙 97%超細(xì)鉑粉 99.9%,平均粒度:0.1-0.5μm乙酰哈巴苷
骨鈣(Osteocalcin)ELISA試劑盒溴 98%四化鉑 鉑含量，58%黃決明
骨鈣(BGP)ELISA試劑盒2-溴吡啶 98%海綿鉑 99.95%肉豆蔻(標(biāo)準(zhǔn)品)
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